条文本gydF4y2Ba

从居民婴儿双歧杆菌菌株人类胃肠道微生物区系发挥抗菌活性gydF4y2Ba
免费的gydF4y2Ba
  1. V LievingydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  2. 我PeiffergydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  3. 年代HudaultgydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  4. F装置gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  5. D臂铠gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  6. J-R需要雇gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  7. 一个L ServingydF4y2Ba一个gydF4y2Ba
  1. 一个gydF4y2Ba国家卫生研究所et de la医学研究院,510年团结,这里de年鉴,巴黎,92296 Chatenay-Malabry,法国,gydF4y2BabgydF4y2Ba雀巢研究中心Vers-chez-les-blanc, BP 44岁的瑞士洛桑ch - 1000 26日gydF4y2Ba
  1. L Servin,将年鉴巴黎XI, INSERM团结510 f - 92296 Chatenay-Malabry,法国。gydF4y2Baalain.servin在{}cep.u-psud.frgydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

背景和目的gydF4y2Ba胃肠道微生物区系施加对enteropathogens屏障作用。本研究的目的是检查如果双歧杆菌,人类结肠微生物区系的主要物种,参与障碍的效果通过开发针对enterovirulent细菌抗菌活性。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba抗菌活性研究体外对多种革兰氏阴性和革兰氏阳性致病菌。抑制gydF4y2Ba鼠伤寒沙门氏菌gydF4y2BaSL1334细胞协会和使用Caco-2细胞体外细胞入侵了。殖民的胃肠道体内双歧杆菌在无菌检查C3 /他/ Oujco老鼠。抗菌活性在无菌检查体内C3 /他/ Oujco小鼠感染了致命的gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5的压力。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba14个人类双歧杆菌菌株分离婴儿大便检查抗菌活性。两个菌株(CA1和F9)表达了对病原体的体外对抗活动,抑制细胞进入,细胞内死亡gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344 Caco-2细胞。抗菌组件(s)由CA1和F9被发现是一种亲脂性的分子(s)的分子量小于3500。在无菌C3 /他/ Oujco老鼠,CA1和F9菌株殖民肠道和保护老鼠gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5致命的感染。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba几个从居民婴儿双歧杆菌菌株人类胃肠道微生物区系发挥抗菌活性,表明他们可以参与“门槛效应”产生的土著微生物群落。gydF4y2Ba

  • 双歧杆菌gydF4y2Ba
  • 婴儿微生物区系gydF4y2Ba
  • 胃肠道感染gydF4y2Ba
  • 抗菌gydF4y2Ba
  • 微生物感染gydF4y2Ba
  • 肠细胞gydF4y2Ba
  • 略语gydF4y2Ba

    SCSgydF4y2Ba
    花文化的上层清液gydF4y2Ba
    美国公共电视台gydF4y2Ba
    磷酸缓冲盐gydF4y2Ba
    cfugydF4y2Ba
    集落形成单位gydF4y2Ba
    汤夫人gydF4y2Ba
    德曼,Rogosa夏普肉汤gydF4y2Ba
    运输安全管理局gydF4y2Ba
    triptic大豆琼脂gydF4y2Ba
  • 来自Altmetric.com的统计gydF4y2Ba

    请求的权限gydF4y2Ba

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    人类胃肠道正常菌群包含许多不同的种群起着关键作用的细菌宿主的发展和福祉。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba特别是,肠道微生物区系对病原体的产生保护作用。gydF4y2Ba2gydF4y2Ba知识主要属的物种,他们的水平和生化活动是必不可少的理解消化道的微生物生态学。一个历史悠久但有争议的概念是有益的物种。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba物种在人类肠道微生物区系中,一些报告强调双歧杆菌的作用。双歧杆菌在厌氧、杆状的革兰氏阳性细菌,是正常人类结肠癌的居民构成厌氧植物的主要组成部分。事实上,双歧杆菌是主要的肠道微生物的母乳喂养婴儿。gydF4y2Ba5 - 8gydF4y2Ba成年人也双歧杆菌在结肠菌群。gydF4y2Ba9gydF4y2Ba肠道人类肠道微生物区系的组成可以调制活微生物饲料添加剂。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba11gydF4y2Ba此外,prebiotics-that non-digestible食品成份也修改肠道微生物区系,特别是增加双歧杆菌的水平。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12gydF4y2Ba双歧杆菌的作用提出了宿主抵抗感染。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba体外实验和动物研究表明,双歧杆菌对病原体产生敌对活动。gydF4y2Ba14到20gydF4y2Ba此外,它是承认双歧杆菌的抗菌特性可能导致母乳喂养提供的保护对肠道感染。gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba获得进一步了解居民的机制人类微生物区系的双歧杆菌对病原体可能会产生一种保护作用,我们研究了双歧杆菌的抗菌活性菌株分离婴儿大便。gydF4y2Ba

    材料和方法gydF4y2Ba

    细菌gydF4y2Ba

    人类粪便从婴儿双歧杆菌菌株。坚果大小的块粪便是放置在一个无菌管。为获得最佳的生存极为敏感的厌氧细菌,样品必须治疗后30分钟内发射。否则,样品保存在一个厌氧罐,直到分析(最多10个小时)。隔离是在厌氧烦恼室进行。首先,进行稀释10倍和10%甘油预振铃器解决方案。样品是然后整除和安全库存准备在液态氮冷冻。连续稀释准备和100μl每个稀释镀在琼脂板准备中双歧杆菌选择性。gydF4y2Ba23gydF4y2Ba盘子在厌氧条件下培养2天。双歧杆菌属殖民地和白色。然而,乳酸杆菌等细菌生长在这个媒介。双歧杆菌与其他殖民地,有必要通过光学显微镜检查每个孤立的殖民地。使用选择性培养基尤其适应促进双歧杆菌的典型的Y形。可能的殖民地双歧杆菌再次被孤立和种植在同一媒介放大,进一步识别和保护。最后识别使用API测试(API ID 32。生物Merieux,马西l 'Etoile、法国)。殖民地从而确定提取琼脂板和单一化的BHI介质(Oxoid)含40%甘油(w / v)。整除cryotubes转移。 These tubes were frozen and kept in liquid nitrogen.

    在使用之前,双歧杆菌在厌氧条件下生长(Gaspack HgydF4y2Ba2gydF4y2Ba+有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)在德曼、Rogosa夏普(夫人)肉汤(法国)Biokar,只是一个木偶2×24小时37°C。花文化上层清液(SCS)的双歧杆菌是通过离心10 000gydF4y2BaggydF4y2Ba30分钟在4°C。离心机SCS通过无菌0.22μm过滤装置Millex GS(微孔,Molsheim,法国)。过滤SCS验证了双歧杆菌的缺席的胰蛋白酶的电镀大豆琼脂。pH值从4到4.5为不同bifidobacteria-SCS观察;因此,bifidobacteria-SCS的pH值调整到4.5与盐酸对所有实验。集中bifidobacteria-SCS是通过冷冻干燥(2.5倍集中注意力,pH值4.5)。gydF4y2Ba

    鼠伤寒沙门氏菌gydF4y2BaSL 1344年的礼物不好储料器(斯坦福,加州,美国)gydF4y2Ba24gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5是由我提供Popoff(巴斯德研究所、巴黎、法国),gydF4y2Ba25gydF4y2Ba单核细胞增多性李斯特氏菌gydF4y2Ba(他还gydF4y2Ba+gydF4y2Ba)是由J L盖拉德(将Necker-Enfants病,巴黎,法国),gydF4y2Ba26gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2BaC1845礼物年代污垢(美国西雅图华盛顿大学),gydF4y2Ba27gydF4y2Ba和弗氏志贺菌gydF4y2BaM90T是由P Sansonetti(巴黎巴斯德研究所)。gydF4y2Ba28gydF4y2Ba艰难梭状芽胞杆菌gydF4y2BaCd 79 - 685年从病人的粪便样本中分离抗生素相关pseudomembranous结肠炎(de Bacteriologie研究所,斯特拉斯堡,法国)。gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba金黄色葡萄球菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba链球菌DgydF4y2Ba,gydF4y2Ba铜绿假单胞菌,gydF4y2Ba和gydF4y2Ba肺炎克雷伯菌gydF4y2Ba股票临床分离的微生物实验室将年鉴巴黎,法国Chatenay-Malabry。gydF4y2Ba

    抗菌测试gydF4y2Ba

    抗菌活性双歧杆菌的检查如前所述。gydF4y2Ba30 -gydF4y2Ba应变为指标,gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344一夜之间成长了18个小时在仅有37°C误事。获得mid-logarithmic生物阶段,10毫升新鲜trypticase大豆肉汤注射200μl培养Luria肉汤和孵化为一个额外的三个小时37°C。细菌是离心机,享年5500岁gydF4y2BaggydF4y2Ba五分钟在4°C,洗一次磷酸缓冲盐(PBS)和PBS resuspended。gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba清点,包含10卷吗gydF4y2Ba8gydF4y2Ba集落形成单位(cfu) / ml被用来确定bifidobacteria-SCS的活动。菌落数检测被孵化1毫升的PBS包含执行gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba(10gydF4y2Ba8gydF4y2Bacfu /毫升)与1毫升的双歧杆菌SCS在37°C。整除被移除,在预先确定的时间间隔连续稀释,镀trypticase大豆琼脂(TSA)来确定菌落计数。gydF4y2Ba

    BIFIDOBACTERIA-SCS抗菌活性的特点gydF4y2Ba

    剩下的抗菌活性gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344在处理样本是由上述抗菌试验。gydF4y2Ba

    硫酸铵沉淀是由固体硫酸铵添加到bifidobacteria-SCS搅拌直到解决方案达到60%饱和度。这个解决方案是保持在4°C一夜之间允许完整的蛋白质沉淀,然后离心10 000gydF4y2BaggydF4y2Ba15分钟。活动是在无菌颗粒resuspended PBS决定。gydF4y2Ba

    亲脂性的分数提取从bifidobacteria-SCS chloroform-methanol(1:1, /卷卷)。结果氯仿层是在氮气流干,亲脂性的分数是resuspended无菌PBS测试活动。gydF4y2Ba

    估计的分子量是由透析bifidobacteria-SCS光谱/膜运动油管(美国加州频谱公司、嘉丁拿),切断分子量为3500。gydF4y2Ba

    细胞培养gydF4y2Ba

    我们使用了培养人类结肠腺癌Caco-2细胞系,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba自发地区别于成熟的文化表达特征的小肠肠上皮细胞。gydF4y2Ba34gydF4y2BaCaco-2细胞通常生长在杜尔贝科修改鹰的最小基本培养基(25毫米的葡萄糖)(Eurobio,巴黎,法国),补充20%胎牛血清(勃,曼海姆,德国)和1%非必需氨基酸。细胞被播种在六康宁组织培养板(康宁玻璃作品,康宁,纽约,美国)的浓度10gydF4y2Ba5gydF4y2Ba细胞/厘米gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。出于维护目的,细胞通过每周用0.25%胰蛋白酶在CagydF4y2Ba2 +gydF4y2Ba毫克gydF4y2Ba2 +gydF4y2Ba自由包含0.53毫米EDTA PBS。维护细胞和所有实验进行了37°C公司10%gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/ 90%空气气氛。在后期分化细胞用于坚持化验post-confluence文化(15天)。gydF4y2Ba

    培养细胞的感染gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba

    细胞感染试验进行了如前所报道。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30 -gydF4y2Ba,gydF4y2Ba35gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba简单地说,在感染之前,Caco-2层与PBS洗两次。gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344悬浮在培养基和2毫升(10gydF4y2Ba7gydF4y2Ba或10gydF4y2Ba8gydF4y2Bacfu /毫升如前所述)这种悬架被添加到每个细胞培养板。板块在孵化一小时37°C公司10%gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/ 90%空气,然后用无菌水洗三次PBS。gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba掩饰是由定量测定细菌感染,位于层使用氨基糖苷类抗生素分析。孵化后,单层膜与无菌PBS和洗两次孵化一个小时在一个中等含庆大霉素50μg /毫升。细菌粘附到细胞刷状缘迅速死亡,而位于细胞没有。受感染的单层膜与PBS洗去杀死细菌。单层膜的细胞溶解与消毒HgydF4y2Ba2gydF4y2Bao .适当稀释镀在trypticase大豆琼脂的数量来确定可行的细胞内细菌菌落计数。每个试验进行了一式三份和三个连续Caco-2细胞的通道。gydF4y2Ba

    抑制gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba细胞内Caco-2 SL1344入侵或bifidobacteria-SCS夫人检查如前所述。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba35gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba前细胞感染,病原体(10gydF4y2Ba8gydF4y2Bacfu /毫升)与夫人或bifidobacteria-SCS preincubated(2.5倍集中和调整pH值4.5)一小时在37°C。离心后(5500gydF4y2BaggydF4y2Ba在4°C, 10分钟),细菌都洗PBS和resuspended Caco-2细胞培养基。接触细胞和夫人或SCS治疗gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba是一小时37°C。确定可行的细胞内gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba进行如上所述。gydF4y2Ba

    活动对细胞内或bifidobacteria-SCS夫人gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba确定使用preinfected Caco-2如前所述。gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba细胞被感染了gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344 (10gydF4y2Ba8gydF4y2Bacfu /毫升)一小时在37°C。洗两次与PBS感染细胞后,细胞外的细菌被庆大霉素(50μg /毫升,一小时37°C)和PBS细胞被洗去杀死细菌。夫人或bifidobacteria-SCS(2.5倍浓缩和调整pH值4.5)添加水、preinfected细胞和孵化一小时37°C。确定可行的细胞内gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba进行如上所述。gydF4y2Ba

    活性双歧杆菌菌株gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5无菌小鼠感染gydF4y2Ba

    体内抗菌活性双歧杆菌菌株的研究使用的协议之前用于确定列阵活动gydF4y2Ba乳酸菌gydF4y2Ba在无菌老鼠。gydF4y2Ba32gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5应变是生长在Luria肉汤18小时37°C。文化在PBS收获。电镀后可行的细菌被数合适的稀释TSA和孵化37°C 18个小时。接种的gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5在无菌的或monoassociated老鼠是如下:单剂量的2×10gydF4y2Ba6gydF4y2Bacfu /鼠标给动物,剥夺水自前一天,瓶装水。Monoxenic老鼠无菌的影响/他/ Oujco老鼠每组)(6小鼠接种双歧杆菌菌株作为单一剂量的100倍稀释在瓶装水、新鲜的文化和C5前一周的挑战。gydF4y2Ba

    双歧杆菌测定殖民MONOXENIC小鼠的肠道gydF4y2Ba

    无菌动物(69年L 'Arbresle Iffa信条,法国)成年女性影响/他/ Oujco老鼠的7 - 8周的年龄。他们被安置和美联储按照有关国家立法。无菌小鼠(Cesal、奥尔良、法国)饲养Trexler类型光电隔离器装有快速传输系统(La Calhene Velizy Villacoublay,法国)。他们随意喂食商业饮食RO3 (UAR Villemoisson /食人魔,法国)在40 kGy的辐照,热压处理过的去除矿物质水,分别或non-irradiated饮食。gydF4y2Ba

    双歧杆菌菌株接种于无菌影响/他/ Oujco老鼠每组小鼠(6)作为单一剂量的100倍稀释新鲜文化瓶装水。前一周的挑战,monoassociated颈无菌老鼠被伸长。胃的内容,每一部分小肠(小肠被分成三个相等的部分:也ψ2,和后溪)和盲肠取样。确定水平的双歧杆菌与组织相关的不同部分胃肠道,胃、小肠的三个部分,结肠和盲肠采样和清洗与消毒PBS的8倍。组织称重,混合着1毫升的PBS Ultraturax两分钟,然后稀释10倍。项双歧杆菌通过电镀0.1毫升的每个系列稀释10倍夫人琼脂pH值5.4。板块在37°C 48小时孵化在厌氧条件下(Gaspack HgydF4y2Ba2gydF4y2Ba+有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。双歧杆菌的细菌计数每克的内容或组织。gydF4y2Ba

    结果gydF4y2Ba

    体外抗菌活性gydF4y2Ba

    14个人类双歧杆菌菌株分离婴儿大便检查他们的抗菌活性(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。为此,gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba应变SL1344被选中作为一个指标。gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344对待bifidobacteria-SCS检查。只有两个bifidobacteria-SCS (CA1和F9)显示高抗菌活性下降5 - 6日志gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba生存能力。夫人(控制)都没有活动。gydF4y2Ba

    表1gydF4y2Ba

    活性双歧杆菌菌株分离出人类居民婴儿胃肠道微生物区系对年代培养SL1344压力gydF4y2Ba

    其他病原体的敏感性CA1-SCS F9-SCS检查。验证所有微生物的可行性与bifidobacteria-SCS 1和3个小时的潜伏期后(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。的可行性gydF4y2Ba链球菌gydF4y2Baspp D组,gydF4y2Ba年代flexnerigydF4y2Ba,gydF4y2BaC固执的gydF4y2Ba在任何时间点没有影响。的可行性gydF4y2BaL monocytogenesgydF4y2Ba没有经过一个小时的接触和影响较小程度的影响经过三个小时的接触(3日志减少)。gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba,gydF4y2BaK肺炎,Y伪gydF4y2Ba,或gydF4y2Ba年代球菌gydF4y2Ba可行性较小程度没有影响或影响后一个小时的接触,但相比大大减少了三个小时后联系(5 - 6日志减少)。的可行性gydF4y2BaP绿脓杆菌gydF4y2Ba大大减少了在两次(6日志减少)。gydF4y2Ba

    表2gydF4y2Ba

    婴儿双歧杆菌菌株对革兰氏阳性和革兰氏阴性病菌的生存能力gydF4y2Ba

    抗菌活性的特点的CA1和F9 bifidobacteria-SCSs和检查gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba(表SL1344应变被选中作为一个指标gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。与硫酸铵沉淀的蛋白质存在于bifidobacteria-SCSs并不影响活动。活动中发现的亲脂性的部分提取从bifidobacteria-SCSs chloroform-methanol (1:1)。透析后bifidobacteria-SCSs(分子量切断了3500),活动活动下降(100%)消失。gydF4y2Ba

    表3gydF4y2Ba

    bifidobacteria-SCS抗菌活性的特性gydF4y2Ba

    活动对gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba感染人类肠道Caco-2细胞培养gydF4y2Ba

    CA1-SCS和F9-SCS的活动gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba应变SL1344感染分化enterocyte-like Caco-2细胞gydF4y2Ba24gydF4y2Ba使用两个实验条件(检查表吗gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

    表4gydF4y2Ba

    婴儿双歧杆菌菌株对年代的活动培养SL1344毒株感染人类完全分化enterocyte-like Caco-2细胞文化gydF4y2Ba

    当gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba(10gydF4y2Ba8gydF4y2Bacfu /毫升)受到CA1-SCS或F9-SCS一小时37°C附着力试验前,10gydF4y2Ba7gydF4y2Bacfu /毫升细菌仍然是可行的。当10gydF4y2Ba7gydF4y2Bacfu /毫升gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba在Caco-2细胞孵育一小时37°C, 10gydF4y2Ba6gydF4y2Bacfu /毫升细胞被发现。细胞显著减少条目(4日志减少)CA1-SCS或F9-SCS进行预处理gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaCaco-2细胞内观察与治疗gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba。作为一个控制,gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba(10gydF4y2Ba8gydF4y2Ba夫人cfu /毫升)受到前一小时在37°C附着力试验。没有变化gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba可行性(没有显示)gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba细胞进入(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba夫人)观察Caco-2细胞内进行预处理gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba与未经处理的gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba。这个结果表明CA1-SCS或F9-SCS抑制Caco-2细胞感染gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

    CA1-SCS的活动或F9-SCS Caco-2细胞检查preinfected一小时在37°CgydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaSL1344(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。一个可行的细胞内的数量显著减少gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba观察当preinfected Caco-2细胞暴露于CA1-SCS或F9-SCS(3日志减少)。相比之下,夫人,用作控制,是不活跃的。这个结果表明CA1-SCS或F9-SCS治疗杀死细胞gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

    抗菌活性对gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba感染的无菌小鼠模型gydF4y2Ba

    调查如果CA1和F9细菌防止无菌小鼠gydF4y2Ba沙门氏菌gydF4y2Ba感染,CA1和F9 monoassociated无菌影响/他/ Oujco老鼠感染gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5。图中所示gydF4y2Ba1gydF4y2Ba在无菌C5感染小鼠,观察第一死亡率在感染后4天,100%死亡率观察感染后的11天。高度显著延迟死亡率在CA1和F9 monoassociated老鼠感染gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2BaC5与无菌C5感染小鼠(p < 0.01)。事实上,第一个感染死亡率发生在11 - 12天后在CA1或F9 monoassosiated C5被感染的老鼠。此外,30%和75%的CA1和F9 monoassociated C5感染小鼠存活在感染后30天,分别。相对曲线下的面积显示大量增加CA1和F9 monoassosiated C5感染小鼠(分别为107年和147年)与无菌C5感染小鼠(31)。gydF4y2Ba

    图1gydF4y2Ba

    保护作用的人类婴儿双歧杆菌CA1和F9菌株成立于无菌影响他对S / Oujco小鼠沙门氏菌感染致命的感染。实验材料与方法中描述的条件。gydF4y2Ba

    检查水平的小鼠的肠道双歧杆菌殖民,无菌影响/他/ Oujco老鼠收到人类婴儿双歧杆菌作为单一剂量。七天之后,政府,建立了双歧杆菌在肠道(表gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)。人口的4 - 6日志cfu / g的内容在胃和小肠的三个部分婴儿CA1和F9菌株。同样高的人群(9日志cfu / g(内容)被发现在盲肠和结肠两个婴儿菌株。双歧杆菌与组织有关的水平是决定组织后清洗与消毒PBS的8倍。人口的3 - 5个日志cfu / g的组织观察组织的胃和小肠的三个部分婴儿CA1和F9菌株。相同日志cfu /人口6 - 7克的盲肠和结肠组织中发现了两个婴儿菌株。gydF4y2Ba

    表5gydF4y2Ba

    婴儿双歧杆菌的分布殖民的肠无菌影响/他/ Oujco老鼠gydF4y2Ba

    讨论gydF4y2Ba

    重要的对人类健康,胃肠道微生物区系包含一个巨大和复杂的微生物形成生物宿主身体的关键组成部分。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba12gydF4y2Ba这种微生物区系组成的不同种类的微生物。一些物种之间的相互作用已经被观察到。潜在的破坏性的微生物区系对属性或促进健康。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba一个历史悠久的概念是有益和有害物种。组件之间的微生物区系,有人建议,双歧杆菌在表演中发挥作用,以阻挡殖民胃肠道的致病细菌。除了双歧杆菌、乳酸杆菌尤其是已经检查了有关他们对病原体的“门槛效应”的作用。最近的报告记录,乳酸杆菌、肠道微生物区系的小属,抑制病原体培养uroepithelial上的附件gydF4y2Ba37gydF4y2Ba,gydF4y2Ba38gydF4y2Ba和肠道gydF4y2Ba39gydF4y2Ba,gydF4y2Ba40gydF4y2Ba细胞和粘液。gydF4y2Ba41gydF4y2Ba此外,报告显示,出现乳酸杆菌在无菌老鼠和连续流文化可以与竞争gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba在胃和小肠,而gydF4y2Ba梭状芽胞杆菌gydF4y2Ba已经发现控制gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba在大肠。gydF4y2Ba42gydF4y2Ba乳酸杆菌monoassociated老鼠gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba和传统的老鼠用乳酸杆菌治疗gydF4y2Ba43gydF4y2Ba是防止感染。其他报告显示一个潜在的双歧杆菌,分离出成人凳子,抑制病原体的绑定在一个体外模型。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba

    这里介绍我们的研究结果表明:(1)并不是所有的双歧杆菌菌株居民婴儿微生物区系的抗菌活性;(2)这两个婴儿双歧杆菌菌株CA1和F9发达体外抗菌活性可以殖民无菌小鼠消化道;(3)建立婴儿CA1和F9细菌发挥高效的抗菌活性gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba感染的老鼠。双歧杆菌开发抗菌性的机制还有待阐明。一些报告表明,双歧杆菌可以刺激免疫系统。gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,gydF4y2Ba21gydF4y2Ba例如,双歧杆菌菌株增加大鼠的抗沙门氏菌感染。gydF4y2Ba44gydF4y2BaB谕令gydF4y2BaIgA YIT4064增强抗原特异性抗体针对轮状病毒在小鼠乳腺保护幼崽收到牛奶对轮状病毒的挑战。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba另一份报告显示,反对殖民抵抗机制gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba在人类粪便细菌相关小鼠接种细菌的混合物分离人类母乳喂养婴儿的粪便含有gydF4y2BaB bifidumgydF4y2Ba有关降低pH值和短链脂肪酸的存在在盲肠的内容。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba另一个的作用机制提出了gydF4y2Ba对象的gydF4y2Ba应变发展广谱抗菌性通过抗菌化合物的生产,与酸生产无关,抑制病原菌的生长。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba我们最近提供的证据表明,选择的双歧杆菌菌株分离成人凳子抑制人类enteropathogens绑定到培养enterocyte-like Caco-2细胞。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba这里介绍我们的结果和相关的婴儿双歧杆菌的抗菌活性菌株之一是一致的行动的机制依赖于生产抗菌化合物,正如前面提出的。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba事实上,我们已经提供了证据表明,菌株的活动CA1和F9体外抗菌化合物的结果出现在花文化上层清液,表明它们分泌。有趣的是,藤原和同事gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba最近描述(s)由蛋白质的因素gydF4y2Ba双歧杆菌longumgydF4y2BaSBT 2928, 000年至少有100分子量,而抑制产肠毒素的依从性gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba应变Pb176表达殖民因素粘连二世gangliotetrasylceramide GA1分子体外。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba我们发现CA1和F9双歧杆菌产生的抗菌亲脂性的因素(s)和低分子量约为3500。易卜拉欣和BezkorovainygydF4y2Ba45gydF4y2Ba报道称,有机酸的双歧杆菌作为anti-infectious代理。双歧杆菌抗菌因子(s)的特点与产生的抗菌因子(s)的几个乳酸杆菌菌株gydF4y2Ba46gydF4y2Ba特别是那些孤立的从人类粪便和分泌抗菌化合物等gydF4y2Ba干酪乳杆菌喂食gydF4y2BaGG,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba,gydF4y2Ba47gydF4y2BaL johnsoniigydF4y2BaLA1,gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba和gydF4y2BaL嗜酸的gydF4y2Ba磅,gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba,gydF4y2Ba39gydF4y2Ba,gydF4y2Ba40gydF4y2Ba它抑制gydF4y2Ba年代沙门氏菌感染gydF4y2Ba感染体外和体内。gydF4y2Ba

    过去10年,证据积累在肠道免疫系统的防御。gydF4y2Ba48gydF4y2Ba,gydF4y2Ba49gydF4y2Ba不断被释放抗生素蛋白如defensins和cryptdins和溶菌酶等酶,磷脂酶gydF4y2Ba2gydF4y2Ba抗菌活性,肠道上皮细胞的特化细胞可能影响细胞外环境,导致粘膜屏障功能。与宿主细胞免疫的防御系统,细菌的居民肠道微生物群落也产生抗菌物质。gydF4y2Ba50gydF4y2Ba这里给出的结果表明,内生微生物区系的其他物种如双歧杆菌可以参与潜在宿主防御病原微生物通过产生抗菌物质。gydF4y2Ba

    确认gydF4y2Ba

    这项工作是由国家卫生研究所之间的合同研究et de la医学研究院(INSERM)和巴黎,和Nestec(瑞士洛桑)。我们感谢M Metioui他仔细阅读手稿。gydF4y2Ba

    略语gydF4y2Ba

    SCSgydF4y2Ba
    花文化的上层清液gydF4y2Ba
    美国公共电视台gydF4y2Ba
    磷酸缓冲盐gydF4y2Ba
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    集落形成单位gydF4y2Ba
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    德曼,Rogosa夏普肉汤gydF4y2Ba
    运输安全管理局gydF4y2Ba
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    引用gydF4y2Ba

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