跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

点政府

gov意味着它的官员。
联邦政府网站经常在gov或mil。共享敏感信息之前,确保你在一个联邦政府网站。

Https

这个网站是安全的。
的https://确保你连接到官方网站,您提供的任何信息是加密和传输安全。

访问键 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
。 2016年5月,28日(5):211 - 22所示。
doi: 10.1093 / intimm / dxv062。 Epub 2015 10月20。

鸟嘌呤核苷及其修改衍生品是TLR7内源性配体

佐藤柴田先生1, Umeharu Ohto2, Shosaku野村3, Kayoko Kibata3, Yuji Motoi4, 燕张4, Yusuke村上的4, Ryutaro福井4, Tatsushi Ishimoto5, Shigetoshi佐5, 名叫Tomoki Ito3, Toshiyuki清水6, Kensuke宅一生7
从属关系
免费的PMC的文章

鸟嘌呤核苷及其修改衍生品是TLR7内源性配体

佐藤柴田先生et al。 Int Immunol。 2016年5月。
免费的PMC的文章

文摘

toll样受体(TLR) 7日和8日被认为是承认以单链RNA (ssRNA)病毒。虽然这些受体也应对小化学合成配体,如CL075 R848,仍有待确定是否这些受体感觉天然小分子。结构的人类与ssRNA TLR8 (huTLR8),有两个配体结合网站:一个结合尿苷和另一个结合oligoribonucleotide(内在的)。这一发现表明,huTLR8承认ssRNA降解产物,表明自然小配体的存在。我们这里显示TLR7作品作为鸟嘌呤核苷的传感器(G) / 2的脱氧鸟苷(dG)的内在过程中加强与G / dG TLR7交互。此外,修改7-methylguanosine等核苷,8-hydroxyguanosine (8-OHG)和8-hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG)激活TLR7菜用。重要的是,8-OHdG-a知名氧化DNA损伤标记未知function-induced强大的细胞因子生产与G和dG在老鼠和人类免疫细胞。尽管8-OHdG绑定TLR7 /内在亲和力较低比dG在等温滴定量热法,管理8-OHdG比dG在血清中新陈代谢更稳定,表明8-OHdG作用于TLR7作为内源性配体体内解决G的角色类似物在疾病状态,我们还研究了巨噬细胞从Unc93b1 (D34A / D34A)小鼠,遭受TLR7-dependent系统性炎症,发现Unc93b1 (D34A / D34A)巨噬细胞显示显著增强应对G单独或与内在8-OHdG。总之,我们的研究结果提供的证据表明,G, dG, 8-OHG 8-OHdG TLR7小说内源性配体。

关键词:8-OHG;8-OHdG;G;TLR7;dG。

数据

图1所示。
图1所示。
人类TLR8由U类似物和ssRNA协同激活。分析了人类TLR8 (huTLR8)响应NF-κB-dependent荧光素酶使用HEK293T细胞表达huTLR8记者分析。细胞被刺激,(A)各种1毫米的核苷有或没有μg 20毫升1ssRNA40;(B)各种μg 20毫升1ssRNA有或没有1毫米U;(D) 1毫米U, U核苷酸或尿嘧啶有或没有μg 20毫升1ssRNA40;(E) 1毫米U,脱氧尿苷(dU)β-pseudouridine或5-methyluridine有或没有μg 20毫升1ssRNA40 DOTAP的存在。(C)由WT huTLR8 NF-κB激活第一个站点突变体(F405A)和第二项突变体(H373A, R375A L474A) huTLR8应对μg 20毫升1ssRNA40 1毫米U, 1毫米μg U + 20毫升1ssRNA40或5μg毫升1CL075 DOTAP。数据代表的平均折感应NF-κB活动(n= 3,±SD),计算的RLU刺激细胞分裂的RLU non-stimulated细胞,和双尾学生的t以及用于评估统计学意义WT与突变huTLR8 (* *P< 0.01)。(F)人类巨噬细胞来源于两个健康的捐赠者被暗示刺激U衍生品的存在与否ssRNA40(20μg毫升1与DOTAP)。TNF-α生产由ELISA。双尾学生的t以及用于评估之间的统计学意义与香港理工大学(理大只和U衍生品* *P< 0.01;*P< 0.05)。数据显示超过三个独立实验的代表。
图2所示。
图2所示。
人类和小鼠中激活G或修改Gs TLR7 ssRNA的存在。人类(胡)和鼠标(m) TLR7反应分析NF-κB-dependent荧光素酶记者分析利用HEK293T细胞共同表达huTLR7和huUnc93B1 (A、C、E, G),或mTLR7 mUnc93B1 (B, D, F和H),细胞被刺激(A和B)各种1毫米的核苷有或没有μg 20毫升1香港理工大学;(C和D)各种μg 20毫升1ssRNA有或没有1毫米鸟苷(G);(E和F) 1毫米G, G核苷酸或鸟嘌呤有或没有μg 20毫升1香港理工大学;G (G和H) 1毫米,脱氧鸟苷(dG) 8-hydroxyguanosine (8-OHG)或8-hydroxy-2′脱氧鸟苷(8-OHdG)有或没有20μg毫升1香港理工大学,在缺乏DOTAP。数据代表的平均折感应NF-κB活动(n= 3,±SD),计算的RLU刺激细胞分裂的RLU non-stimulated细胞。数据显示超过三个独立实验的代表。
图3所示。
图3所示。
TLR7与G在ssRNA面前。G的结合亲和力、dG 8-OHG和8-OHdG猴TLR7 ectodomain (sTLR7)有或没有理大是由ITC。(A, B和D-F) ITC分析鸟嘌呤核苷类似物(G, dG, 8-OHG 8-OHdG) loxoribine和U绑定sTLR7 (A、D、E)或没有(B和F)香港理工大学。(C) ITC分析理大的G的绑定。计算Kd也会显示出来。北达科他州意味着“不确定”。
图4所示。
图4所示。
8-OHG和8-OHdG可比在激活TLR7 G和dG体外。从各种免疫细胞细胞因子的生产是由ELISA。(一)BM-pDCs WT和老鼠Tlr7 −−/老鼠与100年刺激μM G类似物有或没有聚μg U(20毫升1)。双尾学生的t以及用于评估之间的统计学意义与香港理工大学(理大只和鸟苷衍生品* *P< 0.01)。(B)人类pDCs分析了来自7个健康的捐赠者在(A)一样。(C和D) BM-cDCs (C)和BM-MCs WT或(D)Tlr7 −−/分析了老鼠(A)。数据代表一式三份样本的平均数±标准差。所有的结果除了(B)的代表超过三个独立的实验。
图5所示。
图5所示。
8-OHdG cytokine-inducing活动和血清水平在活的有机体内注入。(一)小鼠(n= 7)管理与G和修改G或没有理大。3 h后,血液被收集和血清il - 12 p40由ELISA决定。双尾学生的t以及用于评估之间的统计学意义与香港理工大学(理大只和G衍生品* *P< 0.01;*P< 0.05;NS,不重要)。(B)小鼠(n= 6)管理与dG或8-OHdG和血液收集在每个时间点。血清dG和8-OHdG测定。
图6所示。
图6所示。
巨噬细胞从Unc93b1 D34A / D34A老鼠更敏感的G类似物。老鼠从WT BM-MCs,Unc93b1 D34A / D34A老鼠和表明配体刺激。生产IL-12p40 (A、C、E, G)和il - 6 (B, D, F和H)在文化上层清液由ELISA决定。与200年(模拟)BM-MCs刺激μM G类似物没有理大(A和B),或100μM G类似物与香港理工大学(10μg毫升1)(C和D),双尾学生的t以及用于评估WT和之间的统计学意义Unc93b1 D34A / D34A(*P< 0.05;* *P< 0.01)。(情况)在香港理工大学(10μg毫升1),BM-MCs刺激与滴定8-OHG浓度(1 - 100μM) (E和F)或8-OHdGμM (1 - 100) (G和H),双尾学生的t以及用于评估每个数据的统计学意义而只在WT和香港理工大学Unc93b1 D34A / D34A(*P< 0.05;* *P< 0.01)。数据代表一式三份样本的平均数±标准差。所有结果都是代表三个独立的实验。
看到这张图片在PMC和版权信息

类似的文章

看到所有类似的文章

引用的

  • 重新评估Piezo1作为肠道RNA传感器。
    Nickolls AR, O ' brien GS Shnayder年代,张Y,内格尔M, Patapoutian, Chesler。 Nickolls AR, et al。 Elife。2022年11月16日,11:e83346。doi: 10.7554 / eLife.83346。 Elife》2022。 PMID:36382883 免费的PMC的文章。
  • 确定一个最优TLR8配体通过交替位置2的-O-Ribose甲基化。
    尼科莱米,斯坦伯格J,伯曼先生霍奇金淋巴瘤,索利斯阵线,巴托克E,鲍尔年代,荣格。 尼科莱米,等。 Int J摩尔Sci。2022年9月22日,23日(19):11139。doi: 10.3390 / ijms231911139。 Int J摩尔Sci 2022。 PMID:36232437 免费的PMC的文章。
  • toll样受体(通常)受体激动剂和拮抗剂COVID-19治疗。
    刘ZM评选,杨MH,于K,丽安ZX邓SL。 ZM评选,等。 杂志。2022年9月7日,13:989664。doi: 10.3389 / fphar.2022.989664。eCollection 2022。 前药物杂志》2022。 PMID:36188605 免费的PMC的文章。 审查。
  • toll样受体核酸传感的Endosomal隔间。
    佐藤宅一生K,柴田T,福井R, R, Saitoh SI,村上Y。 宅一生K, et al。 Immunol前面。2022年6月23日,13:941931。doi: 10.3389 / fimmu.2022.941931。eCollection 2022。 前面Immunol》2022。 PMID:35812450 免费的PMC的文章。 审查。
  • TLR7功能基因变异导致人类红斑狼疮。
    布朗GJ,单丝绢丝PF,王H, Medhavy,骨头J, Roco是的,他Y,秦Y, Cappello J, Ellyard霁,巴K,沈Q, Burgio G,张Y,特恩布尔C,孟X,吴P,曹E, Miosge洛杉矶,安德鲁斯TD, MA, Tvorogov D,洛佩兹房颤,Babon JJ,洛佩兹CA, Gonzalez-Murillo, Garulo,帕斯卡V, T,征税Mallack EJ, Calame DG, Lotze T, Lupski JR,丁H, Ullah TR,沃尔特斯GD, Koina我,库克MC,沈N, C·德·卢卡斯裤,科里B, Gantier MP, Athanasopoulos V, Vinuesa CG。 布朗GJ, et al。 大自然。2022年5月,605 (7909):349 - 356。doi: 10.1038 / s41586 - 022 - 04642 - z。Epub 2022年4月27日。 自然》2022。 PMID:35477763 免费的PMC的文章。
看到所有“引用”的文章

发布类型

网格计算

物质