你在这里gydF4y2Ba

条文本gydF4y2Ba

菜单条gydF4y2Ba
幽门螺杆菌gydF4y2Ba
人类β-defensin 2 (hBD-2)的表达式gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba诱发胃炎:hBD-2对抗菌效果gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba
  1. Y HamanakagydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  2. M中岛美嘉gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  3. 一个和田gydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  4. 米伊藤gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BaggydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  5. H KurazonogydF4y2BaegydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  6. 北条HgydF4y2BafgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  7. Y NakaharagydF4y2BafgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  8. 年代KohnogydF4y2BacgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  9. T HirayamagydF4y2BadgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  10. 我关根身上gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2BabgydF4y2Ba
  1. 一个gydF4y2Ba分子病理学系,长崎大学医学院长崎,日本,gydF4y2BabgydF4y2Ba组织和组织病理学部分,分工科学数据注册表,原子弹疾病研究所,长崎大学医学院长崎,日本,gydF4y2BacgydF4y2Ba第二个内科,长崎大学医学院长崎,日本,gydF4y2BadgydF4y2Ba细菌学、长崎大学热带医学研究所长崎,日本,gydF4y2BaegydF4y2Ba医疗技术、健康科学学院、日本冈山大学、日本冈山,日本,gydF4y2BafgydF4y2Ba化学工业、东海大学,东海,日本,gydF4y2BaggydF4y2Ba病理学系、国家长崎医疗中心、日本长崎gydF4y2Ba
  1. M中岛美嘉博士,组织和组织病理学部分,分工科学数据注册表,原子弹疾病研究所,长崎大学医学院1-12-4坂本,日本长崎852 - 8523。gydF4y2Bamoemoe在{}net.nagasaki-u.ac.jpgydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

背景gydF4y2Ba人类β-defensin 2 (hBD-2)扮演了一个角色在粘膜表面的先天防御系统。殖民的gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba在胃里是一个重要的胃肠道疾病的病理因素,包括胃炎、消化性溃疡、胃腺癌。gydF4y2Ba

的目标是gydF4y2Ba评估hBD-2的抗菌作用gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在胃粘膜感染。gydF4y2Ba

主题gydF4y2Ba活检胃粘膜标本gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba积极的(n = 6)gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba- (n = 6)人使用。gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba是由脲酶活性和显微镜检查的存在。gydF4y2Ba

方法gydF4y2BahBD-2表达式的标本进行逆转录-聚合酶链反应(rt - pcr)、免疫组织化学和原位杂交。hBD-2的抗菌效果gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba评估了集落形成单位的数量gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba孵化后0,10gydF4y2Ba−9gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−8gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−6gydF4y2Ba,或10gydF4y2Ba−5gydF4y2BaM hBD-2肽。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba所有六个gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba阳性标本表达高水平的hBD-2 mRNA hBD-2信使rna中没有检测到gydF4y2BaH幽门gydF4y2Bart - pcr阴性标本。免疫组织化学使用anti-hBD-2抗血清显示hBD-2表面上皮的表达gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba被感染的标本。在胃标本后获得的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba根除,hBD-2免疫反应性显著下降。原位杂交证实hBD-2成绩单是本地化的上皮细胞gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染胃标本。孵化培养hBD-2降低增长率gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba以剂量依赖的方式,孵化10gydF4y2Ba−5gydF4y2BaM hBD-2完全抑制的扩散gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

结论gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在人类胃上皮细胞感染诱发hBD-2表达式。hBD-2抑制的增长gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在体外,这表明hBD-2具有抗菌作用gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba诱发胃炎。gydF4y2Ba

  • 人类β-defensin 2gydF4y2Ba
  • 幽门螺杆菌gydF4y2Ba
  • 胃炎gydF4y2Ba
  • 抗菌肽gydF4y2Ba

http://dx.doi.org/10.1136/gut.49.4.481gydF4y2Ba

来自Altmetric.com的统计gydF4y2Ba

    请求的权限gydF4y2Ba

    如果你想重用任何或所有本文的请使用下面的链接,这将带你到版权税计算中心的RightsLink服务。你将能够获得快速的价格和即时允许重用内容在许多不同的方式。gydF4y2Ba

    感染革兰氏阴性,螺旋形细菌gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba已被确认为慢性窦的胃炎和十二指肠溃疡的主要原因。gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba殖民的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在胃里建立的中和酸性环境产生的氨脲酶尿素存在于粘膜分泌物。gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba尽管大多数gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染是无症状的,gydF4y2BaH幽门gydF4y2BaI型,它生活的胃粘膜超过50%的世界人口,与严重的胃炎症状相关。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba另一方面,它最近建议gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在感染的有利影响航空公司那些暴露于高水平的其他胃肠道病原体因为吗gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染者有显著更高比例的总IgA分泌细胞腔比未受感染的科目。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba

    在大多数情况下,gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染与强大的系统性抗体反应以及粘膜抗体反应。gydF4y2Ba7gydF4y2Ba对微生物宿主防御反应主要取决于行为通过中性粒细胞和淋巴细胞的免疫系统。最近,注意力都集中在抗菌肽作为先天免疫系统的一个组件对微生物。Defensins占主要的抗菌肽家族中发现的哺乳动物,和可以分为两类,α-defensinsβ-defensins,根据其结构特点在基因和蛋白质水平。gydF4y2Ba8gydF4y2Ba一些α-defensins存储在吞噬白细胞的嗜苯胺蓝的颗粒,同时其他α-defensins既定的小肠上皮细胞的表达。gydF4y2Ba9gydF4y2Ba两种类型的人类β-defensins最近被确定。人类β-defensin 1 (hBD-1)被孤立为跟踪肽血滤液gydF4y2Ba10gydF4y2Ba并由表达观察各种上皮组织。gydF4y2Ba11 - 13gydF4y2Ba人类β-defensin 2 (hBD-2)是一种半胱氨酸丰富、低分子量抗菌肽,原本孤立的从1997年的银屑病皮肤。gydF4y2Ba14gydF4y2Ba基底hBD-2 mRNA表达已经检测到的皮肤、肺、气管、尿道,眼睛通过逆转录-聚合酶链反应(rt - pcr)。gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba促炎的感应,hBD-2表达强烈调节上皮细胞的呼吸道和皮肤。gydF4y2Ba15 - 17日gydF4y2Ba因此hBD-2是第一个人类β-defensin的表达式被发现在转录水平调节反应接触微生物gydF4y2Ba14gydF4y2Ba它扮演着一个重要的角色在宿主防御主要是革兰氏阴性细菌和真菌在粘膜表面。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba然而,其在胃肠道上皮细胞的表达,特别是胃,尚未完全阐明。gydF4y2Ba

    我们最近表明,诱导hBD-2成绩单的表达式gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在一个人类胃癌细胞系。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba在目前的研究中,了解的先天免疫反应gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba,我们调查hBD-2表达在人类胃粘膜标本有或没有gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba殖民的rt - pcr、免疫组织化学和原位杂交。最后,hBD-2的抗菌效果gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba被评估的集落形成单位(CFU)gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba孵化后合成hBD-2肽在体外。gydF4y2Ba

    材料和方法gydF4y2Ba

    RNA制备和rt - pcrgydF4y2Ba

    人体胃组织活检获得的标本来自12个病人gastroscopic考试。知情同意是获得活检之前所有的病人。病人的特点列于表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。没有一个病人已经接受任何非甾体抗炎药(非甾体抗炎药)或酸抑制剂至少前一年。根据悉尼胃炎活动分类系统。gydF4y2Ba19gydF4y2Ba的存在gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba每个标本是由殖民脲酶活动的存在,所检测到的PyloriTek测试(Serim研究公司,印第安纳州的埃尔德哈特,美国)也通过显微镜检查May-Giemsa染色标本。rt - pcr对hBD-2进行全部12个标本。从组织总RNA提取等基因(日本基因、东京、日本)根据修改guanidine-phenol方法,gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba通过测量吸光度在260 nm和量化。互补脱氧核糖核酸是总RNA的合成从2μg 2.5μM的低聚糖(dT)底漆,每个三磷酸deoxynucleotide 1毫米,逆转录酶(生命技术公司,罗克维尔市,马里兰州,美国)。互补脱氧核糖核酸被用于每个样品和引物PCR扩增的hBD-2 (5′-ATGAGGGTCTTGTATCTCCT-3′(感觉),5′-TATCTTTGGACACCATAGTT-3′(反义))或人工β-actin (5′-TCCTCCCTGGAGAAGACTA-3′(感觉),5′-AGTACTTGCGCTCAGGAGGA-3′(反义))作为控制。两个基因的引物对选择放大,跨越内含子的一个区域各自的基因。hBD-2和β-actin引物预测放大296和313个基点的DNA片段,分别。PCR反应混合物包含10毫米三羟甲基氨基甲烷HCl液pH值(8.3),50 mM氯化钾,MgCl 2毫米gydF4y2Ba2gydF4y2Ba1毫米三磷酸deoxynucleotide 50 pmol每个引物,和2.5 U Taq DNA聚合酶(生命技术公司)在最后一卷50μl。混合物被覆盖上了一层矿物油,防止蒸发。一分钟的PCR条件40周期在94°C,在55°C两分钟,两分钟在72°C。PCR产品呈现在一个溴化乙锭染色1.5%琼脂糖凝胶。一个样本被认为是阳性hBD-2β-actin mRNA如果一个乐队在296个基点或313个基点,分别是可见的。gydF4y2Ba

    把这个表:gydF4y2Ba
    表1gydF4y2Ba

    病人的特点gydF4y2Ba

    hBD-2肽的合成gydF4y2Ba

    hBD-2肽是采用固相法合成。gydF4y2Ba21gydF4y2Ba从9-fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) -Pro-HMP树脂、肽链的延长使用FastMocTM Fmoc策略在应用生物系统公司433型肽合成器(美国加州福斯特城PerSeptive生物系统公司,)根据协议单一耦合。gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba23gydF4y2Ba保护肽获得治疗试剂K树脂在室温下了两个小时。原油肽受到二硫化物键形成反应根据先前所描述的方法。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba原油hBD-2加载在高效液相色谱柱(Cosmosil 5 c18ar 20×250毫米;MetaChem Technologies Inc。美国加州托兰斯)使用含有0.1%的水乙腈洗脱液组织。筛选了高峰在相同保留时间作为标准hBD-2(肽研究所,日本大阪),并收集和lyophilised给纯化hBD-2。纯度进行基质辅助激光解吸ionisation-time飞行质谱(PerSeptive生物系统公司)和氨基酸分析。gydF4y2Ba

    ANTI-hBD-2抗体的制备gydF4y2Ba

    合成hBD-2肽被耦合到锁眼坚守岗位的血蓝蛋白。gydF4y2Ba24gydF4y2Ba兔子与抗原接种皮下注射。滴定anti-hBD-2抗体进行了根据Ouchterlony双层琼脂扩散试验。gydF4y2Ba25gydF4y2Ba从抗血清抗体纯化的蹩脚合成肽亲和色谱法。gydF4y2Ba26gydF4y2Ba纯化合成肽(1.0毫克)耦合到列挤满了2-fluoro-1-methylpyridinium toluene-4-sulphonate (FMP) -cellurofine (Seikagaku Kougyo有限公司东京,日本)。与三羟甲基氨基甲烷缓冲液洗柱后盐水(TBS),在一个适当的抗血清体积(10毫升)添加到肽共轭FMP-cellurofine列和孵化一小时在室温下。洗后列TBS补充1% Triton x - 100抗体筛选了0.1甘氨酸HCl, pH值2.5,收集在一个包含0.05体积的1米三羟甲基氨基甲烷溶液液管。筛选了分数与磷酸缓冲盐透析(PBS)和用作anti-hBD-2抗体在免疫组织化学分析。hBD-2特定抗体没有交叉反应hBD-1当测试对重组肽免疫印迹。gydF4y2Ba

    免疫组织化学gydF4y2Ba

    演示hBD-2的分布在胃组织中表达,免疫组织化学分析进行10%的缓冲,福尔马林固定,石蜡包埋标本的胃标本12例上面所描述的那样,使用ABC-Peroxidase工具包(向量实验室,Inc .,伯林盖姆,加利福尼亚,美国)。三个病人gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba积极的胃炎(案号7、8和9表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)使用抗生素治疗(20毫克/天雷,钠克拉霉素600毫克/天,和1500毫克/天阿莫西林)5天口周围的根除gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba,然后re-biopsied完成治疗后28天。的存在gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba抗生素治疗后评估通过显微镜检查和脲酶试验。免疫组织化学分析样品切成4μm部分,在PBS deparaffinised二甲苯,水化。deparaffinised部分浸在0.3%过氧化氢在甲醇阻止内部过氧化物酶,preincubated正常1%牛血清,以防止非特异性结合,然后孵化一夜之间在4°C 100倍稀释anti-hBD-2抗体。在PBS洗涤后,幻灯片与生物素化的孵化30分钟anti-mouse免疫球蛋白,然后与过氧化物酶共轭卵白素。反应产品使用diaminobenzidine解决。标本与苏木精复染色。消极的控制被取代的主要准备在每种情况下与non-immunised兔血清抗体,并没有显示任何染色(数据没有显示)。gydF4y2Ba

    原位杂交gydF4y2Ba

    活检,4%多聚甲醛固定,冷冻样本切割μm 10点。Digoxigenin贴上hBD-2 RNA探针是由subcloning全长hBD-2 cDNA pBluescript KS的SmaI网站(+)(Promega,麦迪逊,威斯康辛州,美国),和合成矢量riboprobe被用作模板。开放阅读框的身份与hBD-1 hBD-2 cDNA显示39%。使用生成的反义探测器EcoRI消化使直线化模板和T7 RNA聚合酶。同样,探测器是准备使用BamHI负控制实验和T3 RNA聚合酶消化模板。gydF4y2Ba

    固定部分被放置在10μg /毫升消化蛋白酶K在TE (pH值8.0)37°C 30分钟,其次是postfixation在4%多聚甲醛。幻灯片在0.2 N盐酸浸泡10分钟,随后被乙酰化10分钟刚做好的0.25%乙酸酐0.1三乙醇胺(pH值8.0)。在4×标准prehybridisation柠檬酸钠(SSC) / 50% deionised甲酰胺一小时在37°C,幻灯片是杂交的解决方案200 ng / ml反义deionised甲酰胺或探针在50%,10毫米三羟甲基氨基甲烷HCl液pH值(7.6),1毫米EDTA (pH值8.0),300毫米氯化钠,0.25%钠十二烷基硫酸盐,1×Denhardt的解决方案,10%的硫酸葡聚糖,200μm /毫升酵母tRNA 16小时的42°C。杂交后,标本在2×SSC冲洗30分钟37°C和消化与20μg /毫升RNaseA 37°C 30分钟。洗后用1×SSC在37°C一小时和两次0.1×SSC 37°C 30分钟,部分受到免疫组织化学分析检测杂交的探针使用碱性磷酸酶共轭antidigoxigenin抗体(勃林格曼海姆,印第安纳波利斯,印第安纳州,美国)。碱性磷酸酶反应与5-bromo-4-chloro-3-indolyl磷酸盐和氮蓝四唑氯形象化。gydF4y2Ba

    抗菌试验gydF4y2Ba

    毒素产生的应变gydF4y2BaH幽门gydF4y2BaATCC49503(托克斯gydF4y2Ba+gydF4y2Ba菌株60190),是本试验中使用。gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba被播种从冻结的股票在血琼脂板(穆勒辛顿二世与7%马血液琼脂)在37°C三天在微量需氧的条件下(10%啊gydF4y2Ba2gydF4y2Ba和10%的公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)生成Anaeropack Campylo(日本东京三菱瓦斯化学公司)。细菌收获使用棉签从盘子是悬浮在200毫升含10%胎牛血清的脑心浸液肉汤,然后生长在液体培养在37°C三天与剧烈的震动控制微量需氧的气氛。包含2.4×10的混合物gydF4y2Ba4gydF4y2BaCFU的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba和合成hBD-2肽的浓度0,10gydF4y2Ba−9gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−8gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−6gydF4y2Ba,或10gydF4y2Ba−5gydF4y2Ba100年μl 10毫米的磷酸盐缓冲剂(pH值7.4)与50 mM氯化钠在37°C孵化20分钟。的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba从每个细胞制备镀在血琼脂板和孵化37°C微量需氧的条件下三天。菌落的数量统计。这种抗菌试验低渗(hypo-osmolal)条件下执行,因为hBD-2高度盐敏感的抗菌功能,几乎完全被超过150毫米的氯化钠。gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba

    结果gydF4y2Ba

    rt - pcrgydF4y2Ba

    评估的影响gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba殖民在胃组织hBD-2 mRNA表达,胃标本6gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba积极和六gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba消极的病人,由尿素酶试验和金相试验,用于rt - pcr分析。发现高水平的hBD-2 mRNA在所有6gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba阳性病例虽然没有可见的乐队hBD-2 mRNA的6个gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba消极的情况下(图gydF4y2Ba1gydF4y2BaA)。另一方面,β-actin信使rna表达水平与积极控制12个样本中,检测出。gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba成功根除号7,8,9,抗生素治疗根据尿素酶试验和微观检查。后gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba根除,但是hBD-2成绩单已经下降到无法检测到的水平通过rt - pcr(无花果gydF4y2Ba1gydF4y2BaB)。gydF4y2Ba

    Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis of human β-defensin 2 (hBD-2) expression in gastric mucosa specimens. (A) Lanes 1–12 correspond to gastric specimens obtained from cases 1–12, respectively, in table 1. Cases 1–6 were not infected with Helicobacter pylori and cases 7–12 were infected with H pylori. (B) Expression of hBD-2 mRNA in gastric mucosa specimens obtained from cases 7–9 before and after H pylori eradication. Cases 7–9 in table 1 were applicable in this experiment. +, before H pylori eradication; −, after H pylori eradication; M, 100 bp DNA ladder as a marker.
    " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图1gydF4y2Ba
    图1gydF4y2Ba

    逆转录-聚合酶链反应(rt - pcr)分析人类β-defensin 2 (hBD-2)表达在胃粘膜标本。(A)车道1 - 12对应于胃标本从1 - 12,分别在表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。例1 - 6没有感染幽门螺杆菌和例7 - 12 H螺杆菌感染。(B) hBD-2 mRNA的表达在胃粘膜标本获得情况下前后7 - 9 H根除幽门。例7 - 9表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba这个实验是适用的。+、H根除幽门前;−H根除幽门后;米,100个基点DNA梯作为标记。gydF4y2Ba

    免疫组织化学gydF4y2Ba

    我们进行免疫染色hBD-2新开发的多克隆抗体。hBD-2表达式的胃标本中检测出6个gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba积极的病人而不是6个标本gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba消极的病人(图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。在gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba积极的胃粘膜标本,hBD-2免疫反应性仅限于表面上皮和胃小凹,固有层中没有检测到,炎症细胞或其他胃腺体。用抗生素治疗后胃粘膜标本获得根除gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba(n = 3)也被检查。gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba没有在胃粘膜标本中发现了抗生素治疗后,脲酶试验和微观检查。hBD-2免疫反应性显著下降的抗生素治疗后胃粘膜标本获得(无花果gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

    Immunohistochemical analysis of human β-defensin 2 (hBD-2) expression in gastric mucosa specimens with (case 9) (A) or without (case 3) (B) Helicobacter pylori colonisation. Both (A) and (B) have the same magnification. The scale bar in (A) represents 200 μm. (C) May-Giemsa stained section adjacent to (D) and demonstrating colonisation of H pylori at the mucosal surface (case 9). (D) Immunoreactivity for hBD-2 in gastric epithelium at a high magnification can be seen. The scale bar in (C) represents 800 μm.
    " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图2gydF4y2Ba
    图2gydF4y2Ba

    免疫组织化学分析人类β-defensin 2 (hBD-2)表达与胃粘膜标本(例9)(A)或没有(例3)(B)幽门螺杆菌殖民。(A)和(B)有相同的放大。酒吧在200年(一)代表μm规模。(C) May-Giemsa彩色部分毗邻(D)和展示殖民化的H幽门粘膜表面(例9)。(D)免疫反应性的hBD-2胃上皮细胞在高放大倍数可以看出。酒吧在800 (C)代表μm规模。gydF4y2Ba

    Immunohistochemical analysis of human β-defensin 2 (hBD-2) expression in gastric mucosa specimens obtained before (A) and after (B) Helicobacter pylori eradication in case No 7. (A) and (B) have the same magnification. The scale bar in (A) represents 200 μm.
    " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图3gydF4y2Ba
    图3gydF4y2Ba

    免疫组织化学分析人类β-defensin 2 (hBD-2)表达在胃粘膜标本获得(A)和(B)根除幽门螺杆菌后如果没有7。(A)和(B)有相同的放大。酒吧在200年(一)代表μm规模。gydF4y2Ba

    原位杂交gydF4y2Ba

    确认本地化的hBD-2表达式gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染胃粘膜在转录水平上,我们进行了原位杂交与hBD-2 riboprobes在胃粘膜的冰冻切片标本案例1和2gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba消极组和病例11和12gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba积极的组织。使用hBD-2反义探头,一个积极的信号hBD-2 mRNA的胃粘膜表面上皮细胞中检测标本的获得gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba阳性病例。没有明显的信号样本使用的探针作为控制研究(无花果gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。作为另一个控制实验,RNaseA治疗胃粘膜标本gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染者完全废除了积极信号hBD-2 mRNA(数据没有显示)。gydF4y2Ba

    In situ hybridisation of human β-defensin 2 (hBD-2) mRNA in Helicobacter pylori infected gastric mucosa specimens. (A) A hybridisation signal with the hBD-2 antisense probe was predominantly observed in the surface epithelium and pits, and also in the inflammatory cells scattered in the interstitium (case 12). The full length hBD-2 antisense probe may cross react with hBD-1 as a leucocytic defensin because the open frame of hBD-2 cDNA shows 39% identity with hBD-1.34 (B) No signals were detected on hybridisation with the hBD-2 sense probe as a negative control (case 12). (A) and (B) have the same magnification. The scale bar in (A) represents 100 μm.
    " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图4gydF4y2Ba
    图4gydF4y2Ba

    原位杂交的人类β-defensin 2 (hBD-2) mRNA在幽门螺杆菌感染胃粘膜标本。(A)的杂交信号hBD-2反义探针在表面上皮和坑主要是观察到,并在炎症细胞分散在间质(例12)。完整的长度hBD-2反义探针可能交叉与hBD-1反应leucocytic defensin因为hBD-2 cDNA显示,39%的开放式与hBD-1身份。gydF4y2Ba34gydF4y2Ba(B)没有检测到信号与hBD-2意义上的探针杂交是一种消极控制(12例)。(A)和(B)有相同的放大。酒吧在100年(一)代表μm规模。gydF4y2Ba

    抗菌试验gydF4y2Ba

    确定hBD-2有抗菌作用gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba,gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在含有不同浓度的解决方案孵化合成hBD-2肽20分钟,然后镀了三天。菌落的数量gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba是统计。图中所示gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,在gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba已经使用更高浓度的合成hBD-2,菌落的数量减少以剂量依赖的方式。菌落的数量gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在预孵化hBD-2在浓度为0,10gydF4y2Ba−9gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−8gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba,10gydF4y2Ba−6gydF4y2Ba,或10gydF4y2Ba−5gydF4y2Ba是3567(1129),2933(88),3300(265),1567(33),433(167),分别和0 (0)。这样的增长率gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba被压制了50%和10个预培养吗gydF4y2Ba−7gydF4y2Ba米(0.3μg /毫升)hBD-2肽,并被完全抑制在预培养10gydF4y2Ba−5gydF4y2Ba米(30μg /毫升)hBD-2肽。gydF4y2Ba

    Antimicrobial effect of synthetic human β-defensin 2 (hBD-2) peptides on Helicobacter pylori colony formation in an in vitro assay. Each bar represents mean (SEM). CFU, colony forming units.
    " data-icon-position="" data-hide-link-title="0">图5gydF4y2Ba
    图5gydF4y2Ba

    抗菌效果的合成人类β-defensin 2 (hBD-2)在幽门螺旋杆菌肽在体外集落形成试验。每个栏代表的意思(SEM)。菌落,菌落。gydF4y2Ba

    讨论gydF4y2Ba

    虽然低水平的hBD-2 mRNA存在于健康的上皮细胞,其表达式是极大地调节炎症刺激。gydF4y2Ba14gydF4y2Ba目前的研究显示,患者的胃组织gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba胃炎中也是hBD-2感染。所有六个胃标本gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba阳性病例中hBD-2 mRNA, rt - pcr进行评估,而从6gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba负面案例显示,只有微弱的hBD-2表达式,说明gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba殖民诱发胃粘膜hBD-2表达式。在最近的报告中,我们证明了cag致病性岛(PAI)gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba是重要的诱导hBD-2 mRNA表达的MKN45胃癌细胞系。gydF4y2Ba18gydF4y2BahBD-2基因的5′侧翼区域包含共识绑定序列核转录因子κB (NFκB)。gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba因为cag PAI是必不可少的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba介导白介素8 (IL)gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba和细胞间粘附分子1gydF4y2Ba32gydF4y2BaNFκB分泌,这些需要激活,gydF4y2Ba33gydF4y2Ba,gydF4y2Ba34gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba信使rna介导hBD-2感应NFκB还应该包括直接或间接激活。还需要进一步的研究来评估这一假设。gydF4y2Ba

    hBD-2人类上皮细胞是专门生产的gydF4y2Ba14gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba但不是成纤维细胞,gydF4y2Ba16gydF4y2BahBD-2的存在可能有抗菌作用器官表面,持续不断地暴露在各种各样的微生物。通过hBD-2防御机制是完全独立于白细胞相关免疫防御机制。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba免疫组织化学显示hBD-2是局部的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染胃表面上皮、胃小凹而不是其他胃腺体,炎症细胞,也没有在固有层。hBD-2是胃上皮细胞中表达gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba证实了殖民原位杂交在转录水平。这些发现表明,接触gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba在胃表面上皮移植hBD-2表达式。我们最近证明hBD-2 mRNA MKN45细胞中诱导表达后孵化gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba虽然hBD-2表达式不是细胞暴露于培养基中发现后过滤掉gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba有趣的是,hBD-2免疫反应性显著下降在胃粘膜标本获得完成抗生素治疗后28天。此外,hBD-2成绩单的水平gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba根除胃粘膜标本不易检出的水平降低了rt - pcr。这些发现支持直接接触的重要性gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba诱导hBD-2表面上皮的表达宿主组织。此外,它建立了促炎细胞因子,如肿瘤坏死因子α和IL-1β已知参与gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba诱发胃炎、gydF4y2Ba35gydF4y2Ba已经发现移植hBD-2 mRNA表达以剂量依赖的方式。gydF4y2Ba36gydF4y2Ba因此hBD-2可能是诱导抗菌因子由胃粘膜接触到gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba或者通过内生释放促炎细胞因子。gydF4y2Ba

    的存在hBD-2抒发宿主器官表面抗菌活性。gydF4y2Ba14gydF4y2Ba评估的影响胃hBD-2的增长gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba,我们执行一个与合成hBD-2体外抗菌试验。众所周知,hBD-2活动高度盐敏感。的确,hBD-2抑制增长的能力gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba8倍减少盐浓度时从20增加到150毫米。gydF4y2Ba28gydF4y2Ba因此,本试验进行了低渗的环境下包含50 mM氯化钠。在我们的实验中,培养的增长率gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba减少合成hBD-2预处理以剂量依赖的方式,和增长是完全抑制在预培养10gydF4y2Ba−5gydF4y2Ba合成hBD-2米(30μg /毫升)。据报道,对自然hBD-2 LD90值的准备gydF4y2Ba大肠杆菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba,gydF4y2Ba白色念珠菌gydF4y2Ba10、10和25μg / ml,分别。gydF4y2Ba16gydF4y2Ba因此hBD-2似乎抗菌活性gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba以及其他革兰氏阴性细菌和真菌,表明亏损hBD-2诱导胃可能会加剧gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba诱发胃炎。虽然殖民统治人类的胃gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba胃肠道疾病的诱发因素,gydF4y2Ba37gydF4y2Ba它最近被证明gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba可能会产生有益的影响感染携带者大量接触其他胃肠道病原体。gydF4y2Ba38gydF4y2Ba胃hBD-2引起的gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染还可能从其他病原体在保护中发挥作用。gydF4y2Ba

    总之,我们证明了过度的hBD-2 mRNA在所有的活检胃粘膜标本gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba殖民。免疫组织化学和原位杂交显示gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba感染胃粘膜标本,hBD-2专门表达胃表面上皮和坑。对合成hBD-2肽显示抗菌效果gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba体外。由于高水平的hBD-2表达严重活跃胃炎患者的胃粘膜,hBD-2可能参与的病理生理学gydF4y2BaH幽门gydF4y2Ba诱发胃炎。gydF4y2Ba

    确认gydF4y2Ba

    作者感谢Kawata先生他的技术援助在准备数据。gydF4y2Ba

    引用gydF4y2Ba

    1. ↵gydF4y2Ba
      1. 巴索gydF4y2Ba乔丹gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1992年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba假设在发病机制和自然的历史gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba全身的炎症。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba102年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba720年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba727年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    2. ↵gydF4y2Ba
      1. 马歇尔gydF4y2BaBJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 沃伦gydF4y2Ba小gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1984年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba身份不明的弯曲杆菌在胃炎和消化性溃疡患者的胃。gydF4y2Ba《柳叶刀》gydF4y2Ba1gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1311年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1315年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    3. ↵gydF4y2Ba
      1. 邓恩gydF4y2Ba是gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 坎贝尔gydF4y2Ba全科医生gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. Perez-PerezgydF4y2Ba胃肠道gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1990年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba脲酶的纯化和表征gydF4y2Ba幽门螺杆菌。gydF4y2BaJ临床生物化学gydF4y2Ba265年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba9464年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba9469年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    4. ↵gydF4y2Ba
      1. 伊顿gydF4y2Ba卡gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 布鲁克斯gydF4y2BaCLgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 摩根gydF4y2Ba博士gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1991年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba脲酶的重要作用引起的胃炎的发病机理gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba在无菌的小猪。gydF4y2Ba感染ImmungydF4y2Ba59gydF4y2Ba:gydF4y2Ba2470年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba2475年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    5. ↵gydF4y2Ba
      1. 经营着gydF4y2BaHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 和田gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. KurazonogydF4y2BaHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba)gydF4y2Babead-ELISA方法检测中的应用gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2BaVacA。gydF4y2Ba活细胞PathoggydF4y2Ba26gydF4y2Ba:gydF4y2Ba103年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba110年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
    6. ↵gydF4y2Ba
      1. 马特森gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. LonrothgydF4y2BaHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. Qiuding-JarbrinkgydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba诱导B细胞反应的胃gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba口服霍乱疫苗接种后来华的主题。gydF4y2Ba中国投资gydF4y2Ba102年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba51gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba56gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    7. ↵gydF4y2Ba
      1. 怀亚特gydF4y2Ba霁gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 拉斯伯恩gydF4y2BaBJgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1988年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba胃粘膜的免疫反应gydF4y2Ba弯曲杆菌幽门。gydF4y2BaScand杂志增刊gydF4y2Ba142年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba44gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba49gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba
    8. ↵gydF4y2Ba
      1. 钻石gydF4y2BaGgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 贝文gydF4y2BaCLgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2BaBeta-defensins:内源性抗生素的天生的宿主防御反应。gydF4y2Ba中国Immun ImmunopatholgydF4y2Ba88年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba221年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba225年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    9. ↵gydF4y2Ba
      1. 贝文gydF4y2BaCLgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. Martin-PortergydF4y2BaEgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 甘兹gydF4y2BaTgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba胃肠道的Defensins和天生的宿主防御。gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba45gydF4y2Ba:gydF4y2Ba911年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba915年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    10. ↵gydF4y2Ba
      1. BenschgydF4y2Ba电子战gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 瑞达gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. MagertgydF4y2Ba沪江gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba从人血浆beta-defensin hBD-1:小说。gydF4y2Ba2月列托人gydF4y2Ba368年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba331年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba335年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
    11. ↵gydF4y2Ba
      1. ValoregydF4y2Ba电动汽车gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 公园gydF4y2BaCHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 奎尔gydF4y2BaAJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba人类beta-defensin-1:泌尿生殖组织的抗菌肽。gydF4y2Ba中国投资gydF4y2Ba101年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1633年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1642年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    12. ↵gydF4y2Ba
      1. SchnappgydF4y2BaDgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 里德gydF4y2BaCJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 哈里斯gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba本地化的表达人类beta-defensin-1胰腺和肾脏。gydF4y2Ba中草药gydF4y2Ba186年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba99年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba103年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
    13. ↵gydF4y2Ba
      1. 塔沃gydF4y2Ba美联社gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 克拉克gydF4y2BaDPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 钻石gydF4y2BaGgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba肠beta-defensin:分子克隆和表征与诱导肠上皮细胞基因表达的小球隐孢子虫的感染。gydF4y2Ba感染ImmungydF4y2Ba66年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1045年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1056年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    14. ↵gydF4y2Ba
      1. 困难gydF4y2BaJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 巴特斯gydF4y2BaJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 克里斯多夫gydF4y2BaEgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba肽抗生素从人体皮肤。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba387年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba861年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    15. ↵gydF4y2Ba
      1. 麦克纳马拉gydF4y2BaNAgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 范gydF4y2BaRgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. TuchingydF4y2Ba操作系统gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba眼表面epithellia表达人类beta-defensin-2 mRNA。gydF4y2BaExp眼睛ResgydF4y2Ba69年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba483年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba490年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    16. ↵gydF4y2Ba
      1. 施罗德gydF4y2BaJ-MgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 困难gydF4y2BaJgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba分子在人类beta-defensin-2焦点。gydF4y2BaInt J生物化学计算单元BgydF4y2Ba31日gydF4y2Ba:gydF4y2Ba645年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba651年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    17. ↵gydF4y2Ba
      1. 冢gydF4y2BaTgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. (靠gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 日期gydF4y2BaYgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba识别人类beta-defensin-2呼吸道细菌性肺炎和等离子体及其增加。gydF4y2Ba物化学Biophys Res CommungydF4y2Ba249年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba943年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba947年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    18. ↵gydF4y2Ba
      1. 和田gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 森gydF4y2BaNgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. OishigydF4y2BaKgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba感应人类beta-defensin-2 mRNA的表达gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba在人类胃细胞系MKN45细胞cag致病性岛。gydF4y2Ba物化学Biophys Res CommungydF4y2Ba263年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba770年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba774年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    19. ↵gydF4y2Ba
      1. 迪克森gydF4y2Ba曼氏金融gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. GentagydF4y2BaRMgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 亚德利gydF4y2BaJHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba胃炎的分类和分级。悉尼更新系统。国际研讨会的组织病理学胃炎、1994年休斯顿。gydF4y2Ba我中华病理学杂志gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1161年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1181年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    20. ↵gydF4y2Ba
      1. ChomczynskigydF4y2BaPgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 萨基gydF4y2BaNgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1987年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba单步方法的RNA隔离酸胍盐thiocyanate-phenol-chloroform提取。gydF4y2Ba学生物化学肛门gydF4y2Ba162年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba156年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba159年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    21. ↵gydF4y2Ba
      1. AinpourgydF4y2Ba公关gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. WickstromgydF4y2BaEgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1980年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba修改为获得均匀oligoprolines固相多肽合成的高收益。gydF4y2BaInt J Pept蛋白质ResgydF4y2Ba15gydF4y2Ba:gydF4y2Ba225年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba235年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
    22. ↵gydF4y2Ba
      1. 球gydF4y2Ba霍奇金淋巴瘤gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. MascagnigydF4y2BaPgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba化学合成和纯化的蛋白质:一个方法。gydF4y2BaInt J Pept蛋白质ResgydF4y2Ba48gydF4y2Ba:gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba47gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
    23. ↵gydF4y2Ba
      1. 王gydF4y2BaDSgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 字段gydF4y2BaCGgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 字段gydF4y2BaGBgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1990年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba解理方法最大限度地减少副反应Fmoc后固相肽合成。gydF4y2BaInt J Pept蛋白质ResgydF4y2Ba36gydF4y2Ba:gydF4y2Ba255年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba266年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    24. ↵gydF4y2Ba
      1. 刘gydF4y2Ba英国《金融时报》gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. Zinnecker说gydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 滨冈gydF4y2BaTgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1979年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba新程序的制备和隔离配合蛋白质和分子合成的共聚物酸和免疫化学描述这样的配合。gydF4y2Ba生物化学gydF4y2Ba18gydF4y2Ba:gydF4y2Ba690年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba693年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
    25. ↵gydF4y2Ba
      1. OuchterlonygydF4y2BaOgydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1949年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba抗原抗体反应凝胶。gydF4y2BaActa分册Microbiol ScandgydF4y2Ba26gydF4y2Ba:gydF4y2Ba507年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba515年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    26. ↵gydF4y2Ba
      1. Imajoh-OhmigydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. TokitagydF4y2BaKgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 落gydF4y2BaHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1992年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba拓扑结构的细胞色素gydF4y2BabgydF4y2Ba558年的嗜中性粒细胞膜分析anti-peptide抗体和蛋白水解作用。gydF4y2BaJ临床生物化学gydF4y2Ba267年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba180年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba184年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    27. ↵gydF4y2Ba
      1. 辛格gydF4y2BaPKgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 贾gydF4y2Ba惠普gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 怀尔斯gydF4y2BaKgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba生产的beta-defensins人体气道上皮细胞。gydF4y2Ba《美国国家科学院刊gydF4y2Ba95年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba14961年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba14966年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    28. ↵gydF4y2Ba
      1. 巴尔斯gydF4y2BaRgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 王gydF4y2BaXgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 吴gydF4y2BaZgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba表达人类beta-defensin 2是食盐过敏肽抗生素在人类的肺。gydF4y2Ba中国投资gydF4y2Ba102年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba874年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba880年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    29. ↵gydF4y2Ba
      1. 刘gydF4y2BalgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 王gydF4y2BalgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 贾gydF4y2Ba惠普gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba结构和映射人类beta-defensin HBD-2位点的基因及其表达的炎症。gydF4y2Ba基因gydF4y2Ba222年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba237年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba244年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    30. ↵gydF4y2Ba
      1. TummurugydF4y2BaMKRgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 沙玛gydF4y2BaSAgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 巴索gydF4y2Ba乔丹gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2BapicB,同系物的百日咳博德特氏菌毒素分泌蛋白质,需要诱导引发胃上皮细胞。gydF4y2Ba摩尔活gydF4y2Ba18gydF4y2Ba:gydF4y2Ba867年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba876年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    31. ↵gydF4y2Ba
      1. CensinigydF4y2Ba年代gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 兰格gydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 香gydF4y2BaZgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba)gydF4y2Bacag,致病性岛gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba、编码类型I-specific和疾病有关的毒性因子。gydF4y2Ba《美国国家科学院刊gydF4y2Ba93年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba14648年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba14653年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    32. ↵gydF4y2Ba
      1. 森gydF4y2BaNgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 和田gydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. HirayamagydF4y2BaTgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba激活的细胞间黏附分子1表达gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba受NF-kappaB在胃上皮癌细胞。gydF4y2Ba感染ImmungydF4y2Ba68年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1806年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1814年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    33. ↵gydF4y2Ba
      1. AiharagydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. TsuchimotogydF4y2BaDgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. TakizawagydF4y2BaHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba机制gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba全身interleukin-8生产胃癌细胞系,MKN45。gydF4y2Ba感染ImmungydF4y2Ba65年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba3218年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba3224年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    34. ↵gydF4y2Ba
      1. MunzenmainergydF4y2Ba一个gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. 兰格gydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 格洛克gydF4y2BaEgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba分泌/产品gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba激活转录因子核factor-kappa B。gydF4y2BaJ ImmunolgydF4y2Ba159年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba6140年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba6147年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba
    35. ↵gydF4y2Ba
      1. LindholmgydF4y2BaCgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. Quiding-JarbrinkgydF4y2Ba米gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. LonrothgydF4y2BaHgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba局部细胞因子反应在gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba来华的科目。gydF4y2Ba感染ImmungydF4y2Ba66年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba5964年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba5971年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    36. ↵gydF4y2Ba
      1. 困难gydF4y2BaJgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. Meyer-HoffertgydF4y2BaUgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 特朗红葡萄酒gydF4y2BaLMgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba黏液状的gydF4y2Ba铜绿假单胞菌gydF4y2Ba、TNF-αIL-1β,但不是il - 6,诱导人类β-defensin-2呼吸道上皮细胞。gydF4y2Ba我和细胞杂志gydF4y2Ba22gydF4y2Ba:gydF4y2Ba714年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba721年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
    37. ↵gydF4y2Ba
      1. 巴索gydF4y2Ba乔丹gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba幽门螺杆菌gydF4y2Ba和胃疾病。gydF4y2BaBMJgydF4y2Ba316年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1507年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba1510年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba 免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
    38. ↵gydF4y2Ba
      1. PutsepgydF4y2BaKgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      2. BrandengydF4y2Ba我gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      3. 鲍曼gydF4y2BaHGgydF4y2Ba,gydF4y2Ba
      4. et al。gydF4y2Ba
      (gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba)gydF4y2Ba抗菌肽的gydF4y2Ba幽门螺旋杆菌。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba398年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba671年gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba672年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba

    略语gydF4y2Ba

    hBD-2gydF4y2Ba
    人类β-defensin 2gydF4y2Ba
    rt - pcrgydF4y2Ba
    逆转录-聚合酶链反应gydF4y2Ba
    hBD-1gydF4y2Ba
    人类β-defensin lgydF4y2Ba
    非甾体抗炎药gydF4y2Ba
    非甾体抗炎药gydF4y2Ba
    FmocgydF4y2Ba
    fluorenylmethoxycarbonylgydF4y2Ba
    FMPgydF4y2Ba
    2-fluoro-1——methylpyridinium toluene-4-sulphonategydF4y2Ba
    TBSgydF4y2Ba
    三羟甲基氨基甲烷缓冲液盐gydF4y2Ba
    美国公共电视台gydF4y2Ba
    磷酸缓冲盐gydF4y2Ba
    SSCgydF4y2Ba
    标准的柠檬酸钠gydF4y2Ba
    CFUgydF4y2Ba
    集落形成单位gydF4y2Ba
    NFκBgydF4y2Ba
    核转录因子κBgydF4y2Ba
    伊尔gydF4y2Ba
    白介素gydF4y2Ba
    拜gydF4y2Ba
    致病性岛gydF4y2Ba