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胃
的影响幽门螺杆菌感染胃酸分泌,在蒙古沙鼠血清胃泌激素水平
免费的
  1. 米高岛,
  2. T Furuta,
  3. H堆,
  4. H Sugimura,
  5. E金子
  1. 第一医学、病理学系和内镜与光动力药物,滨松医科大学的,日本滨松
  1. 首先医学系的米高岛博士滨松大学医学院3600年Handa-cho,日本滨松,431 - 3192年。takam在{}h7.dion.ne.jp

文摘

背景和目的身体胃炎引起的幽门螺杆菌感染似乎抑制胃酸分泌。本研究的目的是确定的影响H幽门感染胃酸分泌和阐明其机制,参照白介素- 1β(IL-1β)。

方法(1)蒙古沙鼠接种口服H幽门。接种前6和12周后,血清胃泌激素水平,胃酸,胃粘膜IL-1βmRNA水平测定。病理变化也决定根据悉尼系统更新。(2)影响重组人il - 1受体拮抗剂(rhIL-1ra)胃酸和血清胃泌激素水平也决定。

结果(1)分数的活动和炎症胃炎和血清胃泌激素水平显著增加,和胃酸明显减少6和12周后接种H幽门。胃粘膜IL-1βmRNA水平也升高6和12周后接种H幽门。(2)酸产量和感染组血清胃泌激素水平回到rhIL-1ra注入后控制水平。

结论胃酸分泌减少,血清胃泌激素水平增加了蒙古沙鼠感染H幽门。这种变化在胃酸分泌似乎是由IL-1β引起的H幽门感染。

  • 幽门螺杆菌
  • 白介素- 1β
  • 蒙古沙鼠
  • 胃酸
  • 胃泌激素

  • 略语

    IL-1β
    白介素- 1β
    rhIL-1ra
    重组人il - 1受体拮抗剂
    CFU
    集落形成单位
    聚合酶链反应
    聚合酶链反应

    • http://dx.doi.org/10.1136/gut.48.6.765

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      幽门螺杆菌它生活在人类胃粘膜,引起慢性胃炎和消化性溃疡在某些科目。1,2的影响H幽门感染胃酸分泌取决于几个变量。据报道,基底和峰值酸输出,和血浆胃泌激素水平明显更高的患者H幽门积极的十二指肠溃疡比H幽门消极的控制。3,4在一些患者H幽门有关身体胃炎、胃酸是低或缺失,而酸分泌提高与根除和血清胃泌激素水平显著降低H幽门。5相比之下,一个大的比例H幽门感染non-ulcer病人没有异常胃泌激素释放或胃酸。6最近,我们报道,酸抑制的程度取决于的分布H幽门体内感染和胃炎的程度,和血清胃泌激素水平增加十二指肠溃疡和胃溃疡患者。7然而,的机制H幽门影响酸分泌仍不清楚。

      白介素- 1β(IL-1β),它在炎症和免疫反应中起着重要的作用,8已被证明在老鼠抑制胃酸分泌。9,10生产在胃粘膜IL-1β患者增加H幽门胃炎有关。11,12最近,El-Omar等报道,il - 1基因多态性与增强IL-1β的生产,与胃酸过少引起的风险增加有关H幽门感染胃癌的亲戚。13

      据报道,蒙古沙鼠很容易感染H幽门,导致发生胃炎、溃疡,肿瘤模仿H幽门积极的胃溃疡和胃癌患者。14,15然而,胃酸分泌和IL-1β蒙古沙鼠胃粘膜的水平还没有被研究过。因此在本研究中我们调查的影响H幽门感染胃酸分泌,在蒙古沙鼠血清胃泌激素水平。此外,我们检查如果IL-1β与酸分泌感染动物模型H幽门。

      方法

      动物

      六周大特定病原体自由男性蒙古沙鼠(毫克/海),意思是体重50克,从Seiwa购买实验动物有限公司(日本福冈)和光电隔离器安置在聚碳酸酯的笼子里。他们是美联储商业啮齿动物的饮食和提供水随意。动物实验是按照制度执行的指导方针。

      菌株,媒体,和增长

      一个H幽门标准菌株(ATCC43504)是来自美国文化(美国马里兰州)集合类型。这株细胞毒素相关蛋白阳性和空泡细胞毒素阳性。细菌生长在布鲁氏菌汤(桶;有限公司,正欲Cockeyville、美国马里兰)含10%马血清和microaerobic条件下孵化24小时37°C。

      细菌接种

      的文化H幽门(0.5毫升,1×108集落形成单位(CFU))的口服药物,用针,蒙古沙鼠在禁食24小时。16布鲁氏菌汤没有H幽门对照组。接种4小时后,蒙古沙鼠吃、住在相同的方式作为前6 - 12周。

      测量血清胃酸和胃泌激素的水平

      接种6和12周后,九个蒙古沙鼠感染H幽门和9个控制沙鼠接受手术和研究。幽门结扎在乙醚麻醉是陷阱胃液的腹部。幽门结扎术后,沙鼠从麻醉中醒来,被安置在笼子里没有食物或水为三个小时。三小时后,蒙古沙鼠乙醚麻醉下牺牲了。胃大弯立即被删除,打开。整个胃体重测量。胃的纵向一半是用于定量测定H幽门胃的,另一半用于组织学检查和IL-1β信使RNA的RNA的提取分析。血液样本得到确定血清胃泌激素水平。收集胃液,体积测量,浓度的酸滴定法测定为0.1 n氢氧化钠pH值7.0自动滴定仪(TOA电子有限公司、日本东京)。血清胃泌激素水平测定使用胃泌激素等装备(Gastrin-RIA工具包II;Dainabot有限公司、日本东京)和聚乙二醇法。抗体用于胃泌激素等方法强烈认识到12和酪胺酸残留在位置methionyl残留在胃泌激素位置15 (- 17)。因此,内部的和interassay系数分别为3.8 -5.5%和3.8 -6.7%,分别。意思是恢复胃泌激素添加到血清样本是106 (12.2)%。9六周大动物都牺牲了H幽门接种和酸产量和血清胃泌激素水平测量如上所述。

      注射白介素1受体拮抗剂

      重组人il - 1受体拮抗剂(rhIL-1ra)过表达大肠杆菌作为一个17 kd蛋白IL-1ra cDNA克隆到non-fused表达向量由中国Newtech发展和贸易公司提供(中国,北京)。九个蒙古沙鼠感染H幽门和9个控制沙鼠接种后12周注射rhIL-1ra腹腔内的剂量10单位/ g,幽门结扎后立即。三个小时后他们牺牲了。胃酸和血清胃泌激素水平分析了如上所述。

      量化的可行的H幽门

      胃大弯被打开后,胃是单一化的纵向一半在10毫升的磷酸缓冲盐与Polytron (Kinetica, Steinhofhalde,瑞典)。稀释的整除(100μl)应用于镀琼脂媒体含万古霉素(10 mg / l)、多粘菌素B (2500 IU / l),两性霉素B (2 mg / l)的隔离H幽门(Poamedia Eikenkagaku有限公司,东京,日本)。盘子被孵化microaerobic条件下七天在37°C。革兰氏阴性和氧化酶、过氧化氢酶和脲酶阳性螺旋弯曲棒被确定为H幽门。殖民地的数量确定。可行的数量H幽门是表示为CFU /胃。

      组织病理学

      每个胃中性缓冲福尔马林固定在10%。固定后,一条从胃,扩展从腔体,收集和嵌入在石蜡。条被切割成4μm块,沾haematoxylin-eosin和染色。

      在目前的研究中,一个病理学家半定量的分条盲目没有知识的H幽门感染的状况或持续时间。在每一个地带,微观调查进行文档组织病理学变化。多形核中性粒细胞活动,慢性炎症,腺体萎缩,肠上皮化生,H幽门胃粘膜的密度分级0,1,2,3根据悉尼系统更新。17

      序列分析的长爪沙鼠IL-1β基因和β-ACTIN基因

      确定长爪沙鼠IL-1β互补DNA克隆(互补),我们选择序列之间的相似部分小鼠IL-1βcDNA和相关生物活性的人类IL-1β序列部分。18 - 20我们选择了一个引物(对应于人类IL-1β位置外显子4 4445 - 4462年)和反向引物(职位外显子6 6673 - 6691年)聚合酶链反应(PCR)(图1),我们放大一段大约296个基点的cDNA胃粘膜的蒙古沙鼠。PCR克隆成pCRII用最初的产品是助教克隆工具(表达载体,圣地亚哥,加州,美国)。插入的核苷酸序列是由双脱氧链终止程序。21

      Oligonucleotide sequences of polymerase chain reaction (PCR) primers and competitive templates. The primer pair for Mongolian gerbil interleukin 1β (IL-1β) amplifies a 296 bp band. The primer pair for β-actin amplifies a 164 bp band. The competitive template for Mongolian gerbil IL-1β is 150 bp long, and that for β-actin is 82 bp long. PCR products of cDNA are distinguished by size from those of competitors.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图1
      图1

      寡核苷酸聚合酶链反应(PCR)引物序列和竞争模板。的引物对长爪沙鼠白介素- 1β(IL-1β)放大296个基点。β-actin放大的引物对164个基点。长爪沙鼠的竞争模板IL-1β长150个基点,对β-actin长82个基点。PCR产品cDNA区分大小于竞争对手。

      识别长爪沙鼠β-actin cDNA克隆,我们选择一个正向引物(对应于人类β-actin头寸390 - 411)和一个反向引物(位置,973 - 993年)(无花果1)。22我们放大了一段大约164个基点的cDNA序列并确定如上所述。

      分析的IL-1β定量逆转录-聚合酶链反应

      总RNA提取的胃粘膜长爪沙鼠后不久消除胃。RNA提取RNA提取进行了使用一个工具包(RNA关税;美国德克萨斯州Tel-Test公司,Friendswood)。DNase治疗后,5μg总RNA的部分解决方案是接受逆转录使用200 U的逆转录酶(上标核糖核酸酶H-Reverse转录酶;Gibco BRL,生命技术公司,美国马里兰州罗克维尔市)。

      的引物对长爪沙鼠IL-1β(无花果1乐队的cDNA)放大了296个基点。对于竞争性PCR,我们准备了一个竞争模板包含相同的引物结合(竞争对手)和相同的模板的一个子集序列作为引物结合的目标竞争和放大(无花果1)。PCR产品区分大小(cDNA 296个基点;竞争对手150个基点)。九个精确连续稀释10倍从1.0×103pg /μl 1.0×101pg /μl竞争者模板的准备。

      我们准备了混合包含大师,在最后一卷50μl,蒙古沙鼠IL-1β底漆和反向引物(0.5μM每个作为最终浓度),核苷酸(200μl每个作为最终浓度),5μl 10×PCR缓冲,1.25单位的Taq (Taq交货;曾豆类、志贺、日本)和2.0μl cDNA解决方案。一个整除48μl混合添加到2.0μl先前准备的竞争在几个稀释系列已知浓度的模板。PCR进行自动热循环(热循环PJ2000 DNA;优秀的,诺沃克,美国Conneticutt)。在94°C加热后五分钟,样本立即骑35次变性步骤为一分钟94°C,引物退火步骤55°C,一分钟,一分钟在72°C扩展步骤。最后一个周期包括扩展八分钟72°C,以确保产品的完整的扩展。

      完成的反应进行分析的电泳10μl整除(wt /卷)在3.0%琼脂糖凝胶含有0.5μg /毫升溴化乙锭。乐队是观想通过与紫外光激发,和296个基点(蒙古沙鼠IL-1β)和150年英国石油公司(竞争对手)乐队被发现(图2),这种凝胶被拍到,溴化乙锭发光强度测量CCD图像传感器(Densitograph ae - 6900 f;阿,日本东京)。296个基点的比值(互补)到150个基点(竞争对手)乐队绘制每一剂量的竞争对手加入到反应管。等价的(也就是说,那里有一个1:1比率)是IL-1β与竞争者和代表IL-1βmRNA的浓度未知(无花果3)。

      (A) Mongolian gerbil interleukin 1β (IL-1β) (296 bp) versus competitor (150 bp). Lane M is the size marker (øX174 digested with Hae III). Lanes 1–8 contain eightfold serial amounts of competitor DNA ranging from 1.0×10-0.5 pg/μl to 1.0×103 pg/μl competing against a fixed dose of cDNA. (B) β-actin (164 bp) versus competitor (82 bp). Lane M is the size marker (øX174 digested with Hinf I). Lanes 1–8 contain eightfold serial amounts of competitor DNA ranging from 1.0×10-0.5pg/μl to 1.0×103 pg/μl competing against a fixed dose of cDNA.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图2
      图2

      (一)蒙古沙鼠白介素- 1β(IL-1β)(296个基点)与竞争对手(150个基点)。巷M大小标记(øX174消化有三世)。车道1 - 8 8倍系列包含了大量的竞争对手从1.0×10的DNA-0.5pg /μl 1.0×103pg /μl与固定剂量的cDNA竞争。164 (B)β-actin (bp)与竞争对手(82个基点)。巷M大小标记(øX174消化Hinf我)。车道1 - 8 8倍系列包含了大量的竞争对手从1.0×10的DNA-0.5pg /μl 1.0×103pg /μl与固定剂量的cDNA竞争。

      (A) Logarithmic plot of the ratio of Mongolian gerbil interleukin 1β (IL-1β, 296 bp) to competitor (150 bp), corresponding to fig 2A. The quantity of IL-1β mRNA in the reaction tube was determined by calculating how much of the competitor was required to achieve equal amounts of product. The amount of IL-1β mRNA was then calculated by extrapolating from the intersection of the curves to the x axis where the amounts of IL-1β (296 bp) and competitor were equal. (B) Logarithmic plot of the ratio of β-actin (164 bp) to competitor (82 bp), corresponding to fig 2B.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图3
      图3

      (A)对数的情节比蒙古沙鼠白介素- 1β(IL-1β296 bp)竞争对手(150个基点),对应于图2a . IL-1βmRNA在反应管的数量取决于计算有多少竞争对手被要求获得等量的产品。IL-1βmRNA的数量是根据计算曲线的交点的x轴的IL-1β(296个基点)和竞争对手都是平等的。(B)比值的对数图β-actin(164个基点)的竞争对手(82个基点),对应于图2B。

      β-actin mRNA的数量也以类似的方法(图2B)。β-actin寡核苷酸引物的序列和竞争模板图所示1。23的IL-1βmRNA在胃粘膜被β-actin标准化,表示为IL-1β/β-actin比例。

      统计分析

      所有数值数据表示为(SEM)。统计分析,Statview软件包(Hulinks、东京、日本)的麦金塔电脑(苹果电脑公司,加州库比蒂诺市,美国)使用。胃酸的统计学意义差异,血清胃泌激素水平,身体重量,胃液胃重量、体积之间的感染和控制组织由学生决定t测试。差异值在6和12周后接种测定双向方差分析与费舍尔的多重比较检验。rhIL-1ra对胃酸的影响和感染的血清胃泌激素水平和控制组织是由一维方差分析与费舍尔的多重比较检验。胃炎分数差异的统计显著性感染和控制组织由Mann-Whitney U测试。差异导致p值⩽0.05被认为是重要的。

      结果

      H幽门感染,身体重量,蒙古沙鼠胃的重量

      H幽门在这项研究中检测出所有被感染的动物。可行的数量H幽门在胃里达到105.0CFU /胃壁六周和保持在105.1在12周(表CFU1)。身体重量的蒙古沙鼠时间依赖性之前6和12周后接种但有感染和控制组之间无显著差异(表1)。

      把这个表:
      表1

      体重的变化,胃液胃重量,体积的函数幽门螺杆菌(HP)感染

      胃的蒙古沙鼠体重6和12周后接种显著增加与接种之前,和胃感染组的权重明显比对照组的重,但无显著变化从6到12周后观察接种(表1)。

      组织病理学

      中性粒细胞和淋巴细胞的浸润,主要是在黏膜下层,传播从腔体和焦点聚集的淋巴细胞在黏膜下层腺腔和身体的边界,被观察到在蒙古沙鼠感染H幽门,接种后6和12周。相比之下,中性粒细胞和淋巴细胞的渗透很少或没有在对照组(无花果4)。将活动的得分明显高于感染组比对照组6 (p < 0.001)和接种后12周(p < 0.001)。分数为6和12周后的活动H幽门接种接种前相比明显增加(p = 0.0001, p < 0.01)(图5A)。在炎症的得分明显高于感染组比对照组的6 (p = 0.0001)和接种后12周(p < 0.0001)。分数为6和12周后炎症H幽门接种接种前相比明显增加(p = 0.0001, p = 0.0001)(图5B)。无显著变化,腺体萎缩观察感染和对照组之间在接种后6 - 12周。有检测到殖民地的倾向H幽门伴随着嗜中性粒细胞和淋巴细胞浸润(数据没有显示)。轻微的杯状细胞化生只有极少的情况下检测出感染组接种后12周(数据没有显示)。

      Histopathological changes in the gastric mucosa of Mongolian gerbils. (A) Inflammatory cell infiltrations were not observed in the control groups six weeks after inoculation. (B) Marked inflammatory cell infiltrations were observed in the infected groups six weeks after inoculation with H pylori. (C) Inflammatory cell infiltrations were not observed in the control groups 12 weeks after inoculation. (D) Severe inflammatory cell infiltrations were observed in the infected groups 12 weeks after inoculation with H pylori (haematoxylin-eosin, ×100).
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图4
      图4

      蒙古沙鼠胃粘膜的组织病理学变化。(一)炎性细胞对照组入渗的特点中,并未观察到六周后接种。(B)明显炎症细胞中观察到的渗透与H螺杆菌感染组六周后接种。(C)炎性细胞的渗透中,并未观察到对照组接种后12周。(D)严重炎性细胞渗入观察接种感染组12周后与H幽门(haematoxylin-eosin×100)。

      (A) Changes in gastritis scores for activity from before to six and 12 weeks after inoculation in the infected (Helicobacter pylori (HP+)) and control (HP−) groups. The variables used for grading gastritis were rated on a four point scale: 0, absent; 1, mild; 2, moderate; and 3, severe, in accordance with the Sydney system. Gastritis scores for activity in the infected groups significantly increased six and 12 weeks after H pylori inoculation. No significant changes were observed in the control groups. (B) Changes in gastritis scores for inflammation from before to six and 12 weeks after inoculation in the infected and control groups. Gastritis scores for inflammation in the infected groups significantly increased six and 12 weeks after H pylori inoculation. No significant changes were observed in the control groups.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图5
      图5

      (A)胃炎分数变化的活动在接种后6 - 12周之前感染(幽门螺杆菌(HP +))和控制(惠普−)组。变量用于分级胃炎被评为规模四个点:0,缺席;1、温和;2、温和;悉尼和3,严重,按照系统。胃炎分数活动感染组显著增加6和12周后H螺杆菌接种。对照组无显著变化观察。(B)的变化对炎症的胃炎成绩前6和12周后接种感染和控制的组织。胃炎分数为炎症感染组显著增加6和12周后H螺杆菌接种。对照组无显著变化观察。

      胃液量、胃酸

      胃液的体积6和12周后接种接种前相比显著增加。胃液感染组体积显著大于对照组(表1)。

      胃酸6和12周后H幽门接种感染组相比明显下降之前接种(22.5 29.6 (9.1),(4.3)v51.5(6.2)μEq / 3小时;p < 0.05, p < 0.01)。胃酸感染组显著低于对照组的6周(29.6 (9.1)v61.1(9.8)μEq / 3小时;p < 0.05), 12周(22.5 (4.3)v44.1(5.9)μEq / 3小时;接种后,p < 0.01)。没有显著变化,胃酸从6或12周之前观察对照组(无花果6)。

      Changes in gastric acid output from before to six and 12 weeks after inoculation in the infected (Helicobacter pylori (HP+)) and control (HP−) groups. Gastric acid output in the infected groups significantly decreased six and 12 weeks after H pylori inoculation. No significant changes were observed in the control groups. *p=0.0328; **p=0.0061 compared with before inoculation.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图6
      图6

      胃酸的变化之前的6和12周后接种感染(幽门螺杆菌(HP +))和控制(惠普−)组。胃酸感染组显著降低H螺杆菌接种后6 - 12周。对照组无显著变化观察。* p = 0.0328;* * p = 0.0061与之前相比接种。

      血清胃泌激素水平

      6和12周后血清胃泌激素水平H幽门接种感染组显著增加与之前接种(157.3 153.9 (13.4),(10.2)v100.4 (6.7)pg / ml;p < 0.01, p < 0.001)。血清胃泌激素水平明显高于感染组比对照组6周(153.9 (13.4)v112.9 (9.2)pg / ml;p < 0.05), 12周(157.3 (10.2)v118.4 (3.4)pg / ml;接种后,p < 0.01)。

      没有显著变化,血清胃泌激素水平在对照组观察前接种(图6和12周后7)。

      Changes in serum gastrin levels from before to 6 and 12 weeks after inoculation. Serum gastrin levels in the infected (Helicobacter pylori (HP+)) groups significantly increased six and 12 weeks after H pylori inoculation. No significant changes were observed in the control groups (HP−). *p=0.0014; **p=0.0008 compared with before innoculation.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图7
      图7

      血清胃泌激素水平变化从以前到6,接种后12周。感染血清胃泌激素水平(幽门螺杆菌(HP +))组显著增加6和12周后H螺杆菌接种。没有观察到显著变化的对照组(惠普−)。* p = 0.0014;* *与疫苗接种前相比p = 0.0008。

      序列分析的长爪沙鼠IL-1β基因和β-ACTIN基因

      296个基点的部分序列IL-1βcDNA对齐(无花果8A)。蒙古沙鼠和人类IL-1β的核苷酸序列密切相关(252 296(85.1%)),和蒙古沙鼠和小鼠IL-1β也密切相关(267 296 (90.2%))。我们也一致蒙古沙鼠、人类和小鼠β-actin(无花果8B)。蒙古沙鼠和人类β-actin的核苷酸序列密切相关(159/164:97.0%),与蒙古沙鼠鼠β-actin也密切相关(158/164,96.3%)。

      (A) Alignment of the 296 bp portion of interleukin 1β (IL-1β) cDNA sequences for the Mongolian gerbil, human, and mouse. Oligonucleotides in bold type in human and mouse are different from those of Mongolian gerbil; 85.1% oligonucleotide identities were observed between Mongolian gerbil and human and 90.2% between Mongolian gerbil and mouse. (B) Alignment of the 164 bp portion of β-actin cDNA sequences for the three species. Oligonucleotides in bold type in human and mouse were different from those of the Mongolian gerbil; 97.0% oligonucleotide identities were observed between Mongolian gerbil and human and 96.3% between Mongolian gerbil and mouse.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图8
      图8

      (A)排列的296个基点的一部分白介素- 1β(IL-1β)cDNA序列长爪沙鼠,人类和老鼠。寡核苷酸以粗体显示在人类和小鼠不同于蒙古沙鼠;85.1%寡核苷酸之间的身份观察蒙古沙鼠和人类之间,90.2%的蒙古沙鼠和老鼠。(B)排列的164个基点β-actin cDNA序列的三个物种的一部分。寡核苷酸以粗体显示在人类和小鼠不同于蒙古沙鼠;97.0%寡核苷酸之间的身份观察蒙古沙鼠和人类之间,96.3%的蒙古沙鼠和老鼠。

      IL-1βMRNA水平

      IL-1βmRNA水平6和12周后H幽门接种感染组显著增加与之前接种(26.5 22.4 (8.6),(6.2)v0.0 (0.0);p < 0.05, p < 0.01)。IL-1βmRNA水平胃粘膜感染组显著高于对照组6和12周后接种(22.4 (8.6)v0.06 (0.06)(p < 0.05)和26.5 (6.2)v0.02 (0.02)(p < 0.001))(无花果9)。

      Changes in interleukin 1β (IL-1β) mRNA levels from before to six and 12 weeks after inoculation in the infected (Helicobacter pylori (HP+)) and control (HP−) groups. Il-1β mRNA levels significantly increased six and 12 weeks after H pylori inoculation. IL-1β mRNA was virtually undetected in the control groups throughout the study. *p=0.0191; **p=0.0006 compared with before innoculation.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图9
      图9

      白介素- 1β的变化(IL-1β)mRNA水平在6和12周后接种感染(幽门螺杆菌(HP +))和控制(惠普−)组。Il-1βmRNA水平显著增加6和12周后H螺杆菌接种。IL-1βmRNA几乎未被发现在整个研究的对照组。* p = 0.0191;* *与疫苗接种前相比p = 0.0006。

      重组人白介素1受体拮抗剂的影响(rhIL-1ra)胃酸和血清胃泌激素水平

      胃酸在蒙古沙鼠感染H幽门rhIL-1ra注射后显著提高控制水平与受感染的人群没有收到rhIL-1ra注入(45.1 (7.3)v22.5(4.3)μEq / 3小时;p < 0.05),与对照组没有明显不同。没有显著的影响rhIL-1ra在胃酸中观察到蒙古沙鼠感染H幽门(54.1 (10.7)v44.1(5.9)μEq / 3小时)(图10)。

      Gastric acid output with (+) or without (−) recombinant human IL-1 receptor antagonist (rhIL-1ra) injection in the infected (Helicobacter pylori (HP+)) and control (HP−) groups. Gastric acid output significantly increased to control levels after rhIL-1ra injection in the infected groups whereas no significant changes were observed after rhIL-1ra injection in the control groups.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图10
      图10

      胃酸(+)或没有(−)重组人il - 1受体拮抗剂(rhIL-1ra)注射感染(幽门螺杆菌(HP +))和控制(惠普−)组。胃酸之后控制水平显著增加rhIL-1ra注射感染组而无显著变化观察rhIL-1ra注射后对照组。

      蒙古沙鼠感染血清胃泌激素水平H幽门rhIL-1ra注射后明显降低了控制水平与感染组相比没有rhIL-1ra注入(97.9 (5.8)v157.3 (10.2)pg / ml;p < 0.0001),与对照组没有显著不同。没有显著的影响rhIL-1ra在蒙古沙鼠血清胃泌激素水平观察H幽门感染(111.2 (7.5)v118.4 (3.4)pg / ml)(图11)。

      Serum gastrin levels with (+) or without (−) recombinant human IL-1 receptor antagonist (rhIL-1ra) injection in the infected (Helicobacter pylori (HP+)) and control (HP−) groups. Serum gastrin levels significantly decreased to control levels after rhIL-1ra injection in the infected groups whereas no significant changes were observed after rhIL-1ra injection in the control groups.
      " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图11
      图11

      血清胃泌激素水平(+)或没有(−)重组人il - 1受体拮抗剂(rhIL-1ra)注射感染(幽门螺杆菌(HP +))和控制(惠普−)组。血清胃泌激素水平显著降低控制水平rhIL-1ra注射后感染组而无显著变化观察rhIL-1ra注射后对照组。

      讨论

      在目前的研究中,我们决定改变后在胃酸H幽门感染和显示,H幽门感染引起的慢性活动性胃炎和抑制胃酸分泌,这被认为是由IL-1β。

      最近的研究显示,胃酸分泌不足在身体胃炎患者恢复很快消除H幽门炎症是有所改善,尽管胃萎缩和肠上皮化生没有明显改善。5,7,24,25胃粘膜炎症所致H幽门感染可能是胃酸分泌不足密切相关而不是萎缩。在目前的研究中,严重的胃炎后增加H幽门感染,但没有重大变化在胃粘膜腺体萎缩的蒙古沙鼠有或没有H幽门感染的12周内观察当前的研究。因此,胃酸分泌不足可能不依赖于腺体萎缩胃炎的严重程度,至少对我们研究的持续时间。

      H幽门本身和一些物质,如Nα甲基组胺产生的H幽门和细胞因子引起的H幽门感染,如IL-1β和肿瘤坏死因子α,已报告抑制胃酸分泌。每股26到29特别是,IL-1β称为酸分泌的有效抑制剂;外围和中央政府的IL-1β强有力地抑制胃酸分泌的实验动物。9,10,29-31IL-1β也直接被培养的兔壁细胞,抑制胃酸分泌32和损害enterochromaffin-like细胞体外功能,这可能是紧随其后的是显著降低酸产量。33此外,IL-1βmRNA水平和IL-1β释放胃粘膜的显著增加H幽门积极的病人。34,35在目前的研究中,IL-1βmRNA水平蒙古沙鼠胃粘膜的感染H幽门是高与对照组相比。此外,胃酸分泌感染组与对照组相比降低,rhIL-1ra恢复控制的水平。因此,IL-1β引起的H幽门感染被认为发挥重要作用在胃酸分泌不足在身体胃炎病人。

      在目前的研究中,炎症细胞的浸润,如多形核的和单核细胞,在胃粘膜传播从腔体和形成在黏膜下层淋巴滤泡腔之间的过渡区和身体被观察到在蒙古沙鼠感染H幽门。这些组织学研究结果类似于患者的胃粘膜H幽门积极的胃炎。36,37IL-1β释放主要来自激活单核细胞和巨噬细胞。8因此,渗透和活化的单核细胞和巨噬细胞诱导H幽门感染IL-1β释放,导致胃酸分泌不足。

      il - 1受体拮抗剂与il - 1受体结合块绑定IL-1α和IL-1β没有诱导自己的一个信号。8IL-1β在胃酸分泌的抑制作用是抑制由外围rhIL-1ra注入老鼠。31日,38rhIL-1ra已被用来作为强大的蒙古沙鼠il - 1受体阻滞剂在以前的报告。39人类、老鼠和老鼠IL-1β基因序列相似。40在目前的研究中,我们确定了基因序列的一部分的生物活性部分蒙古沙鼠IL-1β。有一个高水平的保护人类和长爪沙鼠之间的序列。此外,人类、老鼠和老鼠IL-1ra基因序列相似。40因此,rhIL-1ra认为工作是蒙古沙鼠IL-1β受体的拮抗剂。展示了在我们的研究中,胃酸分泌不足感染组注入rhIL-1ra后恢复控制的水平。这些结果表明,IL-1β诱导H幽门有关身体胃炎抑制胃酸分泌不足。

      在目前的研究中,我们发现H幽门感染减少胃酸分泌,但增加胃液的体积。因此,分泌的酸性中和因素,如重碳酸盐和粘液,被认为是增加了。最近的一项研究表明,IL-1β增加前列腺素的生产。41前列腺素增加碳酸氢盐和粘液分泌和抑制基底胃泌激素刺激胃酸分泌。42,43因此,增加胃的体积果汁尽管减少酸分泌可能是由前列腺素,由IL-1β诱导。

      我们也决定在蒙古沙鼠感染血清胃泌激素水平H幽门参照IL-1β。我们表明,血清胃泌激素水平增加H幽门感染。许多可能的因素与hypergastrinaemia有关H幽门感染的报告。例如,抑制缩胆囊素对胃泌激素释放的影响降低H幽门感染。44老鼠体内腔的氨升高血浆胃泌激素浓度。45细胞因子,如IL-1β、引发肿瘤坏死因子α,和干扰素γ释放胃泌激素从兔子,狗和人类窦的G细胞主要文化。46-48胃内的酸减低可能诱发hypergastrinaemia。49在目前的研究中,血清胃泌激素水平和粘膜IL-1β水平显著提高H幽门感染。rhIL-1ra注射后,血清胃泌激素水平下降控制水平增加胃酸。hypergastrinaemia这些发现强调两个原因:一个直接影响胃泌激素释放的IL-1βG细胞或胃泌激素释放相应降低胃内的酸度。低pH值的抑制作用观察胃泌激素的释放H幽门积极的和十二指肠溃疡疾病患者,以及H幽门消极的病人。50在目前的研究中,注入rhIL-1ra后,血清胃泌激素水平降低,胃酸分泌增加,尽管酸分泌胃泌激素是一种兴奋剂。因此,它是合理的,IL-1β抑制胃酸分泌导致hypergastrinaemia在酸分泌减少,补偿和IL-1β直接影响胃泌激素释放G细胞体内似乎有限的相关性。

      总之,我们已经确认H幽门感染导致胃炎从腔体内导致IL-1β胃粘膜,从而抑制胃酸分泌导致hypergastrinaemia。当然,会蔓延到壁粘膜萎缩,和胃壁细胞质量将明显减少,导致胃酸分泌不足如果研究期间变得更长。我们也发现部分序列的长爪沙鼠IL-1β基因和胃粘膜的IL-1βmRNA水平决定的。虽然我们不确定IL-1β释放,认为IL-1β水平对应mRNA水平。51因此,IL-1β引起的H幽门假设感染抑制胃酸分泌。

      最后,我们的结果应该是上下文中解释的局限性我们的研究关于蒙古沙鼠的使用有以下原因:蒙古沙鼠感染时H幽门、腔之间的过渡区和语料库的胃被报道逐渐扩大到胃底粘膜感染的进展。52这是类似于身体胃炎患者中观察到的现象。然而,可行的数量H幽门发现胃粘膜的蒙古沙鼠是远低于人类感染H幽门和H幽门(悉尼病毒)感染的老鼠。14,53敏感性的差异H幽门也许可以解释不同的数字。53此外,基础胃酸的蒙古沙鼠很低,大约土流网的老鼠中的输出。53这种低基酸分泌的蒙古沙鼠可能解释为什么十二指肠溃疡没有观察到这一点H幽门被感染的动物模型,尽管许多报道发展的胃溃疡和胃癌。15,16,52,53

      因此,我们认为这种动物模型是研究合适的障碍与分泌不足所致H幽门感染。我们的研究将有助于阐明机制体引起的胃炎H幽门感染抑制胃酸分泌,目前被认为是胃癌的发展密切相关。13

      确认

      这项研究是支持的科学研究的拨款援助从教育部、科学、体育、文化、日本。抽象的研究报告在AGA的年度会议上,圣地亚哥,加利福尼亚州,美国,2000年5月。我们感谢Fumihiro Hirayama技术建议。

      略语

      IL-1β
      白介素- 1β
      rhIL-1ra
      重组人il - 1受体拮抗剂
      CFU
      集落形成单位
      聚合酶链反应
      聚合酶链反应

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