你在这里gydF4y2Ba

条文本gydF4y2Ba

菜单条gydF4y2Ba
癌症gydF4y2Ba
长期广泛溃疡性结肠炎患者的分子筛查:p53和Ki-的检测gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba结肠灌洗液中单链构象多态性分析和差异杂交的突变gydF4y2Ba
免费的gydF4y2Ba
  1. S M LanggydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  2. D F stratagydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  3. M HeinzlmanngydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  4. W HeldweingydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  5. B WiebeckegydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  6. K LoeschkegydF4y2Ba一个gydF4y2Ba
  1. 一个gydF4y2Ba德国因恩施塔特市内科医院Universität München，德国Ziemssenstrasse 1, D-80336 München，德国gydF4y2BabgydF4y2Ba病理研究所Universität MünchengydF4y2Ba
  1. 朗博士。gydF4y2Ba

摘要gydF4y2Ba

背景gydF4y2Ba在有发展恶性肿瘤风险的长期溃疡性结肠炎患者中，p53和Ki-的突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba对监测结肠镜下灌洗液进行基因检测。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba从连续31例全溃疡性结肠炎或次全溃疡性结肠炎患者中分离出DNA，这些患者的病程在7至26年之间。27例对照患者结肠镜下肉眼或显微镜下均未见炎症。p53基因的5-8外显子和Ki- 1外显子gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba用聚合酶链式反应扩增基因。通过单链构象多态性分析检测p53基因突变。Ki-的点突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba基因与地高辛标记的寡核苷酸进行斑点杂交。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba在所有溃疡性结肠炎病例和所有27例对照患者中，野生型p53和野生型Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba可以被检测到。在4例溃疡性结肠炎患者中，发现p53基因5 - 7外显子突变，2例患者Ki-突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba基因(Gly to Asp-12, Gly to Val-12)。这些患者在连续活检标本中均无异常增生，除1例外，其余患者患病时间均超过10年。一名对照患者出现了突变。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba长期溃疡性结肠炎患者的突变频率(19%)高于对照组患者(3%，p = 0.07)。该技术可用于溃疡性结肠炎早期恶性肿瘤的筛查。gydF4y2Ba

  • p53gydF4y2Ba
  • K -gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba
  • 结肠灌洗gydF4y2Ba
  • 溃疡性结肠炎gydF4y2Ba
  • 分子筛选gydF4y2Ba

  • 缩写gydF4y2Ba

    聚合酶链反应gydF4y2Ba
    聚合酶链反应gydF4y2Ba
    SSCPgydF4y2Ba
    单链构象多态性gydF4y2Ba

    • http://dx.doi.org/10.1136/gut.44.6.822gydF4y2Ba

    数据来自Altmetric.comgydF4y2Ba

      请求的权限gydF4y2Ba

      如果您希望重用本文的任何或全部内容，请使用下面的链接，该链接将带您到版权清除中心的RightsLink服务。您将能够快速获得价格和即时许可，以多种不同的方式重用内容。gydF4y2Ba

      治疗长期溃疡性结肠炎患者的主要临床问题之一是确定哪些患者恶性转化的风险增加。广泛接受的经典危险因素是病程长(超过7-10年)和累及整个大肠(泛结炎)。gydF4y2Ba1 - 3gydF4y2Ba反复结肠镜检查和顺序活检被推荐作为一种监测程序。其目的是检测上皮细胞发育不良作为恶性肿瘤的早期指标，因为如果在肿瘤达到晚期之前进行手术，可以延长生存期。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba然而，不典型增生的组织学分级(从轻度到重度)有局限性，如观察间变异、混杂炎症变化，特别是活检的随机性。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba

      鉴定具有恶性转化特征的基因改变是一种有前途的新诊断方法。Sidransky报道了首次成功鉴定结直肠癌或腺瘤患者粪便中的基因突变gydF4y2Ba等gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba其他几名调查人员也跟进了。gydF4y2Ba8-16gydF4y2Ba这种方法在早期结肠炎癌中的一个主要缺点可能是肿瘤负荷小——即粪便中恶性细胞的含量——以及充当聚合酶链反应(PCR)抑制剂的杂质。另一方面，结肠流出物样品含有较少的污染物，可以预期含有从肠道各部分脱落的上皮细胞，并提供方便的DNA来源。托比gydF4y2Ba等gydF4y2Ba13gydF4y2Ba能够探测到Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba有结直肠癌病史的患者，在调查时没有明显的肿瘤，结肠冲洗的突变。我们已经证明，在常规结肠镜检查中收集的结肠镜灌洗液适用于突变p53和Ki-的分析gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba在一小部分长期溃疡性结肠炎患者中。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba

      本研究对突变型p53和Ki-进行了研究gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba并将这些发现与疾病持续时间、疾病过程中的临床严重程度和当前形态活动相关联。无结肠炎症的对照组患者也进行了类似的调查。gydF4y2Ba

      方法gydF4y2Ba

      病人的特点gydF4y2Ba

      研究了31例有全溃疡性结肠炎或次全溃疡性结肠炎病史的患者(17例女性，14例男性，平均(SD)年龄39(10)岁)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．根据疾病持续时间(7-9年、10-15年和15年以上)、疾病“严重程度”和结肠镜检查时的形态活动对患者进行分组。作为疾病严重程度的衡量，评估了疾病过程中使用的药物治疗。仅使用水杨酸盐治疗时，病情分为轻度(3例)，使用皮质类固醇治疗时为中度(13例)，使用免疫抑制剂(通常为硫唑嘌呤和皮质类固醇)时为重度(15例)。目前的疾病活动性由内窥镜医师和病理学家使用常规标准进行半定量评估。宏观疾病的结肠镜分类评估为:轻度炎症伴血管模式丧失无明显活动，中度活动(定义为严重炎症伴接触性出血)，重度活动(定义为更严重的疾病伴脆性、溃疡或自发性出血)。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba病理分级从轻度活动(定义为轻度水肿和炎症)到中度活动(定义为隐窝脓肿形成)到严重活动伴活动性溃疡。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba3例患者出现反洗性回肠炎，无一例为原发性硬化性胆管炎。gydF4y2Ba

      查看该表:gydF4y2Ba
      表1gydF4y2Ba

      对照和溃疡性结肠炎患者的临床特征gydF4y2Ba

      27例对照患者(15名女性，12名男性，平均年龄53(15)岁)结肠镜检查时未见肉眼或显微镜下炎症(14例无病理发现，其中3例为肠易激综合征，7例为痔疮，6例为憩室病)。gydF4y2Ba

      所有患者和对照组均知情同意参与该研究，并得到当地伦理委员会的批准。gydF4y2Ba

      样品处理gydF4y2Ba

      结肠镜检查前的准备工作包括24小时低纤维饮食，结肠镜检查前一天服用泻药，结肠镜检查当天服用灌洗液，直到直肠分泌物清晰为止。所有留在结肠内的灌洗液(约300-500毫升)在内窥镜下收集在一次性使用或蒸压容器中。每10厘米常规取2个活检标本，送病理学家进行组织学评估。另外随机抽取了两个样本进行DNA分析。gydF4y2Ba

      灌洗液在2700离心gydF4y2BaggydF4y2Ba；去除无细胞上清液，固体物质在磷酸盐缓冲盐水中重悬。重复三次，直至上清清清。然后将沉积物储存在−20°C。gydF4y2Ba

      DNA分析gydF4y2Ba

      用于DNA提取的DNA分离试剂盒(DNA分离试剂盒USB;使用Amersham, Braunschweig, Germany)，并用260 nm和280 nm光度法测定DNA收率。gydF4y2Ba

      p53基因外显子5-8和Ki-外显子1上的密码子12和13gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba使用之前发表的方法，用PCR扩增癌基因。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba对照组接受同样的程序。gydF4y2Ba

      利用扩增DNA单链构象多态性(SSCP)分析p53基因突变。在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后，用0.1%的银染色观察DNA条带，并与已知的标准DNA (123 bp DNA阶梯;Gibco BRL，贝塞斯达，马里兰州，美国)(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．从健康志愿者的外周血白细胞中提取野生型DNA作为阴性对照。作为阳性对照，从培养的17p染色体外显子5和8已知突变的上皮细胞株HaCaT中提取DNA。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,gydF4y2Ba19gydF4y2Ba

      Single strand conformation polymorphism analysis of amplified DNA from three cases. In cases 1 and 2, only wild type p53 is present. In case 3, there is an additional band (arrow), indicating a mutation in the p53 gene.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图1gydF4y2Ba
      图1gydF4y2Ba

      3例扩增DNA单链构象多态性分析。在病例1和2中，只有野生型p53存在。在情况3中，有一个额外的带(箭头)，表明p53基因突变。gydF4y2Ba

      用于Ki-的检测gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba突变时，DNA被吸到带正电荷的尼龙膜上(Boehringer, Mannheim，德国)。相同的膜同时与用地高辛标记的不同检测寡核苷酸杂交(MWG生物技术，慕尼黑，德国)。用化学发光法对叠加信号进行检测gydF4y2BaxgydF4y2Ba射线膜抗地高辛-碱性磷酸酶Fab片段。从已知密码子12突变的结直肠癌标本中提取DNA作为阳性对照。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba对含有Ki-突变的灌洗液的PCR产物进行直接测序(自动和手动)gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba或者p53基因(MWG生物技术公司)。gydF4y2Ba

      统计方法gydF4y2Ba

      结果以平均值(SD)表示。组间采用Pearson χ进行统计学比较gydF4y2Ba2gydF4y2Ba测试。p<0.05水平接受显著性。gydF4y2Ba

      结果gydF4y2Ba

      p53和Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba结肠潮红突变gydF4y2Ba

      在所有溃疡性结肠炎患者或对照组患者的样本中，我们都能检测到p53和野生型Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba基因(无花果gydF4y2Ba1gydF4y2Ba而且gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)，而所有没有DNA的对照(污染控制)都没有产生信号。p53基因的SSCP分析显示外显子5、6、7有4个突变。其中2例溃疡性结肠炎患者Ki-基因突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba癌基因，一个Gly到Asp-12，一个Gly到Val-12(图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba、表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)．均检测到Ki-突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Bap53基因经直接测序证实。除1名患者外，所有患者的疾病持续时间均超过10年(表)gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）;一名患病时间较短(8年)且p53突变的患者病情严重。3例患者有反洗性回肠炎，1例有Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba突变。其中一名对照组患者p53基因发生了突变。患者(痔疮，女性，56岁)，结肠无肉眼或显微镜异常，有胰腺癌家族史，但彻底检查未见肿瘤。在12个月的随访中，她一直保持健康。gydF4y2Ba

      Detection of wild type Ki-ras in cases 1 to 8 (left) and mutated Ki-ras in case 1 (right).
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图2gydF4y2Ba
      图2gydF4y2Ba

      在病例1至8中检测野生型Ki-ras(左)，在病例1中检测突变型Ki-ras(右)。gydF4y2Ba

      查看该表:gydF4y2Ba
      表2gydF4y2Ba

      p53和Ki-ras突变与患者特征的相关性gydF4y2Ba

      总的来说，19%的溃疡性结肠炎患者有p53或Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba而对照组的突变率为3% (p = 0.07)。gydF4y2Ba

      结肠活检样本的组织学评估gydF4y2Ba

      从送到病理学家的活检样本中，4名患者被检测出轻度发育不良。这些病人的灌洗液中都没有突变。在两个病例中，内窥镜医生描述了一个可疑的病变，但在病理评估中没有发现异常增生。灌洗液突变的患者在黏膜活检标本中均无异常增生。gydF4y2Ba

      Ki -gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba结肠活检标本中p53突变gydF4y2Ba

      在病理学家报告的所有发育不良病例中，以及在那些发现突变的病例中，从随机标本中提取DNA。Ki-的突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba尽管在灌洗液中发现突变的两份患者标本中提取了足够的DNA，并且作为内部对照的野生型均可检测到，但在任何标本中均未检测到基因。对所有四个溃疡性结肠炎样本的p53基因的SSCP分析显示，在活检样本中没有突变，尽管有足够的DNA被扩增用于SSCP分析。在分析p53和Ki-时，所有来自发育不良病例的样本均为阴性gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba突变。gydF4y2Ba

      讨论gydF4y2Ba

      在本研究中，我们使用分子筛查工具分析了31例长期溃疡性结肠炎患者的结肠冲洗，因为突变可能是早期瘤变的有用替代标记物。该方法是基于从大肠中采集的细胞学标本不仅适用于细胞学评估的观察gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba还可以用PCR扩增技术分析基因变化。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba这种方法的优势在于，可以分析从整个结肠(可能还有小肠)脱落的细胞，因为在盲肠肿瘤中检测到突变的概率与远端肿瘤相同。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba

      在我们的系列研究中，我们在4名患者(13%)和Ki-中发现了p53基因突变gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba2例(6%)发生突变。在这个小序列中，与疾病严重程度或形态活性无相关性，组间分布不均匀。gydF4y2Ba

      但是，携带突变的患者除1例外，均有10年以上的患病经历，这符合临床经验，患病时间长是这些患者发生癌的主要危险因素之一。gydF4y2Ba

      在我们的患者中，我们无法将灌洗液中发现的突变与组织病理学观察到的发育不良变化联系起来。事实上，在灌洗液中表现出突变的患者的系列活检样本中没有发现异常增生，这可能是由于活检的随机性，而不是灌洗液中更有代表性的样本。也可能是我们的方法在灌洗中无法恢复少量突变细胞。gydF4y2Ba

      原发性硬化性胆管炎gydF4y2Ba22gydF4y2Ba还有反洗性回肠炎gydF4y2Ba23gydF4y2Ba已被报道为发生结肠炎癌的额外危险因素。所有患者均无原发性硬化性胆管炎，但有3例有反洗性回肠炎。后一名患者携带Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba突变(Gly到Val-12)。gydF4y2Ba

      有趣的是，我们能够探测到野生型Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba在所有正常对照组中也发现p53，尽管细胞脱落的数量可能比炎症或肿瘤小得多。在对照组中，我们只在一个病例中发现了突变。这一发现的临床意义尚不清楚，该患者在随访一年后仍保持良好状态。在托比系列中gydF4y2Ba等gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba在一名患者的废水中发现含有突变Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba等位基因在结直肠癌诊断的4年前。gydF4y2Ba

      查阅文献显示，广泛性溃疡性结肠炎发生恶性转化的风险在7-10年后开始，25年后可能达到10%左右。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24 - 26日gydF4y2Ba在长期溃疡性结肠炎中发现的肿瘤与散发性结肠癌中发现的基本相同的遗传病变。gydF4y2Ba24 - 26日gydF4y2Ba然而，除了这里提供的数据之外，只有关于溃疡性结肠炎患者发生突变的轶事数据，但没有明显的肿瘤。在长期存在的溃疡性结肠炎中，我们不能完全满足于目前基于寻找不典型增生的癌症筛查方式。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba我们的数据表明，使用结肠灌洗液进行分子分析是可能的，并表明随着疾病持续时间的延长，p53和Ki-gydF4y2Ba拉gydF4y2Ba突变变得更加频繁。gydF4y2Ba

      因此，在更多的高危患者中评估这种诊断工具似乎是合理的。然而，当使用分子筛查工具时，需要注意的是，因为存在假阴性率。最终，只有长期随访才能显示分子标志物是否适合预测这些患者的肿瘤转化。gydF4y2Ba

      致谢gydF4y2Ba

      我们要感谢Zoller教授和他的团队对两个案例的贡献。这项工作得到了德国慕尼黑Wilhelm Vaillant基金会no . 8232111的资助。进一步的支持由Ferring GmbH, Kiel和Falk基金会，Freiburg，德国。部分工作由Diana Stratakis完成(就职论文)。gydF4y2Ba

      缩写gydF4y2Ba

      聚合酶链反应gydF4y2Ba
      聚合酶链反应gydF4y2Ba
      SSCPgydF4y2Ba
      单链构象多态性gydF4y2Ba

      参考文献gydF4y2Ba

      1. ↵gydF4y2Ba
        1. GillengydF4y2BaCDgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 沃姆斯利gydF4y2BaRSgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 之前gydF4y2BaPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1994gydF4y2Ba）gydF4y2Ba溃疡性结肠炎和克罗恩病:广泛结肠炎中结直肠癌风险的比较gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba35gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1590gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1592gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      2. ↵gydF4y2Ba
        1. Lennard-JonesgydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 梅尔维尔gydF4y2BaDMgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. MorsongydF4y2Ba公元前gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1990gydF4y2Ba）gydF4y2Ba广泛溃疡性结肠炎的癌前病变和癌症:对401名超过22年患者的调查结果。gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba31gydF4y2Ba：gydF4y2Ba800gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba806gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      3. ↵gydF4y2Ba
        1. LashnergydF4y2Ba英航gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 西尔弗斯坦gydF4y2Ba医学博士gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. HanauergydF4y2Ba某人gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1989gydF4y2Ba）gydF4y2Ba溃疡性结肠炎中发育不良和癌症的危险率。监控项目的结果。gydF4y2Ba挖掘科学gydF4y2Ba34gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1536gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1541gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      4. ↵gydF4y2Ba
        1. 崔gydF4y2Ba点gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 纽金特gydF4y2Ba弗兰克-威廉姆斯gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. SchoetzgydF4y2BaDJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1993gydF4y2Ba）gydF4y2Ba结肠镜监测可降低溃疡性结肠炎中结直肠癌的死亡率。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba105gydF4y2Ba：gydF4y2Ba418gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba424gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      5. ↵gydF4y2Ba
        1. Lennard-JonesgydF4y2Ba我gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1995gydF4y2Ba）gydF4y2Ba结肠癌:监督，监视，还是手术?gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba109gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1388gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1391gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
      6. ↵gydF4y2Ba
        1. 百仕通gydF4y2Ba莫gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 里德尔gydF4y2BaRHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 罗杰斯gydF4y2Ba黑洞gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1981gydF4y2Ba）gydF4y2Ba长期溃疡性结肠炎结肠镜检查发现异常增生相关病变或肿块(DALM):结肠切除术的指征。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba80gydF4y2Ba：gydF4y2Ba366gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba374gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      7. ↵gydF4y2Ba
        1. SidranskygydF4y2BaDgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. TokinogydF4y2BaTgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 汉密尔顿gydF4y2Ba老gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1992gydF4y2Ba）gydF4y2Ba可治愈结直肠癌患者粪便中ras癌基因突变的鉴定。gydF4y2Ba科学gydF4y2Ba256gydF4y2Ba：gydF4y2Ba102gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba105gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      8. ↵gydF4y2Ba
        1. KoornstragydF4y2BaJJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. RokkegydF4y2BaOgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. HalvorsengydF4y2Ba摩根富林明gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1995gydF4y2Ba）gydF4y2Ba粪便中活化原癌基因(Ki-ras)的测定。结直肠癌早期诊断的一项新的实验室分析。gydF4y2BaTidsskr Nor LaegeforengydF4y2Ba115gydF4y2Ba：gydF4y2Ba3266gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba3270gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
      9. ↵gydF4y2Ba
        1. 别墅gydF4y2BaEgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. DuganigydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. RebecchigydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1996gydF4y2Ba）gydF4y2Ba通过基于粪便中Ki-ras测定的测试来确定大肠癌风险受试者。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba110gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1346gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1353gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      10. ↵gydF4y2Ba
        1. NollaugydF4y2BaPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 莫泽gydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 维恩兰德gydF4y2BaGgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1996gydF4y2Ba）gydF4y2Ba富突变体PCR检测结直肠癌患者粪便中Ki-ras基因突变gydF4y2Ba肿瘤gydF4y2Ba66gydF4y2Ba：gydF4y2Ba332gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba336gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      11. ↵gydF4y2Ba
        1. Smith-RavingydF4y2BaJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 英格兰gydF4y2BaJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 托尔伯特gydF4y2Ba集成电路gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1995gydF4y2Ba）gydF4y2Ba散发性结直肠癌患者粪便中c-Ki-ras基因的检测。gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba36gydF4y2Ba：gydF4y2Ba81gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba86gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      12. ↵gydF4y2Ba
        1. 江口gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. KoharagydF4y2BaNgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. KomutagydF4y2BaKgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1996gydF4y2Ba）gydF4y2Ba可切除结直肠癌患者粪便中p53基因的突变gydF4y2Ba癌症gydF4y2Ba77gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1707gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1710gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      13. ↵gydF4y2Ba
        1. 托比gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 罗gydF4y2Ba足球俱乐部gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. RonaigydF4y2BaZgydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1994gydF4y2Ba）gydF4y2Ba无大肠癌证据的患者结肠流出液中Ki-ras突变的检测gydF4y2Ba中华泌尿外科肿瘤研究所gydF4y2Ba86gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1007gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1010gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      14. ↵gydF4y2Ba
        1. 长谷川gydF4y2BaYgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 武田gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. IchiigydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1995gydF4y2Ba）gydF4y2Ba用突变等位基因特异性扩增法(MASA)检测结直肠癌患者粪便dna中K-ras突变。gydF4y2Ba致癌基因gydF4y2Ba10gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1441gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1445gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      15. ↵gydF4y2Ba
        1. RattogydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 弗拉米尼gydF4y2BaGgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 代表作gydF4y2BalgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1996gydF4y2Ba）gydF4y2Ba粪便中脱落的肿瘤结肠细胞癌基因突变检测。gydF4y2Ba结肠直肠gydF4y2Ba39gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1238gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1244gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      16. ↵gydF4y2Ba
        1. 朗gydF4y2BaSMgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. HeinzlmanngydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. StratakisgydF4y2BaDFgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1997gydF4y2Ba）gydF4y2Ba用PCR和差分杂交检测长期溃疡性结肠炎患者内镜下灌洗液中Ki-ras突变，用SSCP分析p53突变。gydF4y2Ba是胃肠醇吗gydF4y2Ba92gydF4y2Ba：gydF4y2Ba2166gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba2170gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      17. ↵gydF4y2Ba
        1. 戈麦斯gydF4y2BaPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 杜布雷gydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 史密斯gydF4y2BaCLgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1986gydF4y2Ba）gydF4y2Ba结肠炎性肠病患者疾病活动指数与结肠镜检查结果的关系gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba27gydF4y2Ba：gydF4y2Ba92gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba95gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      18. ↵gydF4y2Ba
        1. TeschauergydF4y2BaWgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. MussackgydF4y2BaTgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 布劳恩gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1996gydF4y2Ba）gydF4y2Ba广泛适用的单链构象多态性(SSCP)分析条件:丙烯酰胺、缓冲液和甘油浓度对p53基因外显子SSCP分析的影响gydF4y2Ba临床化学临床生物化学gydF4y2Ba34gydF4y2Ba：gydF4y2Ba125gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba131gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      19. ↵gydF4y2Ba
        1. BoukampgydF4y2BaPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. PetrussevskagydF4y2BaRTgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. BreitkreuzgydF4y2BaDgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1988gydF4y2Ba）gydF4y2Ba在自发永生化的非整倍体人角化细胞细胞系中的正常角化。gydF4y2Ba细胞生物学gydF4y2Ba106gydF4y2Ba：gydF4y2Ba761gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba771gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      20. ↵gydF4y2Ba
        1. 贝德gydF4y2Ba通用汽车gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 宫颈脱落细胞gydF4y2BaGNgydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1952gydF4y2Ba）gydF4y2Ba细胞学在直肠、乙状结肠、降结肠肿瘤诊断中的应用。gydF4y2Ba癌症gydF4y2Ba2gydF4y2Ba：gydF4y2Ba307gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba314gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba
      21. ↵gydF4y2Ba
        1. 拉斯金gydF4y2Ba高频gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 帕尔默gydF4y2Ba王gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. KirsnergydF4y2Ba简森-巴顿gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1959gydF4y2Ba）gydF4y2Ba剥脱细胞学在结肠癌诊断中的应用。gydF4y2Ba结肠直肠gydF4y2Ba2gydF4y2Ba：gydF4y2Ba46gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba57gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
      22. ↵gydF4y2Ba
        1. 凯利gydF4y2BaPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 帕契特gydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 麦克洛斯基gydF4y2BaDgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1997gydF4y2Ba）gydF4y2Ba硬化性胆管炎，种族和性别。gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba41gydF4y2Ba：gydF4y2Ba688gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba689gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba 摘要gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
      23. ↵gydF4y2Ba
        1. Von-HerbaygydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 奥托gydF4y2Ba高频gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1996gydF4y2Ba）gydF4y2Ba溃疡性结肠炎中的反洗性回肠炎:302例患者的研究。gydF4y2Ba福尔克研讨会gydF4y2Ba96gydF4y2Ba：gydF4y2Ba85gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba
      24. ↵gydF4y2Ba
        1. 埃克gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. HelmickgydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 扎克gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1990gydF4y2Ba）gydF4y2Ba溃疡性结肠炎和结直肠癌。gydF4y2BaN英语J医学gydF4y2Ba323gydF4y2Ba：gydF4y2Ba1228gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1233gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      25. ↵gydF4y2Ba
        1. KatzkagydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 布罗迪gydF4y2BaRSgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 莫里斯gydF4y2BaEgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1983gydF4y2Ba）gydF4y2Ba溃疡性结肠炎患者结直肠癌风险评估:来自私人诊所的经验。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba85gydF4y2Ba：gydF4y2Ba22gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba29gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      26. ↵gydF4y2Ba
        1. 克恩gydF4y2BaSEgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. RedstongydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 西摩gydF4y2BaABgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1994gydF4y2Ba）gydF4y2Ba结肠炎相关肿瘤的分子遗传学特征。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba107gydF4y2Ba：gydF4y2Ba420gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba428gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba
      27. ↵gydF4y2Ba
        1. 伯恩斯坦gydF4y2BaCNgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        2. 温斯坦gydF4y2BaWMgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        3. 莱文gydF4y2BaDSgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
        4. et al。gydF4y2Ba
        （gydF4y2Ba1995gydF4y2Ba）gydF4y2Ba医生对溃疡性结肠炎不典型增生的认识和监测结肠镜的方法。gydF4y2Ba是胃肠醇吗gydF4y2Ba90gydF4y2Ba：gydF4y2Ba2106gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba2114gydF4y2Ba．gydF4y2Ba
        OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 科学网gydF4y2Ba