客观的肠屏障丧失是克罗恩病(CD)的危险因素。这可能与肌球蛋白轻链激酶1 (MLCK1)表达的增加和酶激活有关，MLCK1增加肠细胞旁通透性，并与乳糜泻严重程度相关。此外，临床前研究表明，MLCK1募集到细胞连接是肿瘤坏死因子(TNF)诱导的屏障丧失以及实验性炎症性肠病进展所必需的。我们试图定义MLCK1募集的机制，并在药理学上针对这一过程。

设计体外评估了FK506结合蛋白8 (FKBP8)与MLCK1之间的蛋白相互作用。转基因和敲除肠上皮细胞系、人肠类器官和小鼠被用作临床前模型。这些发现在乳糜泻患者和对照组的活组织检查中得到了验证。

结果MLCK1特异性地与他克莫司结合的FKBP8 PPI结构域相互作用。敲除或显性FKBP8阴性表达可阻止tnf诱导的MLCK1募集和体外屏障丧失。他克莫司阻断了MLCK1- fkbp8结合，逆转了tnf诱导的MLCK1- fkbp8相互作用、MLCK1募集和体外和体内屏障丧失。CD患者的活组织检查显示，与对照组相比，MLCK1-FKBP8在细胞间连接处的相互作用数量增加。

结论与FKBP8的结合可以被他克莫司阻断，是MLCK1募集到细胞间连接和下游事件导致免疫介导屏障丧失所必需的。在CD中观察到MLCK1活性的增加，MLCK1在细胞连接处的定位和MLCK1- fkbp8周围的相互作用，这表明靶向这一过程可能对人类疾病有治疗作用。这些对疾病相关屏障丧失机制的新见解为FKBP8-MLCK1相互作用的治疗开发提供了关键基础。