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文摘
遗传性胰腺炎(HP)通常是由突变引起阳离子胰蛋白酶原(PRSS1)基因,尤其是R122H或N29I。我们测序PRSS1基因渊源者的家庭没有这些常见的突变。小说R122C和N29T突变被发现与疾病独立的家庭隔离在一个常染色体显性遗传方式。R122C突变消除了精氨酸自我分解网站与R122H突变。N29T突变也可能提高胰腺内胰蛋白酶活动已被证明在体外。这些新的突变的识别需要特别注意常用的检测方法可能会失败。
- N29T突变
- R122C突变
- 胰腺炎
- 惠普、遗传性胰腺炎
- RFLP,限制片段长度多态性
- PCR,聚合酶链反应
来自Altmetric.com的统计
遗传性胰腺炎(HP)是一种常染色体显性遗传疾病外显率高的特点是反复发作的急性胰腺炎,慢性胰腺炎、胰腺癌的发病率和高。1,2大约60%的病例是由PRSS1, R122H, N29I突变。3,4其他PRSS1突变(A16V, D22G、K23R−deltcc 28日)是罕见的。我们在此报告两个新颖的突变PRSS1造成典型的惠普表型。
材料和方法
招聘、同意、咨询、DNA提取和外显子的特定序列进行如前所述。3,5每个惠普家族的渊源者(n = 209)是按顺序分析AflIII限制性内切核酸酶消化PRSS1外显子33如果消极,第2外显子测序,然后,如果负面,DNA测序的外显子1,3,4,5。
RFLP分析
一种新型密码子29限制性片段长度多态性(RFLP)分析使用Bst4CI新西伯利亚(SibEnzyme有限公司——117年,630117年,俄罗斯)。野生型聚合酶链反应(PCR)产品有三个识别网站Bst4CI,有四个消化产品415、160、151和79个基点。突变在131945位置造成的损失ACNGT识别网站这一突变等位基因有三个消化产品的415,230和151个基点。限制性内切核酸酶消化使用5μl PCR产品执行,3单位Bst4CI2、0.2μl的牛血清白蛋白和μlBst4CI缓冲区在20μl反应。消化在65°C进行了两个小时。10%的聚丙烯酰胺凝胶分离碎片。
结果
血统没有1
25岁的指数病人,症状从五岁,被诊断出患有胰腺炎在18岁(图1)。她的祖母(已故)34岁时被确诊为慢性胰腺炎和她的两个女儿之一胰腺炎岁五年。133282 C T转换突变位置(基因库加入U66061)导致R122C氨基酸替换。这种突变检测在父亲和症状的女儿而不是58 PRSS1 R122H / N29I突变负面的惠普患者、66例家族性特发性胰腺炎或130健康对照组。的AflIII消化未能发现小说R122C突变。
谱系表明胰腺炎的一种常染色体显性遗传模式。(一)家族血统R122C突变。箭头指向索引的情况。(B)家族血统N29T突变。箭头指向索引的情况。
血统2号
23岁的渊源者,他的父亲和祖父都有胰腺炎的症状(图1 b)。131945 A到C转换突变位置(基因库加入U66061)导致N29T氨基酸替换。这种突变出现在受影响的父亲而不是其他团体,如上所述。Bst4CI消化N29T突变检测。
讨论
两个新颖的突变改变了“热点”密码子29日和122年以前功能获得突变相关的一种常染色体显性遗传模式被发现。Sahin-Toth最近表示在密码子突变体在人类阳离子胰蛋白酶29(也就是说,N29I和N29T)和完成体外研究人类与野生型相比阳离子胰蛋白酶原。6体外,N29T突变明显增强自体活动也减少自我分解。6启动自我分解的R122网站是至关重要的人类,和任何氨基酸替换(R122H或R122C)将取消。最后,RFLP分析和相似的特定突变的筛查策略可能会因此错过重要的突变,显然使一些人易患胰腺炎。
确认
这项研究受到了以下资助:国家卫生研究院DK54709(起重集团),NIH AA10855(起重集团),弗吉尼亚州绩效评估(起重集团),匹兹堡大学基因组科学中心和大学的奖学金海德堡(右投手)。EUROPAC北WestCancer研究基金的支持,英国。提供的技术援助是劳拉Chensny木头和保罗。我们也要感谢的所有成员MMPSG EUROPAC。
本文提出了在消化疾病周,亚特兰大,乔治亚州,美国,2001年5月21日(胃肠病学2001;120年:A33)。