主要gydF4y2Ba

呼吸道是严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)进入和感染的部位;然而，COVID-19是一种复杂的全身性疾病，影响心血管、肾脏、血液、胃肠道和中枢神经系统gydF4y2Ba1gydF4y2Ba．随着与纤维化相关的肺功能主要持续损害的证据出现，需要更多关于COVID-19对其他器官的长期影响的数据gydF4y2Ba2gydF4y2Ba．在严重COVID-19存活的患者中持续存在大量症状(参考文献)。gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba，gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)，并提出了长COVID综合征gydF4y2Ba5gydF4y2Ba，gydF4y2Ba6gydF4y2Ba．然而，症状的严重程度和持续时间在很大程度上仍不清楚。2003年SARS感染后出现慢性疲劳(参考文献)。gydF4y2Ba7gydF4y2Ba)，它是众所周知的一系列传染病的后果gydF4y2Ba8gydF4y2Ba，gydF4y2Ba9gydF4y2Ba，gydF4y2Ba10gydF4y2Ba，gydF4y2Ba11gydF4y2Ba，gydF4y2Ba12gydF4y2Ba，gydF4y2Ba13gydF4y2Ba．在SARS-CoV-2大流行之前，重症监护中的患者管理经常与精神和身体衰退有关，这可以部分解释严重疾病患者长时间COVIDgydF4y2Ba14gydF4y2Ba．然而，目前还没有很好地定义轻至中度患者的长时间COVID负担。我们对来自挪威卑尔根第一次大流行波的住院和居家隔离患者的前瞻性队列在初始COVID-19 6个月后的持续症状进行了评估。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

所有在卑尔根市唯一的集中检测设施确诊的患者，以及在该市两家医院(豪克兰大学医院和哈拉尔德斯普拉斯女院长医院)住院的所有患者都被邀请参加。从第一批确诊的居家隔离患者和第一批住院患者开始招募;在第一波大流行期间，92%的患者同意参与。目的是确定与长期并发症相关的因素和生物标志物。从2020年2月28日至4月4日，我们连续招募了357名SARS-CoV-2阳性患者。我们收集了人口统计学和临床数据以及血液样本。检测呈阳性的患者的家庭成员被纳入以确保队列的完整性，他们的感染在2个月时由sars - cov -2特异性抗体诊断gydF4y2Ba15gydF4y2Ba．随访6个月时，可用于分析的研究人群包括312例患者，其中247例为居家隔离患者，65例住院患者(图4)。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

图1:研究人口流程图。gydF4y2Ba
图1gydF4y2Ba

基线时符合纳入条件的参与者人数，2个月时采血，6个月时进行评估和疲劳评估。卑尔根市急诊诊所;LTF，失访。gydF4y2Ba

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研究人群的中位年龄为46岁(四分位范围(IQR) 30-58岁)，其中51%(160/312)为女性。44%有合并症(137/312)，最常见的是慢性肺病(12%，38/312,34伴哮喘)、高血压(11%，35/312)、慢性心脏病(7%，22/312)、风湿病(6%，20/312)、糖尿病(4%，13/312)和免疫抑制疾病(4%，11/312)。在记录急性疾病期间症状的272名患者中，疲劳(90%，244/272)、咳嗽(71%)、头痛(64%)、肌痛(58%)和呼吸困难(55%)是最常见的，而只有21%出现发烧。住院患者比居家隔离患者年龄更大，身体质量指数(BMI)更高，并有更多的共病，包括慢性肺病、慢性心脏病、高血压和糖尿病(表2)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表1可随访6个月的研究人群特征gydF4y2Ba
全尺寸表gydF4y2Ba

61%(189/312)的患者在首次COVID-19发病6个月后出现持续症状，最常见的症状是疲劳(37%)、注意力难以集中(26%)、嗅觉和/或味觉障碍(25%)、记忆问题(24%)和呼吸困难(21%)。尽管在研究人群中，大多数症状的频率随着年龄的增长而增加，但嗅觉和/或味觉障碍在46岁以下的人群中更为频繁(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。39%的研究人群，通常是儿童和年轻人，在6个月时没有症状。即使在247名家庭隔离患者中，55%(136/247)在6个月时出现持续症状，最常见的是疲劳(30%)、味觉和/或嗅觉障碍(27%)、注意力障碍(19%)、记忆丧失(18%)和呼吸困难(15%)(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表2 247例居家隔离COVID-19患者6个月随访的长期并发症按年龄分组gydF4y2Ba
全尺寸表gydF4y2Ba

最年轻的年龄组(0-15岁)很少出现持续症状(13%，2/16岁)，而16-30岁因轻度至中度初始疾病而在家隔离的年轻人中，52%(32/61岁)出现持续症状，最常见的是味觉和/或嗅觉障碍(28%)、疲劳(21%)、呼吸困难(13%)以及注意力不集中(13%)和记忆力减退(11%)(表)gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。在这些年轻人中，共病与持续症状无显著相关性(33%对31%，gydF4y2BaPgydF4y2Ba= 1)或疲劳(47%对27%，gydF4y2BaPgydF4y2Ba= 0.2)，尽管受试者数量很低。gydF4y2Ba

在感染后约1-2个月，恢复期抗体达到平台期，为免疫反应的大小提供了一般标记gydF4y2Ba16gydF4y2Ba．住院患者2个月后检测的SARS-CoV-2刺突蛋白特异性IgG和微中和抗体滴度明显高于家庭隔离患者(gydF4y2BaPgydF4y2Ba< 0.001;扩展数据图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。在多变量分析中，2个月时抗体滴度的增加与初始疾病的严重程度、年龄和较高的BMI相关(表gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba和无花果。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba；严重性评分改编自Beigel等人。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表3与COVID-19恢复期抗体滴度增加相关的因素gydF4y2Ba
全尺寸表gydF4y2Ba
图2:挪威卑尔根COVID-19患者6个月随访。gydF4y2Ba
图2gydF4y2Ba

初发病严重程度和年龄与抗sars - cov -2抗体峰值的关系(gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba而且gydF4y2BabgydF4y2Ba)和微量中和抗体效价(gydF4y2BaegydF4y2Ba而且gydF4y2BafgydF4y2Ba)。2月龄时抗体滴度与持续症状次数的关系(gydF4y2BacgydF4y2Ba而且gydF4y2BaggydF4y2Ba)及根据查尔德量表(gydF4y2BadgydF4y2Ba而且gydF4y2BahgydF4y2Ba)，随访6个月。使用的13个症状列于表中gydF4y2Ba2gydF4y2Ba．病情严重程度如下:1 -无症状(gydF4y2BangydF4y2Ba= 5);2个家庭隔离，有症状(gydF4y2BangydF4y2Ba= 242);3人住院，无医疗需要(gydF4y2BangydF4y2Ba= 0);4人住院，有医疗需要(gydF4y2BangydF4y2Ba= 31);5名住院需要OgydF4y2Ba2gydF4y2Ba（gydF4y2BangydF4y2Ba= 24);6人住院需要无创通气(gydF4y2BangydF4y2Ba= 4);7家医院需要呼吸器(gydF4y2BangydF4y2Ba= 6)。研究对象被分为15岁年龄组:0-15岁(gydF4y2BangydF4y2Ba= 16)， 16 - 30 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 65)， 31-45 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 69)， 46-60 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 90)及>60 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 72)。gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba，gydF4y2BabgydF4y2Ba，gydF4y2BaegydF4y2Ba而且gydF4y2BafgydF4y2Ba显示中位数峰值IgG和微中和抗体滴度(水平线)，25%和75%分位数(方框)，加上95%置信区间(线)与异常值(点)。gydF4y2BacgydF4y2Ba而且gydF4y2BadgydF4y2Ba是将症状数量(最多13个)或疲劳评分(值0-33)分为四类的小提琴图。gydF4y2BangydF4y2Ba= 21)， 150-4999 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 96)， 5,000-20,000 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 103)及>2万(gydF4y2BangydF4y2Ba= 92)。5 k, 5000;20 k, 20000。gydF4y2BaggydF4y2Ba而且gydF4y2BahgydF4y2Ba四类微量中和滴度的小提琴图:<20(阴性gydF4y2BangydF4y2Ba= 42)， 20-79 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 107)， 80-320 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 92)及>320 (gydF4y2BangydF4y2Ba= 71)。OgydF4y2Ba2gydF4y2Ba补充氧气。gydF4y2Ba

全尺寸图像gydF4y2Ba

多变量分析显示，增加的抗体滴度和已有的肺部疾病与6个月时的持续疲劳和症状总数独立相关(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba和无花果。gydF4y2Ba2 c, d、g hgydF4y2Ba)。初始疾病的严重程度与持续性疲劳相关，与症状总数相关性较弱gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

表4 6个月随访中与症状数量增加和疲劳评分升高相关的COVID-19患者因素负二项回归分析gydF4y2Ba
全尺寸表gydF4y2Ba

SARS感染后出现过病毒后疲劳gydF4y2Ba7gydF4y2Ba以及其他病毒感染gydF4y2Ba11gydF4y2Ba，gydF4y2Ba12gydF4y2Ba，gydF4y2Ba13gydF4y2Ba．为了评估疲劳程度，我们使用了针对成年人的Chalder疲劳评分gydF4y2Ba18gydF4y2Ba，gydF4y2Ba19gydF4y2Ba．疲劳被定义为11个问题的双峰总分为4分或更高。30%(69/231)的16岁或以上的家庭隔离患者在6个月时出现疲劳，而63%(39/62)的住院患者出现疲劳。6个月重度疲劳，定义为双峰评分≥4 +总有序评分≥23,7%(17/231)的家庭隔离患者和24%(15/62)的住院患者存在严重疲劳(补充表)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。在家庭隔离患者中，身体疲劳最常见的症状(问题1-7)是疲劳(35%，81/231)、需要休息的增加(30%)和缺乏精力(29%);最常见的精神疲劳症状(问题8-11)是语词困难(23%)、注意力难以集中(19%)和记忆问题(18%)(补充表)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

在16岁或以上的患者中，急性疾病期间的发热、初始疾病的严重程度和女性性别与6个月时的疲劳相关(补充表)gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。在多变量分析中，除女性性别外，既往肺部疾病、急性疾病的严重程度和恢复期抗体滴度的增加与6个月时疲劳评分的增加独立相关(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba和无花果。gydF4y2Ba2 d hgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

尽管初始疾病严重程度和2个月时抗体滴度之间存在相关性，但在多变量分析中，这两个因素都与长COVID特征独立相关(表2)gydF4y2Ba4gydF4y2Ba及补充表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。在对242例低至中度症状的家庭隔离患者的分层分析中，抗体滴度的增加与症状数量(优势比(OR) = 1.56，可信区间(CI) 1.23-1.96)和疲劳评分(OR = 1.07, CI 1.02-1.12)仍存在相关性(OR = 1.48, CI 0.98-2.31)。gydF4y2Ba

讨论gydF4y2Ba

我们的研究在评估长时间COVID症状方面具有创新性，不仅包括住院患者，还包括年轻患者和病情较轻的家庭隔离患者。一种强度是指在免疫未成熟人群中，由来自第一次大流行浪潮的抗体和逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)阳性患者(包括疾病的所有严重程度)组成的几乎完整的、地理上确定的队列。小的亚组是本研究的一个局限性，我们的发现应该在更大的队列中得到证实。gydF4y2Ba

我们发现，在我们的队列中，很大一部分COVID-19幸存者在最初患病6个月后仍有持续症状。尽管此前有报道称，因严重COVID-19住院的患者经常出现长期症状gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba，gydF4y2Ba21gydF4y2Ba，gydF4y2Ba22gydF4y2Ba，gydF4y2Ba23gydF4y2Ba我们发现，超过一半的家庭隔离、轻至中度COVID-19患者在感染后6个月仍有症状。令人担忧的是，未住院的年轻人(16-30岁)在感染半年后可能会出现严重的症状，如注意力和记忆问题、呼吸困难和疲劳。特别是对于学生来说，这些症状可能会影响他们的学习和学习进度。gydF4y2Ba

COVID-19患者持续疲劳的高流行率令人震惊，似乎高于流感、eb病毒单核细胞增多症和登革热等常见感染后观察到的水平gydF4y2Ba11gydF4y2Ba，gydF4y2Ba12gydF4y2Ba，gydF4y2Ba13gydF4y2Ba．此前挪威的数据显示，普通人群的慢性疲劳患病率略低(11%)gydF4y2Ba24gydF4y2Ba与目前的家庭对照组(14%)相比，他们比感染患者更年轻，有更少的共病，但在同一时间采样。然而，这种明显的差异可能是一个巧合，因为数字很低。我们发现，女性的疲劳患病率更高，这与早期在挪威普通人群中进行的一项研究结果一致gydF4y2Ba24gydF4y2Ba．疾病严重程度和持续症状之间的关联与来自COVID-19住院患者的数据一致(参考文献)。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba)。由于呼吸道是COVID-19的主要靶器官，我们发现潜在慢性肺部疾病(主要是哮喘)与包括疲劳在内的持续症状之间存在关联并不令人惊讶。gydF4y2Ba

严重的初始疾病和2个月时抗体滴度增加之间的联系可能是由于更高的病毒载量，这可能更深刻地触发免疫系统gydF4y2Ba25gydF4y2Ba．随着年龄的增长，恢复期抗体滴度增加，这可以解释为老年人的疾病更严重，因为年龄是已知的严重COVID-19的一个强大风险因素。然而，与老年人感染流感后观察到的免疫衰老相比，多变量分析表明，年龄和疾病严重程度与抗体滴度的增加独立相关。这些发现呼吁加强对COVID-19大规模疫苗接种计划的监测。16-30岁的轻度COVID-19家庭隔离患者有出现持久呼吸困难和认知症状的风险。考虑到在当前的大流行期间有数百万年轻人被感染，我们的研究结果为全面控制感染和全民大规模接种疫苗提供了强大动力。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba

道德的考虑gydF4y2Ba

所有参与者或16岁以下儿童的监护人提供书面知情同意。该研究得到了西挪威地区伦理委员会的批准。118664)。除了偿还前往诊所的旅费外，没有向参与者提供任何补偿。gydF4y2Ba

研究人群gydF4y2Ba

作为长期随访的前瞻性队列研究的一部分，我们连续招募了在2020年2月28日至4月4日期间被诊断为COVID-19的家庭隔离患者，当时是挪威卑尔根的大流行第一波浪潮。对于住院患者，由于住院时间延迟，我们接受较长时间的纳入，直到5月6日。研究人群包括在卑尔根市急诊诊所诊断的SARS-CoV-2 rt - pcr阳性患者，以及在邻近的两家市立医院(豪克兰大学医院和哈拉尔德斯普拉斯女院长医院)住院的患者。已确诊患者的家庭接触者被邀请作为继发性病例(血清转换者)或血清阴性对照参加研究gydF4y2Ba15gydF4y2Ba．所有登记的SARS-CoV-2患者都被邀请参加。纳入时的初始参与率为92% (278/302);2个月时，参与率为88%(336/381，分子分母包括此时血清阳性的家庭成员);在6个月时，参与率为82%(312/381)。在感染后2个月采集恢复期血清，检测抗sars - cov -2抗体滴度。gydF4y2Ba

卑尔根的所有检测都集中在急诊诊所和该市的两家医院，允许招募卑尔根所有自愿诊断为COVID-19的患者。在此期间，共有3 319名患者在市紧急诊所接受了RT-PCR检测。其中，228人的RT-PCR检测呈阳性，6人因住址在卑尔根以外或因住院而被排除在外。在市紧急诊所看到的所有疑似病例都由医务人员进行了临床检查和诊断。中度疾病的患者被送回家进行居家隔离，如果病情严重，则住院治疗。大多数住院患者是在入院时确诊的。采集鼻咽拭子进行实验室确认。通过电话告知患者RT-PCR检测结果，RT-PCR检测在三级医院的参考微生物实验室进行。我们通过电话联系了所有确诊的家庭隔离患者，邀请他们加入研究。通过调查rt - pcr阳性患者家庭成员的血清转换，确定了另外79例患者。 Telephone interviews were conducted by medical staff to collect clinical and demographic data. Participants attended the University Clinic at 2 months (6–8 weeks) and 6 months (±1 month) for follow-up appointments with medical staff where they were interviewed about long-term symptoms.

临床数据gydF4y2Ba

所有同意的患者都参加了随访门诊，并在基线、2个月和6个月接受了医务人员的采访。他们提供人口统计资料;基线和6个月随访时症状的临床信息;以及潜在风险因素的信息，包括合并症和药物的使用。急性疾病期间记录的具体症状包括发烧、咳嗽、呼吸困难、疲劳、肌痛和头痛。参与者被问及是否有任何合并症，如果有，问他们哪些具体合并症来自以下疾病:哮喘、慢性阻塞性肺病、慢性心脏病、高血压、慢性肝病、肾病、神经肌肉疾病、痴呆、风湿病、活动性癌症、其他严重慢性疾病和免疫抑制条件，包括遗传免疫缺陷、艾滋病毒、器官移植和细胞抑制或其他免疫抑制治疗。收集的数据包括初始疾病的严重程度——即是否需要住院、急性疾病期间的症状以及是否需要无创通气支持或呼吸机治疗gydF4y2Ba17gydF4y2Ba．放射学调查只对住院病人进行。在6个月的随访中，所有16岁或以上的参与者被邀请完成一份根据Chalder疲劳量表包含11个关键问题的验证疲劳问卷gydF4y2Ba18gydF4y2Ba，gydF4y2Ba19gydF4y2Ba．疲劳被定义为二分类总分为4分或更高。重度疲劳被定义为疲劳加上Chalder总分23分或更高。gydF4y2Ba

实验室方法gydF4y2Ba

基于鼻咽拭子标本的RT-PCR和SARS-CoV-2抗体阳性的血清学证据对COVID-19进行诊断gydF4y2Ba26gydF4y2Ba．在感染后2个月收集血清样本，检测抗sars - cov -2抗体滴度，保存在−80°C，待分析。样品在56°C下热灭活1小时，然后用两步ELISA法检测sars - cov -2特异性IgG抗体(Southern Biotech, cat。不。2040-05)到受体结合域(RBD)(筛选1:100稀释)和穗蛋白(确认从1:100稀释5倍)。终点滴度计算为血清稀释度的倒数，给出的光密度值比大流行前历史血清样本的均值高出3个标准差(gydF4y2BangydF4y2Ba= 128)gydF4y2Ba26gydF4y2Ba．如前所述，在经过认证的生物安全3级实验室中，使用当地分离株hCoV-19/Norway/Bergen-01/2020 (GISAID加入ID EPI_ISL_541970)进行微中和试验，检测含有RBD抗体的血清gydF4y2Ba27gydF4y2Ba．简单地说，从1:20稀释开始双倍稀释血清，并与100 TCID混合gydF4y2Ba50gydF4y2Ba然后用兔抗SARS-CoV2单克隆IgG (Sino Biological, cat。不。40143-R019-100)和生物素化山羊抗兔IgG (H+L)(南方生物技术，猫。不。4050-08)和外渗过氧化物酶(Sigma-Aldrich，猫。不。E2886)。微中和抗体滴度是血清稀释度的倒数，对病毒的传染性有50%的抑制作用。所有对照组在6个月时血清学均为阴性。gydF4y2Ba

统计分析gydF4y2Ba

使用REDCap(范德比尔特大学研究电子数据捕获)的电子病例报告表格输入数据。所有分析均在R版本4.0.3中进行(gydF4y2Bawww.r-project.orggydF4y2Ba)，并使用ggplot和gridExtra包在R中生成图表。对问卷做出回应的患者被纳入分析，结果以百分比表示，其中包括平均值或中位数和95% ci。在单变量分析中，分类变量采用卡方检验和二项逻辑回归进行比较，并以or、95% ci和gydF4y2BaPgydF4y2Ba值。gydF4y2Ba

多变量分析采用二元逻辑回归对二分结果变量(补充表)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba而且gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。我们使用负二项回归，使用R中的MASS包来分析与数值结果变量相关的因素(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)，即“症状数量”，根据表中列出的症状，编码为0到13之间的整数gydF4y2Ba2gydF4y2Ba，疲劳评分根据Chalder量表，包括0到33的值。以恢复期抗体滴度作为结局变量，我们对滴度值进行对数变换，得到接近正态分布，并进行线性回归，分别以未调整和调整的几何平均比报告结果，用于单变量和多变量分析gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba)。在表中gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba而且gydF4y2Ba4gydF4y2Ba，我们包括了一个先验的潜在风险因素的兴趣，但忽略了罕见的发生，并且，在多变量分析中，我们包括了性别和具有显著性水平的变量gydF4y2BaPgydF4y2Ba单变量分析< 0.1。由于刺突IgG和微中和抗体滴度之间有很强的共线性关系，并且由于微中和抗体占总IgG的比例，我们在多变量分析中省略了微中和抗体。gydF4y2Ba

分析的重点是抗体滴度作为暴露变量对疲劳和症状评分的潜在影响，分别作为结果变量。我们评估了在单变量分析中显著的所有其他暴露因素的混杂和效应量修正。gydF4y2Ba

疾病严重程度的分类使用八类顺序量表，如以前发表的gydF4y2Ba17gydF4y2Ba．类别如下:1 -不住院，活动不受限制;2 -未住院，活动受限，在家需氧或两者兼有;3 -住院，不需要补充氧气，也不再需要持续的医疗护理(用于因感染控制或其他非医疗原因延长住院时间);4人住院，不需要补充氧气，但需要持续的医疗护理(与COVID-19或其他医疗状况有关);5人住院，需要补充氧气;6人住院，需要无创通气或使用高流量氧气装置;7例住院，接受有创机械通气或体外膜氧合;和8-death。gydF4y2Ba

报告总结gydF4y2Ba

关于研究设计的进一步信息可在gydF4y2Ba自然研究报告摘要gydF4y2Ba链接到本文。gydF4y2Ba