条文本
PDF
文摘
背景——肝脏胆固醇在人体的新陈代谢的关键器官。这是唯一的器官,大量的胆固醇从体内排出,直接作为自由胆固醇在胆汁胆汁酸或转换后。胆固醇合成的主要部分在体内发生在肝脏。胆固醇也是被血浆脂蛋白的肝脏。的相对贡献新合成胆固醇和胆汁酸合成和胆汁胆固醇的血浆脂蛋白胆固醇分泌,分别是未知的。
的目标是——确定如何快速降低血浆低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)胆固醇的胆汁分泌率影响胆固醇和胆汁酸胆结石患者并完成胆道引流。在这个模型中,一个完全中断肝肠循环,胆汁酸的分泌等于新合成的胆汁酸在肝。
病人八个胆总管结石患者的胆固醇类型进行常规胆囊切除术和胆总管石切除术。
方法——操作一个气球occludable弗利导管连接到一个T管插入到胆管与气球放置T管的远端肢体。允许T管排泄胆汁外部。手术后一周弗利导管气球充气,创建完整的胆道引流。通货膨胀后12小时血浆低密度脂蛋白apheresis进行了两个小时。胆汁收集15分钟时间开始前一个小时apheresis和结束两小时后终止。在收集胆汁,血浆脂质分析了几次。
结果——血浆低密度脂蛋白胆固醇水平下降了26%(平均(SEM)) 2.19(0.29)到1.63(0.17)在低密度脂蛋白apheresis更易/ l,而高密度脂蛋白(HDL)胆固醇在等离子体不受影响。在低密度脂蛋白apheresis载脂蛋白B含有脂蛋白绑定到列,不仅导致明显降低血浆胆固醇低密度脂蛋白VLDL的也。胆汁酸的分泌速率显著降低了31%,从131年(38)到90(16)μmol / 15分钟(p = 0.045)。磷脂的产量也下降了19%。胆固醇的胆汁分泌率是没有,不过,血浆低密度脂蛋白apheresis的影响。
结论——结果显示,患者的胆固醇胆结石和完整的胆汁排泄,降低血浆低密度脂蛋白VLDL和胆固醇减少胆汁分泌rate-synthesis-of胆汁酸在不影响胆固醇的胆汁分泌率。
- 胆汁酸
- 胆汁脂质
- 胆固醇
- 脂蛋白
- 等离子体apheresis
来自Altmetric.com的统计
肝脏是一个关键的器官在胆固醇在人体内的新陈代谢。这是唯一的器官,大量的胆固醇从体内排出,直接作为自由胆固醇在胆汁胆汁酸或转换后。1与其他物种相比,人类肝脏的能力相对较低胆固醇转化为胆汁胆固醇7α-hydroxylase acids-the率确定酶2,因此人类胆汁通常包含数量相对较高的胆固醇。3,4从血浆乳糜微粒残余肝脏有效清除胆固醇,富含膳食和肠内胆固醇,而且它也占据了主要部分的血浆低密度脂蛋白(LDL)胆固醇。1的吸收和分解代谢的低密度脂蛋白是高度依赖于特定的低密度脂蛋白受体的表达和活性。5 - 7肝细胞,就像所有其他细胞在体内,也能够从甲羟戊酸内源性胆固醇的合成,速率限制酶在这里被3-hydroxy-3-methylglutaryl辅酶A还原酶(HMG - CoA)。1
负责所有这些过程的监管机制是未知的。也没有被最终确立了胆汁酸和胆汁胆固醇在多大程度上源自新合成胆固醇在肝脏,从血浆脂蛋白胆固醇吸收,或从存储胆甾醇酯。当前的知识是基于调查体内稳态条件下执行。因此,我们想研究胆固醇和胆汁酸的胆汁分泌率,和胆汁脂质成分,可能受到急性降低血浆脂蛋白水平的影响。
本研究在胆固醇胆石患者完整的胆道引流,治疗与载脂蛋白B的选择性apheresis包含低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白(VLDL)(低密度脂蛋白apheresis),导致这些脂蛋白的降低。结果表明,降低血浆载脂蛋白B含有脂蛋白减少胆汁酸的分泌率和磷脂,但令人惊讶的是,没有显著影响胆固醇的胆汁分泌率。
患者和方法
8例患者(两个男人和六个女人)自愿参加这项研究(表1)。他们都是健康的,除了他们的胆固醇胆石病;没有糖尿病的证据,表明,食用或影响肠道疾病,甲状腺、肾脏功能。没有一个是对酒精或毒品上瘾。所有患者接受选择性常规胆囊切除术与开放的探索胆总管。所有患者胆总管结石在胆囊和石头。noperation之前,患者正常或者异常5例,略血清转氨酶和碱性磷酸酶水平(表1)。Peroperative choledochoscopy以标准化的方式进行,目的是确保所有的石头已经从胆总管中删除。在T管,一个气球occludable弗利导管(没有。8)与气球远端插入胆总管T管。8
T管被允许消耗外部直到LDL apheresis进行,手术后6 - 8天。胆道引流刺激肝脏增加胆汁酸的合成最大。气球膨胀在前一天晚上血浆低密度脂蛋白apheresis创建一个完整的胆汁瘘发生。四个病人经历了轻微的腹部不适当气球膨胀,但此后耐受性良好。患者禁食所有一夜之间消除膳食脂肪的影响。确认胆汁瘘的完整性和排除保留石头,进行术后胆管造影照片上午开始前低密度脂蛋白apheresis。血浆低密度脂蛋白胆固醇水平测定在气球充气,然后就在低密度脂蛋白apheresis开始;没有发现差异水平。在所有情况下,低密度脂蛋白apheresis至少10小时后开始禁食。胆汁的T管收集管毕业15分钟的时间在低密度脂蛋白apheresis前一小时开始,进行了两个小时,直到两个小时后apheresis的终止。 Blood was sampled for analysis of lipoproteins immediately before, during, and after the apheresis.
从所有患者知情同意了。伦理方面的研究得到卡罗林斯卡医学院伦理委员会的批准。
血浆低密度脂蛋白APHERESIS
apheresis治疗进行输血的单位。图1显示了低密度脂蛋白连续apheresis系统的轮廓。apheresis都使用一个MA-0-1-system (Kanegafuchi化学工业有限公司、日本大阪)。血浆分离器由聚砜中空纤维(Sulflux Kanegafuchi)平均孔隙直径0.2μm和0.5米的有效表面积2在140毫升。两个列包含150毫升的纤维素珠子共价绑定到硫酸葡聚糖(Liposorber Kanegafuchi)用于特定吸附载脂蛋白B含有脂蛋白。9注射后的丸剂量的肝素(Kabi玻璃,斯德哥尔摩,瑞典;1000国际单位),血液从一个肘前的静脉,不断与肝素混合,100 IU / h,并通过sulflux血浆分离过滤器。等离子体是通过Liposorber的第一列,然后与血液细胞重组过滤和被聘请的病人通过另一个肘前的静脉。
:低密度脂蛋白apheresis示意图设置系统。
系统中的死腔的体积大约是400毫升,这是影射约有900毫升的铃声醋酸溶液包含5 IU肝素治疗前每毫升。血流量调整至70 - 100毫升/分钟,和等离子体流率在治疗后30至35毫升/分钟吸收500毫升血浆第一Liposorber列。第二列是用于治疗另一个600毫升的等离子体。与此同时,第一列被冲洗再生0.7 mol / l氯化钠和重载与醋酸铃声。这个过程被重复每600毫升的等离子体的帮助下一个计算机程序包括在MA-01装置。等离子体卷治疗1008 - 2500毫升(平均1707毫升)。没有并发症观察apheresis会话期间,持续了两个小时。
血浆脂蛋白的分析
血液样本立即在3000转离心20分钟在4°C。等离子体分数的一部分在每个样品受到超速离心法贝克曼l5 - 65超离心机配备40.3 Ti转子在d = 1.006克/毫升30小时39 000 rpm为了分析不同脂蛋白分数(高密度脂蛋白(HDL)、VLDL和LDL)。10血浆中胆固醇和甘油三酯含量以及在上层清液和infranatant分数进行分析使用标准酶方法(Boehringer-Mannheim,德国)。的高密度脂蛋白胆固醇水平infranatant分数后分析了降水与磷钨酸含有微粒的载脂蛋白B。11
分析胆脂质
胆汁胆汁酸的浓度和输出,胆固醇和磷脂测量在所有患者。测定胆固醇和磷脂,部分提取胆汁样品经T管的20卷chloroform-methanol(2:1,卷/期)。胆固醇是由一个酶的方法12激励者和磷脂的方法等。13总胆汁酸的浓度的一个整除胆汁样品确定使用3α-hydroxysteroid脱氢酶测定。14脂质成分的胆汁被表示为摩尔比例的胆固醇、胆汁酸、磷脂。胆汁胆固醇饱和百分比的计算根据凯里。15
测量胆汁胆汁酸成分
在三个患者胆汁胆汁酸成分决定。胆汁样品水解1 mol / l KOH在封闭钢管在110°C 12小时。的deconjugated胆汁酸与乙醚提取与盐酸酸化pH值1后,甲基化,三甲基甲烷硅基化的,分析了气液色谱使用1% Hi-Eff BP8列。16
统计分析
胆汁,胆汁脂质,和血浆脂质(SEM)。血浆脂蛋白的统计学意义的差异与学生的评估t测试。胆汁脂质进行评估用重复测量方差分析的一个因素。内不同水平的因素进行评估的因果至少显著差异测试。一些变量的分布是倾斜的。对数据进行对数转换为了满足足够的方差分析的要求。胆汁脂类的平均值为每小时是基于各自的四个15分钟时间胆汁抽样。四个时期的平均值在等离子apheresis视为基底的水平。
结果
血浆脂质
apheresis后血浆胆固醇平均减少了27%,甘油三酯52%(表2)。降低的程度与等离子体的数量已经处理。定量分析不同的脂蛋白分数(VLDL、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白)显示,有一个在等离子apheresis大量低密度脂蛋白和VLDL的损失,而高密度脂蛋白不受影响。血浆低密度脂蛋白胆固醇水平也继续减少apheresis后的第一个小时。血浆VLDL水平胆固醇,另一方面,稳定在第二个小时的apheresis和终止后增加。
讨论
本研究的患者通过T胆道引流管插入到胆总管血浆低密度脂蛋白apheresis前一周进行。胆道引流是一夜之间完成之前由膨胀等离子apheresis胆总管远端气球。完整的肝肠循环的中断是验证了二次胆汁酸的缺席,脱氧胆酸,从胆汁以及胆管造影照片早上执行低密度脂蛋白apheresis之前就开始了。
中断胆汁酸肝肠循环的胆道引流,回肠功能障碍,或切除回肠末端刺激胆汁酸合成几倍。17,18这可以解释为一个中断的效果反馈调节胆汁酸合成的胆汁酸回到肝脏。在本研究胆汁酸输出低密度脂蛋白apheresis 131(38)μmol / 15分钟,代表每天约12更易与胆汁酸输出。在我们的病人完全中断肝肠循环,胆汁酸的输出应该等于新合成的胆汁酸在肝。日常合成的胆汁酸在人类已经确定是1更易。19,20.这意味着,由于排水,胆汁酸的合成是在我们的病人增加超过10倍。
血浆低密度脂蛋白胆固醇水平已经低的低密度脂蛋白apheresis开始之前,因为患者接受手术和有胆道引流大约一个星期。如前所述,胆汁酸的合成增加几倍,这意味着相应增加胆固醇的降解。在这种情况下肝脏可能反应在两种不同的方式:通过增加胆固醇的合成;一个增强的血浆脂蛋白胆固醇的吸收,尤其是低密度脂蛋白。1它最近已被证明,人类肝脏使用这两种机制。因此消胆胺治疗和回肠切除,导致胆汁酸吸收不良,都是与HMG - CoA还原酶活性增加有关LDL受体表达和增强的活动。6,21,22Upregulation LDL受体导致间隙的增加低密度脂蛋白的循环,因此降低血浆低密度脂蛋白胆固醇的水平。
在目前研究apheresis血浆低密度脂蛋白胆固醇水平降低了平均26%。一个有趣的发现是,血浆低密度脂蛋白胆固醇水平apheresis后继续减少。这可能是由于缺乏VLDL前体或,不太可能,进一步upregulation胆固醇低密度脂蛋白受体继续流入肝脏及其他器官。血浆apheresis进行的这项研究中,载脂蛋白B含有脂蛋白,主要是低密度脂蛋白VLDL,从等离子体隔离。随着患者禁食状态,从一开始的VLDL水平很低,进一步减少通过绑定到列。一个有趣的发现是,血浆VLDL水平胆固醇开始增加低密度脂蛋白apheresis后终止;在某些病人已经开始增加在后来apheresis的一部分。一个可能的解释可能会增加形成和分泌肝来弥补脂蛋白VLDL的删除的列。
一个重要的发现是,低密度脂蛋白apheresis导致胆汁胆汁酸减少约31%的输出。也有磷脂的分泌减少。令人惊讶的是,然而,胆固醇产出不变。在人类中,胆汁的分泌磷脂取决于胆汁酸分泌,因此通常分泌胆汁酸和磷脂相互关联。3因此降低磷脂的输出可以被认为是由于减少胆汁酸输出。
低密度脂蛋白apheresis期间减少胆汁胆汁酸的输出表明肝脏低密度脂蛋白胆固醇的吸收胆汁酸合成的重要性。正如上面提到的,然而,血浆VLDL水平胆固醇LDL apheresis期间也减少了,可能刺激VLDL粒子在肝脏的形成,提高血浆VLDL胆固醇的分泌。因此,它不能排除,减少胆汁酸output-synthesis可能是因为不仅在血浆低密度脂蛋白胆固醇降低,血浆VLDL胆固醇的下降和随之而来的VLDL分泌增加。
apheresis期间,血浆低密度脂蛋白胆固醇水平不断下降,而高密度脂蛋白胆固醇并没有改变。如上所述,胆固醇的胆汁输出不会受到apheresis,这可能表明,胆固醇的胆汁输出与肝血浆低密度脂蛋白胆固醇的吸收。只要有一个肝脏胆固醇的代谢上的人,已建议,23,24它可以假设,高密度脂蛋白胆固醇,可能被通过对接受体肝脏,25是比这更与胆固醇的胆汁分泌胆汁酸。支持这一观点,证据,高密度脂蛋白胆固醇和胆汁胆固醇在人之间的关系提出了。26
总之,本研究表明,低密度脂蛋白apheresis降低等离子体水平的低密度脂蛋白VLDL胆固醇,减少胆汁胆汁酸的输出和磷脂,但不影响患者的胆固醇的胆汁输出完整的胆道引流。这提供了间接的证据表明,胆固醇胆石患者疾病和在目前的实验条件下,低密度脂蛋白胆固醇,也可能VLDL胆固醇代谢胆固醇来说是更重要的比胆固醇的胆汁分泌胆汁酸。
确认
本研究支持由瑞典医学研究理事会(03 x - 4793),斯德哥尔摩,瑞典卡罗林斯卡研究所,瑞典斯德哥尔摩。作者感谢女士Ingela Arvidsson, Lisbet女士Benthin,女士Danuta Cosliani,纸霍尔姆先生和莉莲女士拉尔森的娴熟的技术援助和伊丽莎白Berg博士援助与统计和计算机分析。列夫伯格曼MSc制药也请支持这项研究。