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1996 12月1日;25(4):333-40。
doi: 10.1002 / (SICI) 1097 - 0320 (19961201) 25:4 < 333:: AID-CYTO4 > 3.0.CO;双电子。

氯甲基- x -迷迭香是一种醛固定的电位敏感氟色素,用于检测早期细胞凋亡

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氯甲基- x -迷迭香是一种醛固定的电位敏感氟色素,用于检测早期细胞凋亡

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摘要

早期细胞凋亡总是伴随着内部线粒体跨膜电位(δ psi m)的中断。阳离子亲脂性荧光剂,如3,3'二己基沙碳菁碘化(DiOC6(3)),罗丹明123,或5,5',6,6'-四氯-1,1',3,3'-四乙基苯并咪唑碳菁碘化(JC-1),可用于测量这种凋亡δ psi m耗散。然而,这些染料受到缺陷的影响,细胞荧光分析必须在非固定的、代谢活跃的细胞上进行。在这里,我们表明氯甲基- x -迷迭香(CMXRos)是其他δ psi m敏感探针的可行替代品,并且它允许在分析前对细胞进行甲醛固定。使用这种荧光色素,我们开发了一种三色染色技术,其中两种荧光色素(异硫氰酸荧光素和藻氰菊酯荧光素)偶联抗体用于测定细胞表面抗原的表达,并使用CMXRos测量δ psi m。此外,我们开发了一种方法来同时评估δ psi m和细胞内抗原的表达。因此,线粒体外膜蛋白Bc1-2的表达可以通过CMXRos染色、固定和细胞通透性测定。CMXRos标记也可以结合Tunel技术测定凋亡DNA片段。总之,CMXRos在方法上优于其他不可固定的荧光剂用于测定δ psi m。

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