条文本
PDF
文摘
背景最近发现了G型肝炎病毒的rna序列C (HGBV-C),也叫G型肝炎病毒(HGV),已发现特发性暴发性肝衰竭患者(FHF),但这个代理的作用在疾病仍然是有争议的。
的目标是——调查的存在和影响HGV感染一系列大型的西班牙FHF患者。
病人六十八FHF患者,其中包括19个特发性疾病,进行了研究。在28例,研究肝移植之前和之后进行。比较200志愿献血者和22名患者移植对慢性肝病也进行了研究。
方法-HGV RNA被逆转录酶聚合酶链反应测量血清中5′非编码区域。
结果HGV感染的证据被发现在献血者的3%(6/200)和19%(13/68)的患者FHF。HGV感染更频繁的乙型肝炎患者(24%,6/25)或D型肝炎(42%,5/12),比特发性疾病患者(11%,2/19)。一半的HGV感染患者使用非法静脉注射药物。特定的临床特征与HGV感染并不确定。非常高的速度HGV感染在接受肝移植的病人,观察对FHF(60%, 15/24)或慢性肝病(45%,9/20)。
结论——我们的地理区域,在FHF HGV感染相对频繁,但它似乎并没有在特发性情况下扮演着重要角色。
- 病毒性肝炎
- G型肝炎病毒
- 暴发性肝衰竭
- 肝移植
来自Altmetric.com的统计
暴发性肝衰竭(FHF)是一个戏剧性的条件造成严重损害之前正常肝的功能。1大规模或submassive破坏肝细胞由于感染肝炎病毒a到E是公认最频繁的FHF原因在全世界范围内,但是无法确定病因学在大约三分之一的病人。2代理或代理的性质导致特发性暴发性肝衰竭仍然难以捉摸,几项研究已经产生了相互矛盾的结果。3 - 7
最近,一个新的传播代理,GB型肝炎病毒C (HGBV-C)已被确定。8这种病毒属黄家庭和呈现显著的序列相似性与另一个代理,G型肝炎病毒(HGV),确定在一个独立的实验室。9HGBV-C和HGV是相同的不同分离株病毒。10
这个代理的作用在人类肝脏疾病是目前正在接受调查。初步数据表明,HGV感染/ HGBV-C可以检测到在一个相对高比例的看似健康的志愿献血者,等人暴露于非肠道病毒传播接受输血、血液透析患者,静脉药物滥用和制度化的病人,在急性和慢性肝病患者。8,9,11到18门然而,有关的信息患病率和HGV感染的致病作用在这些情况下仍相当有限。19
最近HGBV-C RNA序列的存在证明血清中特发性重型肝炎患者的50%,20.,21表明这种病毒可能在这种疾病的病因学中的作用。然而,这些结果并不完全证实了别人。18,22-31
几个的病因学调查FHF演示了不同地理区域之间差异显著。32-36因此我们研究HGV感染的可能作用在一系列相对较大的西班牙FHF患者的病因学和代表性的特发性疾病患者。
患者和方法
病人
1987年1月至1995年12月,108例暴发性肝衰竭(FHF),根据标准的特雷和戴维森,1获准进入肝脏的重症监护室医院诊所,巴塞罗那。六十四名患者(60%)承认直接和44个病人(40%)从其他专业保健中心在西班牙。保存完好的血清样本在录取中可用这些患者68例(65%),形成本研究的基础。最近接触到肝毒素的药物和hepatotropic传播病毒的风险因素,包括最近的血液或血液制品管理,记录在每一个案例。疾病的病因学是定义的标准临床、血清学、生化、组织病理学研究。2疾病的临床表现hyperacute、急性或亚急性O’grady的定义的标准等。37患者接受标准支持性疗法2和一个原位肝移植手术28例,根据标准报告。3822个随机选择的慢性肝病患者接受了肝脏移植手术同期时间和连续200,第一个捐款,志愿献血者也研究,进行对比。
血清学研究
电流的存在感染甲型肝炎病毒(HAV),乙型肝炎病毒(HBV), D型肝炎病毒(HDV为),或丙型肝炎病毒(HCV)评估与商业化酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(HAVAB-M环评,Auszyme II, Corzyme M, Anti-delta环评,雅培公司,芝加哥,伊利诺斯州,美国),对于一个IgM抗肝炎,乙型肝炎表面抗原,抗肝炎B核心IgM抗体,抗肝炎和总D,分别和C抗肝炎病毒抗体(第二代和第三代Anti-HCV ELISA试验、邻位的诊断系统,美国力登,新泽西,美国)。血清中HCV RNA研究的嵌套式聚合酶链反应(PCR)测定,使用引物的5′非编码区(5′NCR)的丙肝病毒基因组,如前所述。39
G型肝炎病毒RNA (HGV RNA)血清中由一个商用试验装备(勃林格曼海姆曼-海姆,德国)的PCR扩增的HGV基因组5′NCR如前所述。15简单地说,从140年μl核酸提取血清使用QUIAMP-HCV提取列(试剂盒、希尔登,德国)。筛选了与RNA转录成cDNA Moloney小鼠白血病病毒retrotranscriptase随机引物和一种核糖核酸酶抑制剂的存在。PCR进行35周期(94ºC,一分钟;55ºC,一分钟;72ºC,一分钟)和五分钟在72ºC最终扩展使用10μl cDNA,核苷酸混合物200μM dATP dGTP, dCTP, 190μM dUTP 10μM digoxigenin-11-dUTP, 50 pmol引物NCR1 (5′-CGGCCAAAAGGTGGTGGATG-3′)和NCR2 (5′-CGACGAGCCTGACGTCGGG-3′),包括一个184个基点5′NCR的片段,和1.25 U Taq DNA聚合酶在最后一卷50μl。Digoxigenin标记PCR杂交检测的产品为一个小时37ºC (DIG-ELISA检测装备,勃林格曼海姆,曼海姆,德国)的捕获探针(5′-biotin-CGTAGCCACTATAGGTGGG-3′)固定在链霉亲和素涂microtitre盘子。杂交后,井被孵化digoxigenin过氧化物酶和清洗。吸光度是阅读405海里(参考滤波器在492海里)。两个负面和一个积极控制血清包含在PCR反应和3个空格包含在每个杂交反应。所有样本测试至少两次在不同的轮。 Samples were considered positive when the measured absorbance was greater than four times the mean absorbance obtained in negative controls, in which the signal ranged between 0.084 and 0.113. Results were accepted on agreement between at least two separate determinations.
NS3地区HGBV-C基因组分析的所有的样品反应5′NCR HGV RNA序列和15个无电抗从FHF患者随机选择的样本。由Yoshiba rt - pcr进行描述等20.有一些修改,12使用引物推导Simons HGBV-C核苷酸序列的描述等。8
统计分析
比例差异与χ组进行分析2测试和确切概率法。与学生的定量变量进行分析t测试或Mann-Whitney测试在适当的时候。
结果
表1显示了FHF患者的主要特色。Anti-HAV IgM类的抗体被发现在三种情况下,乙肝表面抗原在25日和anti-HBc IgM类HBsAg anti-HDV抗体在12,anti-HCV和丙肝病毒RNA在两个。这些发现表明hepatotropic病毒感染的原因是FHF 42例(62%)。最近历史记录潜在的肝毒素的药物摄入五个病人(antituberculous药物治疗在三,酮康唑,和氟烷)。大规模参与先前未被发现的肝淋巴瘤被发现在一个案例中,威尔逊的疾病被发现在另一个的证据。不存在可能的病原学的因素在剩余的19例(28%)。
一个积极的信号HGV基因组5′NCR的患者血清中检测到从13/68 FHF在6/200(19%)和献血者(3%)测试(确切概率法,p < 0.001)。NS3地区HGBV-C基因组序列的13个阳性血清样本被检测出的5′NCR HGV但没有15为HGV RNA阴性样品。
患者血清中HGV RNA的存在FHF前任政府似乎不相关的冷冻血浆凝血障碍支持性疗法。这种疗法是前两天内收集的血清HGV RNA检测17例。HGV RNA被发现在3/17治疗患者(21%)和10/41(24%)未接受支持治疗。
HGV RNA的检测频率患者静脉使用非法药物的历史(6/18,33%)比没有危险因素患者(4/39,10%)(确切概率法,p = 0.04)(表1)。
血清中存在HGV RNA序列在乙型肝炎病毒感染患者更频繁,有(5/12,42%)或没有(6/25,32%)丁肝病毒感染的证据,比特发性疾病患者(2/19,11%)。然而,这种差异没有达到统计学意义(确切概率法,p = 0.058)。HGV RNA没有发现患者的甲型肝炎病毒或丙肝病毒感染或病毒感染(表以外的那些各种各样的条件1)。
无论是hyperacute临床表现的疾病,急性或亚急性,似乎也没有疾病的最终结果与血清中存在HGV RNA序列(表1)。患者的比例HGV RNA在那些与传统措施恢复(4/9,44%)略大于患者去世(5/21,24%)或接受肝移植(4/38,9%)。这些差异没有达到统计学意义。
肝移植是在38 FHF患者。6个手术后不久死亡和四个没有跟随在我们的机构。血清样本获得的6个月后移植用于其余28例。HGV RNA在移植前样品检测四个病人。
22个随机选择的慢性肝病患者移植(16个男性,六个女性;平均年龄50年,范围36-59)也进行了研究。移植的迹象是在21例肝硬化(丙型肝炎病毒感染有关的13日,酒精在五个类型,在一个原发性胆汁性肝硬化,和不明原因引起的两个),和先进的原发性硬化性胆管炎。HGV RNA在移植前血清样本检测到两个病人。移植后,HGV RNA检测FHF 19例(68%)患者和11例(50%)与慢性肝病。没有患者移植后清除HGV RNA。HGV RNA因此出现在15/24(60%)的患者移植后移植对FHF和肝移植的9/20(45%)的慢性肝脏疾病。
捐赠者的血液,血小板,或其他血液成分参与了移植过程对FHF大行肝移植的病人(61(50))比肝移植的病人慢性肝病(36(24)),但是差异没有统计学意义。
讨论
尽管密集调查,疾病仍然是模糊的原因相当比例的FHF患者。隐藏的病毒感染,而不是识别与普通血清学技术,可能在某些情况下的特发性FHF负责。3,4先前未被发现的病毒,感染丙肝病毒等33,34或戊肝病毒在发展中国家37可能是其他公司参与。然而,尽管使用复杂的分子生物学技术在肝脏或血清识别病毒核酸,FHF不能可靠地确定病因学的许多病人。特发性FHF因此通常称为许可,non-E重型肝炎。
HGBV-C或HGV最近发现传染性剂会导致肝炎在人。8,9HGBV-C基因组序列已经从患者血清中检测到许可,重型肝炎non-E,这一发现表明,HGBV-C可能参与该病的发病机制。20.,21然而,其他组不赞同这一观点。22,31日
在当前的研究中HGV RNA序列中发现19%的西班牙FHF患者。这个发现的特异性是支持的高度整合的结果由病毒RNA逆转录酶聚合酶链反应扩增使用引物的5′NCR HGBV-C HGV和NS3的地区。
与其他研究相比,20.,21大量FHF HGV RNA阴性病例中发现本研究可能与血清样本保存的RNA不足或低灵敏度的逆转录酶聚合酶链反应试验。然而,这是不太可能,因为频率HGV感染的慢性肝病患者观察到,在献血者,在先前的研究中观察到的范围8,9,11到18门甚至更高。此外,低HGV感染的患病率也被报道。30.
重型病毒性肝炎患者典型的低水平的病毒血症,可能逃避检测35,40除非非常敏感的技术用于检测。理论上,隐藏的病毒感染可能会变得很明显,如果病人移植和免疫抑制药物和治疗,已报道慢性肝病肝移植的病人。41在目前的研究中,HGV感染变得明显在移植后与FHF多达60%的病人。隐藏HGV感染可能因此出现在许多比表示,移植前患者的研究。这是不太可能,然而,随着HGV感染成为类似的比例明显的慢性肝病患者移植。移植后HGV感染的高速率在这项研究可以解释观察到的大量的献血者参与了移植过程中,在他估计HGV感染患病率高达3%。
另一方面,有可能是检测HGV RNA逆转录酶聚合酶链反应的患者FHF目前可能不是由于感染这个代理只是反映被动传播HGV材料出现在新鲜冷冻血浆或其他血液制品管理作为凝血障碍的治疗。在这项研究中,然而,HGV RNA序列与类似的频率检测处理和未经处理的病人。
11的13个FHF患者HGV RNA检测血清中提出的证据与乙肝病毒和丁肝病毒感染乙型肝炎病毒或。大多数的这些患者静脉药物滥用或最近与吸毒者的性接触史(数据没有显示)。HGV RNA中检测出大约三分之一的FHF乙肝病毒,患者同意最近的观察表明,大多数患者FHF HGV感染也感染了乙肝病毒。18,21,31日相比之下,HGV RNA检测特发性疾病患者以更低的频率,不存在甲型肝炎患者或丙型肝炎,或在这些各种各样的条件。
它最近承认多个病毒感染,包括众所周知的,容易识别乙肝病毒等病毒,丁肝病毒和丙肝病毒,可以发现在许多重型肝炎患者。35我们的数据表明,HGV感染的作用作为一个代数余子式重型肝炎患者感染乙型肝炎病毒或丁肝病毒不能被忽视。HGV感染,然而,似乎没有特发性重型肝炎的主要原因在我们的地理区域。
确认
部分支持94/0848的FIS Ministerio de Sanidad和SFA-97/0103 Ministerio DGICYT的y de Educacion Ciencia。E Olmedo F Forns F X Lopez-Labrador M Guilera,年代Ampurdanes支持Fundacio Privada诊所。