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在健康志愿者中,免疫组化证实鳞状到柱状化生是贲门扩张的机制,中心性肥胖加重了贲门扩张
  1. 默罕默德·H·德拉1
  2. 伊莱恩·V·罗伯逊1
  3. Yeong李叶12
  4. 蒂姆·哈维3.
  5. 杆K兽医3.
  6. 安琪拉一个Wirz1
  7. 克莱尔橙色3.
  8. 斯图尔特一巴兰坦4
  9. 斯科特·L Hanvey4
  10. 詹姆斯J将3.
  11. 肯尼斯·厄尔驶去1
  1. 1格拉斯哥大学心血管和医学科学研究所格拉斯哥、英国
  2. 2圣马拉大学医学院ysia,Kubang Kerian, Kalantan、马来西亚
  3. 3.格拉斯哥大学癌症科学研究所格拉斯哥、英国
  4. 4国民保健服务大格拉斯哥和克莱德加特纳维尔总医院格拉斯哥、英国
  1. 对应到Kenneth E L McColl教授,心血管和医学科学研究所,英国格拉斯哥教堂街44号,G11 6NT;Kenneth.McColl在{}glasgow.ac.uk

摘要

简介最近,我们发现健康志愿者的心脏黏膜长度与年龄和肥胖有关。我们现在检查了扩张的贲门的免疫组织学特征,以确定它是否可能是由于食管远端柱状化生所致。

方法我们对52例患者进行了鳞状柱状连接(SCJ)、胃窦和全身活检幽门螺杆菌-阴性的健康志愿者,他们参加了我们早期的生理研究,没有裂口疝、经括约肌酸反流、巴雷特食管或贲门肠化生(IM)。分别在SCJ、胃窦和机体的鳞、心、氧心黏膜上测定炎症细胞密度和反应性异型性。对载玻片进行尾端型同源蛋白盒2 (CDX-2)、绒毛、三叶因子家族3 (TFF-3)和肝肠(LI)钙粘蛋白、粘蛋白MUC1、muc2和muc5 ac染色。此外,对15例伴有/不伴有IM的Barrett患者的活检进行染色和评分作为比较。免疫组织学特征与肥胖参数和高分辨率pH测量记录相关。

结果心脏黏膜的炎症浸润强度与非im型巴雷特相似,且高于任何其他上消化道粘膜。心脏黏膜免疫染色模式与非im Barrett最接近,仅CDX-2免疫染色略弱。食管远端鳞状上皮柱状分化标志物TFF-3和LI-cadherin表达明显,与中央性肥胖相关(相关系数(CC)分别为0.604,p=0.001和0.462,p=0.002)。此外,TFF-3在食管下括约肌区域内的表达与胃酸的近端延伸相关(CC=−0.538,p=0.001)。

结论这些结果与健康志愿者的贲门扩张一致,贲门扩张是由食管远端鳞状柱状化生引起的,并由中央性肥胖加重。贲门扩张的化生起源可能与贲门腺癌不可归因的比例相当大有关幽门螺旋杆菌或者经括约肌反酸

  • 食管反流
  • 食管疾病

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本研究的意义

关于这个问题,我们已经知道了什么?

  • 胃食管交界处心脏粘膜的长度随着年龄和中枢性肥胖而增加。然而,这一机制及其与无反流疾病的受试者该部位腺癌发病率增加的相关性尚不清楚。

新的发现是什么?

  • 在没有GORD证据的健康志愿者中,我们发现心脏黏膜在免疫组织化学上非常类似于非肠化生巴雷特氏黏膜,在炎症浸润的强度和性质方面也非常相似。

  • 我们还发现大部分食管远端鳞状上皮中柱状分化标记物(三叶因子家族3和肝肠钙粘蛋白)的表达,这与食管下括约肌内的中央性肥胖和胃酸的近端延伸有关。

在可预见的未来,它会对临床实践产生怎样的影响?

  • 我们的研究结果支持贲门扩张引起的鳞状柱状上皮化生的远端食管和加重中央肥胖。

  • 贲门的这种化生起源可能与该解剖部位腺癌的高发有关。

简介

在西方,胃贲门和胃-食管交界处(GOJ)的腺癌发病率较高,与胃和食管的其他部位相似或更高。1这些交界性癌与更多近端食管腺癌具有流行病学特征,但与食管腺癌的主要病因GORD相关性较弱。2只有29%的西方交界癌患者有反流症状,而对照组有16%。3.结腺癌的病因和反流在其发展中的作用尚不清楚。

胃咽粘膜和食管鳞粘膜之间的心脏黏膜几乎总是发炎的。这两种原因都有可能导致心脏炎幽门螺杆菌感染或反酸4 - 6但也存在于大多数人的没有幽门螺旋杆菌反流的感染、症状或体征4心脏黏膜在无肠化生(IM)的情况下也可表现出肠化生幽门螺旋杆菌感染或GORD。7在接受筛检结肠镜检查的白人中,有16%的人发现了贲门IM。7

Chandrasoma8认为心脏黏膜是反流引起的最远端食管鳞状黏膜柱状化生的反应,因此是一种超短巴雷特食管。新生儿心脏黏膜长度< 1mm,但随年龄增长而延长。9然而,在没有反流证据的受试者中,心脏黏膜扩张的机制尚不清楚。

我们最近对58名健康志愿者的心脏黏膜进行了研究幽门螺旋杆菌感染,发现所有受试者都发炎了。10此外,心脏黏膜长度与年龄和中枢性肥胖呈正相关。没有受试者在下食管括约肌(LOS)上缘以上5厘米处有传统的反流迹象,但中心性肥胖与胃酸向LOS上缘靠近有关。基于这些观察,我们假设胃酸反流到远端括约肌内正常的食管鳞状黏膜上,导致中央性肥胖促进柱状化生。由于没有传统定义的经括约肌反流的证据,我们将这种现象称为腹肌内反流。

为了验证没有传统GORD的受试者的大部分心脏黏膜可能是由柱状化生建立的假设,我们比较了心脏黏膜与上消化道其他黏膜的免疫表型,即同一健康志愿者的食管鳞状黏膜、胃体和胃窦黏膜,以及与其他受试者的经典巴雷特黏膜伴和不伴IM。我们还将任何变化与肥胖指标联系起来。

我们的观察结果与贲门近端由食管鳞状黏膜柱状化生引起的贲门近端延伸一致,即使在没有传统反流证据的受试者中也是如此,且该过程因中央性肥胖而加重。

材料和方法

主题

健康的志愿者

本研究纳入的健康志愿者参加了我们早期的中心肥胖和心脏黏膜长度的研究。10排除标准为以前或目前使用质子泵抑制剂(PPI)或因胃灼热症状或GORD并发症而寻求医疗关注。参与者完成了一份关于反流症状的问卷;35名参与者在参加活动前两个月没有接受任何治疗;13人的症状少于每月一次,8人少于每周一次。只有6人每周有一次以上的症状发作。没有人服用H2拮抗剂或PPIs。作为早期研究的一部分,每个参与者都接受了食管pH值测量10没有人有胃食管反酸的异常迹象。如果发现有裂孔疝或巴雷特疝或不规则Z线的参与者也被排除在外。此外,所有参与者都没有消化性溃疡的病史,幽门螺旋杆菌感染、恶性肿瘤或系统性疾病。

巴雷特食管患者

15例长节段Barrett食管患者的内窥镜活检纳入分析,以比较GOJ、胃体和胃窦活检的免疫表型。所有Barrett的标本均有柱状化生(伴或不伴IM,但无发育不良改变),加上内镜和组织学指标的食管活检与英国胃肠病学会指南一致。11

研究设计

上消化道内窥镜及活组织检查

在早期的研究中,采用上消化道内镜记录上消化道的解剖结构,并使用大容量桡颌4钳(Boston Scientific, USA)在鳞状柱交界处(SCJ)进行活组织检查,钳口跨度为8.5 mm。垂直于SCJ的连接活检的目标是在近端包括足够的鳞状黏膜,以确定我们之前描述的位置。10在内窥镜检查过程中,使用解剖显微镜检查活检组织是否存在充分的腺状和鳞状粘膜,并在过程中反馈。在一次活检样本中进行多达三次连接活检,以优化捕获心脏黏膜全跨度的机会,从而实现精确的长度测量。我们使用了以下粘膜的定义:心脏,只有腺体中的粘膜细胞;心氧细胞,腺体内有粘液细胞和壁细胞;嗜酸型,腺体中有壁细胞,但无粘液细胞。12

处理的活组织检查

为此项目专门开发了两阶段活检定位程序。在内窥镜室,活组织切片被立即放置在塑料培养皿中,培养皿上有一块牙蜡,牙蜡具有非粘附的表面,并在管腔侧方向平坦。等渗水1mg /mL Hyoscine N丁基溴化钠(Boehringer Ingelheim GmbH)用于最小化活检组织的收缩并保持长度和形状。定位活检样本在缓冲福尔马林滤纸上运输,并嵌入琼脂中,以在组织处理和包埋过程中保持定位。切割块的边缘厚度为3 μm。

H&E和免疫组化染色

所有切片均行H&E染色,以评估炎症细胞密度。基于之前的研究,选择了一组抗体来评估GOJ的免疫组化模式,包括(i)尾端型同源蛋白盒2 (CDX-2) -一种参与肠道发育的同源蛋白盒基因13作为上皮肠分化的标志;14(ii)正常肠上皮细胞中形成刷状边缘所必需的绒毛15并在IM患者的心脏和巴雷特黏膜中表达差异;16(iii)肝肠(LI)-钙粘蛋白——上消化道IM的敏感标记物;17(iv)三叶因子3家族(TFF-3) -肠分化的标记物,在Barrett合并IM中强烈表达18GOJ低表达;19(v)粘蛋白MUC1(一种相对普遍存在的膜相关粘蛋白载脂蛋白和MUC2)和muc5ac -作为与肠黏膜(MUC2)和正常胃黏膜(muc5ac)相关的粘蛋白细胞分化的标记。为了评估细胞复制的程度,我们使用了针对Ki-67抗原的MIB-1抗体。20.21

3µm的福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)切片在56°C水浴中漂出,收集在硅烷镀膜玻片上,放在金属架上,在60°C风扇辅助烘箱中干燥1 h。然后将载玻片转移到塑料载玻片架上,用DAKO EnVIsion FLEX+ Mouse高pH值套件(DAKO K8002)中的试剂与DAKO自动染色器一起使用。脱亲和再水化之后,用DAKO高pH EnVision FLEX靶提取液(去离子水1:50)热诱导表位提取。将载玻片置于加热至85°C的提取浴中,然后100°C浸泡20 min, 70°C浸泡15 min,然后转移至磷酸盐缓冲盐水(PBS)中,室温下浸泡5 min。所有染色均在DAKO自动染色机上进行。使用DAKO EnVIsion FLEX过氧化物阻断试剂阻断内源性过氧化物酶5min。然后切片在PBS中洗涤5分钟。经滴定和优化后,将原单克隆抗体稀释于DAKO稀释液(表1).抗体孵育30分钟,然后在PBS中洗涤5分钟。阴性对照为每次试验单独稀释。采用了基于聚合物的检测系统:EnVIsion FLEX/HRP。切片孵育30分钟,然后在PBS中洗涤5分钟。

表1

用于免疫组化的抗体

使用二氨基联苯脒(DAB)(20滴浓缩液/20毫升DAB底物缓冲液)应用twice×5分钟。PBS冲洗5分钟后,在0.5%硫酸铜/0.9%生理盐水溶液中冲洗5分钟,DAB染色增强。切片用苏木精反染色,然后盖上盖。

脂肪分布的MRI评估:作为早期研究的一部分,受试者空腹使用Phillips T1.5 MRI扫描仪对腹部进行MRI扫描,以评估脂肪分布。10

高分辨率食管pH值测量

在早期的研究中,所有健康的志愿者都在空腹和餐后以仰卧位和直立位进行了pH测量。10使用定制的高分辨率pH值探针和12个锑pH值电极(Synectics Medical, England, UK),在以下点测定酸暴露:(i) LOS上边界上方5厘米的传统位置,(ii)距离pH值过渡点近1厘米的传感器,(iii)距离pH值过渡点远1厘米的传感器。

数据分析

免疫组化模式评估

在胃窦、体和GOJ(心脏、咽心黏膜和巴雷特氏)切片中,以所有粘膜上皮细胞(表面、小凹和腺)作为相关分母,用肉眼估计免疫染色阳性的腺细胞百分比。在食管鳞状上皮中,仅有TFF-3和LI-cadherin为阳性分化标志物。由于其表达完全局限于基底层和基上层,因此将这些细胞(即尚未表现出明显鳞状分化的细胞)作为相关分母。免疫染色阳性表现为明确的棕色DAB信号。在任何一个活检中,使用中等(×10, ×20)和高倍数(×40)目标评估特定表型的所有粘膜。在Ki-67病例中,有>2 mm的鳞状上皮,分别对近端和鳞状上皮进行评分。

活检的炎症评分

活检对炎症强度进行半定量评分。对于GOJ的活检,分别分析存在的每种黏膜亚型。炎症评分为0 - 3分,其中0=不炎症,1=轻度炎症,2=中度炎症,3=严重炎症。急性炎症由中性粒细胞多形核白细胞定义,慢性炎症由单个核细胞浸润定义。鳞状上皮的反应性异型性被定义为与反流性食管炎相关的特征,即基基层增厚(>15%),结缔组织乳头>50%粘膜厚度,充血和表面成熟程度降低。在腺黏膜中,如果不满足不典型增生的诊断标准,黏蛋白耗损、粘膜表面成熟程度降低和细胞增殖增加都是反应性特征。评分由两位(MD, JJG)对志愿者的临床特征进行盲法。采用kappa检验一致性,其范围在0.74 - 0.89之间(p>0.01)。在两名观察员出现分歧的情况下,他们共同审阅了第二轮的幻灯片,并就最终分数达成一致。

统计分析

基于数据分布的对称性,结果显示为平均值(+SD)或中位数(+IQR)。组间比较采用Mann-Whitney U检验或独立组间T检验。为了比较两个配对组,我们在适当的情况下使用相关样本T检验或相关样本Wilcoxon符号秩检验。对于连续变量之间的相关性,采用Spearman's rho双变量相关性,显著性取p<0.05。

结果

28名女性和26名男性在GOJ、胃窦和全身均有样本。在其中一名受试者(男性)中观察到贲门IM,该受试者被排除在进一步分析之外。女性和男性的平均年龄(SD)相近,女性为47(16)岁,男性为50(16)岁,p=0.404。体重指数(BMI)和腰围(WC)的平均(95% CI)为27 (19-36)kg/m2和93(73-115)厘米。Barrett食管比较患者(12名男性,3名女性)的平均(SD)年龄为58(14)。

GOJ发炎

急性和慢性炎症评分最高的是心脏黏膜,高于近端或远端相邻组织(所有p值均<0.001)(表2).不论有无IM,心脏黏膜的炎症反应与巴雷特(Barrett)黏膜的炎症反应相当(表2).反应性异型性(黏膜应激的一个指标)在心脏黏膜比胃远端黏膜更大,与Barrett有无IM相似(表2).在远端鳞状上皮也可见高度反应性异型性。

表2

与胃粘膜其他部位相比,鳞状柱连接活检的炎症表现

GOJ免疫组化

CDX-2

食管鳞状上皮、胃咽、胃咽心黏膜均未见CDX-2免疫染色。少量腺细胞(1%,IQR 0-3%)在心脏和窦黏膜呈阳性染色。在Barrett黏膜活检中,在有IM的腺区CDX-2表达强烈(90%,IQR 50-90%),但在无IM的腺区CDX-2表达较少(5%,IQR 1-5%, p=0.022) (表3).

表3

鳞状柱交界处活检组织中不同抗体免疫染色的程度(%)与胃体、胃窦和巴雷特氏组织比较

Villin

鳞状上皮绒毛蛋白未见免疫染色。心肌黏膜有大量表达(30%,IQR值为10-70%),氧合心肌(5%,IQR值为0-10%)和氧合心肌(1%,IQR值为0-1%)明显减少。胃窦黏膜(90%,IQR为81-90%)和伴有IM的巴雷特黏膜(90%,IQR为86-95%)均表达肠绒毛蛋白,甚至高于贲门(p均<0.001)。巴雷特黏膜非im组的绒毛蛋白表达较低,为25% (IQR为10-40%),与心脏黏膜相似(p=0.425)。

TFF-3

在食管鳞状上皮中,平均4% (SD 6%)的基底层细胞明显阳性TFF-3 (图1).显著低于其在心脏黏膜中的表达(54%,SD 37%, p<0.001)。TFF-3在咽氧性心脏组织中的表达下降到26% (SD 20%, p<0.001),在咽氧性粘膜组织中的表达下降到12% (SD 19%, p=0.003)。同样在窦黏膜中,表达TFF-3的细胞比例很高(47%,SD 25%),与贲门相似(p=0.489)。Barrett黏膜中,IM组织中TFF-3表达量最高(89%,SD 3%),显著高于贲门组织(p=0.001)。非im Barrett黏膜表达TFF-3的水平与贲门相通(69%,SD 9, p=0.352)。

图1

第一排:(A)志愿者鳞状柱交界处活检的低倍镜,显示活检的长度和方向。(B)另一名志愿者鳞状和腺状黏膜炎症和反应性改变的鳞状和柱状交界处的高倍视图。中排:肝-肠-钙粘蛋白,免疫组化。(C)巴雷特黏膜伴肠化生(IM)表达强。(D)非im Barrett黏膜偶见阳性细胞。(E)志愿者贲门黏膜偶见阳性细胞。(F)志愿者鳞状黏膜基底li -cadherin阳性细胞。最下面一行:三叶因子家族(TFF)-3 OJC。(G)伴有IM的Barrett黏膜表达强。(H)伴有IM的Barrett黏膜与非IM的Barrett黏膜之间的界面。 (I) Cardiac mucosa in a volunteer. (J) Basal TFF-3 positivity in squamous epithelium next to cardia in a volunteer.

LI-cadherin

食管远端鳞状黏膜基底层和基底上层细胞有7% (SD 6%)的LI-cadherin免疫染色。图1).贲门黏膜染色更明显(14%,标准差为11%),在咽氧性贲门黏膜染色逐渐减少到10%(标准差为7%)(p<0.001),然后在咽氧性贲门黏膜染色减少到5%(标准差为4%)(p<0.001)。LI-cadherin在胃窦黏膜的表达为18% (SD为7%),与贲门相似(p=0.594)。在Barrett活检中,有IM的切片中LI-cadherin表达强烈(65%,SD为37%)(p<0.001)(与贲门相比,非IM切片中LI-cadherin表达较低(13%,SD为10%),与贲门相似(p=0.465)。

muc1, muc2和muc5 ac

除了MUC1的弱表达和浅表表达,中位数为1% (IQR 0-1%),其他抗体均未在SCJ的鳞状黏膜中检测到表达。MUC1在心脏黏膜5% (IQR 1-8%)的细胞中表达,在咽氧性心脏黏膜远端增加到15% (IQR 9-22%) (p=0.001),在咽氧性粘膜中增加到40% (IQR 8-65%) (p=0.028 vs贲门)。胃窦黏膜表达10% (IQR 5 ~ 50%),略高于贲门(p=0.035)。IM的Barrett黏膜无反应性,但非IM的Barrett有3% (IQR 0-5%)表达,与贲门相似(p=0.063)。

mg -2仅在伴有IM的Barrett黏膜中表达强(90%,IQR 80-90),显著高于心脏黏膜(p<0.001)。mc -5ac阳性细胞存在于50% (IQR 50-70%)的贲门,在咽氧粘膜中减少到40% (IQR 30-40%) (p<0.001),在咽氧粘膜中减少到30% (IQR 25-60%) (p<0.001)。胃窦MUC-5ac表达率为55% (IQR为40-70%),与贲门相似。mu -5ac在伴有IM的Barrett中呈高表达(90%,IQR为90-90%,p<0.001),而在非IM Barrett中的表达与贲门癌相似(60%,IQR为50-70%,p=0.927)。

心脏与其他粘膜的免疫染色

心脏黏膜免疫染色在统计学上与非im巴雷特黏膜无明显区别,涉及7种抗体中的6种。CDX-2在非im Barrett黏膜中表达的细胞数量略高(1%,0-3 vs 5%, 1-5)。心脏黏膜与所有其他上消化道上皮不同,至少在两种免疫印迹上表现出不同的特征。

增殖标记Ki-67和炎症

由于Ki-67的表达似乎在GOJ鳞状黏膜活检中有所不同,我们测量了20例>2 mm鳞状黏膜活检中Ki-67的表达变化。在SCJ活检中,Ki-67在最远端鳞状上皮表达最多(39%),在近端和远端表达减少(25%)(贲门)(20%)(趋势p <0.01) (表4).

表4

鳞状柱交界处活检组织中Ki-67免疫反应性的程度(%)与胃体、胃窦和巴雷特氏组织比较

单次活检中,近端鳞状上皮与远端鳞状上皮之间的小距离内Ki-67表达的降低与中位炎症评分(单核细胞+多形核细胞)在相同距离内的降低(4.0 (IQR 3.5-5.0) vs 2.5 (IQR 2.0-3.0), p值<0.01)平行。在20个鳞状上皮长度足够的标本中,SCJ的增殖(Ki-67指示)与炎症呈正相关(Spearman系数0.510),具有统计学意义(p=0.022)。

Ki-67在IM的Barrett黏膜中表达量最高(75%,IQR为70-80),在非IM的Barrett黏膜中表达量较低(IQR为35-45),为40% (IM的Barrett黏膜与贲门黏膜相比p<0.01,非IM的Barrett黏膜与贲门黏膜相比p<0.05)。

肥胖与腺分化标志物

在食管远端鳞状黏膜中,TFF-3和LI-cadherin的表达与肥胖相关(表5).TFF-3表达与WC(相关系数(CC)=0.54, p=0.001)、BMI (CC=0.58, p=0.001)、下腹皮下脂肪厚度(CC=0.39, p=0.020)、平均皮下脂肪(CC=0.44, p=0.005)和相似部位腹内脂肪(CC=0.48, p=0.002)均有显著相关性。在调整了年龄和性别或年龄、性别和心脏黏膜长度后,这些相关性仍然显著或变得更强(表5).

表5

肥胖与胃食管交界处、鳞状黏膜三叶因子家族3 (tff3)和肝肠钙粘蛋白表达的相关性(部分相关)

LI-cadherin的表达也与WC (CC=0.51, p=0.001)、BMI (CC=0.37, p=0.015)和下腹皮下脂肪厚度(CC=0.34, p=0.039)相关,并且在校正年龄、性别和贲门长度后,这些相关性也变得更强。

远端鳞状上皮CDX-2、绒毛蛋白和Ki-67的表达与肥胖无关。检测的心脏黏膜抗体与肥胖参数均无相关性(表6).

表6

肥胖与胃食管交界活检、心脏黏膜各种抗体表达的相关性

食管远端鳞状上皮腺分化的标记物及pH过渡点的位置

TFF-3在最远端鳞状上皮黏膜中的表达与pH过渡点的位置呈负相关,与LOS上缘或LOS压力峰值相关(表7).pH值过渡点(相对于LOS上缘)的位置,餐后直立位置(CC=−0.422,p=0.005)和餐后仰卧位(CC=−0.538,p=0.001)的相关性具有统计学意义。除直立空腹外,TFF-3与pH过渡点位置(相对于LOS压力峰值)呈显著负相关。这表明TFF-3在食管远端鳞状上皮内的表达与LOS区域内胃酸的近端延伸相关。TFF-3在贲门组织中的表达与pH过渡点的位置无相关性。

表7

胃食管交界活检、鳞状黏膜中三叶因子3 (TFF-3)和肝肠钙粘蛋白(LI)表达与pH过渡点的相关性

在LOS内的pH过渡点的位置与其他腺分化标志物之间没有相关性。上述任何一种基因的表达与LOS上缘以上5cm处的传统食道酸暴露无相关性。

讨论

对于心脏黏膜在明显正常的个体中的起源,以及其随年龄增长的扩张是否可能是食管远端鳞状上皮柱状(腺状)化生的结果,仍有争议。我们目前的研究结果支持以这种方式产生的贲门,因为它显示了与非im Barrett黏膜几乎相同的免疫表型,被认为是由胃食管酸反流诱导的食管鳞状黏膜化生引起的。我们的研究还提供了中央性肥胖加重SCJ的变化的证据,并与胃酸损伤引起的粘膜应激一致,导致柱状化生。

我们发现心脏黏膜在胃肠道上皮分化的7个免疫组织学标记中有6个与非im巴雷特黏膜显示相同的染色。唯一显示轻微差异的标记物是CDX-2,与非im Barrett相比,其贲门值中位数略低。相比之下,在IM中,Barrett的CDX-2表达远高于两者,中位数为90% (IQR 50-90)。非im型巴雷特黏膜相对于贲门的数值略高可能表明前者开始显示向im型巴雷特进展的证据。Vallbohmer22既往报道Cdx-2基因在心脏黏膜中的表达介于鳞状上皮和巴雷特黏膜之间。与心脏黏膜不同,其他胃上皮,即表型,心咽上皮,心咽上皮和胃窦上皮,都与非IM或IM Barrett的至少三种免疫染色不同。众所周知,非im型巴雷特上皮和心脏型巴雷特上皮都随着年龄的增长而发展和/或扩大,而心脏型和非im型巴雷特上皮在分化标记方面的密切相似性与它们通过类似的过程获得相一致。

在长节段Barrett食管中,黏膜是肠和非肠柱状化生区域的拼凑。23近端IM最为常见,而远端非IM更为常见。23心脏黏膜位于食管的最远端,因此该区域的柱状化生最典型地类似于非IM而非IM化生。食道的腺上皮化生被认为是对邻近管腔环境变化的一种适应。肠粘膜多发生在长段巴雷特食管近端,与该区域暴露于较少的酸性反流相一致,因此形成了更典型的小肠或大肠黏膜,那里的环境酸性比胃低得多。相比之下,Barrett粘膜患者的食管远端暴露在类似于胃的酸性环境中,因此类似于胃窦的化生可能具有适应优势。

先前的研究报道了心脏黏膜和非im Barrett黏膜之间的相似性。然而,我们目前的研究与以往的研究有两个不同之处。首先,我们的研究包括健康的志愿者,他们的胃食管酸反流已经被pH测量证实,而之前的研究涉及有典型反流症状的患者,24返流性食管炎,25巴雷特食管26或食管腺癌。27其次,我们目前的研究采用了比以往研究更全面的免疫染色组。佩雷拉使用四种免疫染色(绒毛、蔗糖异麦角蛋白CK7和CK20),只有绒毛显示出两种粘膜的相似性。25Chaves和他的同事只使用了针对粘蛋白的抗体(muc2, muc5 ac和muc6)。26用CK7、CK20和DAS-1作为Barrett的标记加上其他抗体来评估异型增生,这不是我们的兴趣所在。27Theisen28只使用阿利新蓝来评估两种粘膜中杯状细胞的存在。我们相信,我们的免疫染色全面覆盖了心脏和巴雷特粘膜的细胞和组织学改变,以及上消化道其他类型的兴趣。

心脏黏膜在炎症浸润的模式和严重程度方面也类似巴雷特黏膜。急性和慢性炎症细胞浸润在心脏黏膜、IM和非IM巴雷特黏膜中相似,且明显高于我们的任何上消化道黏膜幽门螺旋杆菌负面的健康志愿者。同样,反应性异型性(应激标志物)在心脏黏膜、IM和非IM Barrett’s黏膜中相似,且高于任何其他上GI柱状黏膜。炎症、反应性异型性和分化标记物的相似性都支持两种粘膜通过相似的机制获得。

如果贲门扩张是由于胃酸破坏了最远端食管鳞状上皮并导致化生改变而引起的,那么就应该看到SCJ处食管鳞状上皮损伤的证据,并可能看到早期化生的证据。我们发现炎症细胞浸润和上皮细胞增殖率在SCJ附近最为明显。我们还观察到TFF-3和LI-cadherin在食管远端鳞状上皮内的表达与早期柱状化生一致,或至少与腺分化的承诺不一致。TFF-3和LI-cadherin在少量基底细胞和直接基底上细胞中表达。这可能表明干细胞或早期子细胞的短暂表达,不会在后代的转运扩增细胞中维持。如果这种腺分化得以维持,而不是被关闭,它将代表着由肥胖增强的腺化生的可能途径。

这一证据与胃酸损伤和诱导食管远端黏膜柱状化生在没有传统经括约肌酸反流证据的健康志愿者中观察到的一致。我们先前认为,这可能是由于酸逆流到LOS区域的鳞状粘膜上而没有穿过括约肌引起的。102930.与此一致的是,我们发现从酸性到中性pH的腔内过渡点的接近程度与远端鳞状上皮内TFF-3和LI-cadherin的表达程度之间存在相关性。

我们以前曾报道过,在这些健康志愿者中,心脏黏膜的长度与年龄和中枢性肥胖相关。在GOJ的免疫组织学分析中,我们还观察到与中枢性肥胖的关系。在食管远端鳞状上皮中,腺柱状分化标记物(TFF-3和LI-cadherin)的表达与WC相关,并在校正年龄、性别和贲门长度后最强。这与中枢性肥胖通过机械诱导LOS区域内的酸反流促进SCJ附近的鳞状柱上皮化生一致,也可能由与中枢性肥胖相关的肱骨因素加剧。

GOJ观察到的这些免疫组织学变化进一步支持胃酸引起食管远端黏膜的损伤和柱状化生,并提供了与年龄和中心性肥胖相关的心脏黏膜近端扩张的机制。应该强调的是,这一过程发生在健康志愿者中,没有任何证据表明传统的经括约肌酸反流。表面健康的志愿者中SCJ发生的炎症和化生可能与无反流病史的受试者中出现的结缔腺癌的高比例有关。

致谢

我们要感谢所有志愿者的贡献。

参考文献

脚注

  • 贡献者MHD:组织评估,数据分析和起草手稿。EVR:进行临床调查。YYL:招募志愿者。TH和RKF:组织学技术援助。AAW:招募志愿者并协助临床调查。CO:组织学切片扫描。SAB和SLH: MRI评估。JJG:主要组织学家。KELM:创意构思,项目负责人。

  • 资金本研究得到了首席科学家办公室和大格拉斯哥和克莱德地区NHS捐赠基金的资助(CZB/4/709)。

  • 相互竞争的利益一个也没有。

  • 病人的同意获得的。

  • 伦理批准西格拉斯哥道德委员会。

  • 来源和同行评审不是委托;外部同行评议。

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