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条文本gydF4y2Ba

菜单条gydF4y2Ba
NeurogastroenterologygydF4y2Ba
结肠炎后发散毒蕈碱的改变和血清素激活的信号gydF4y2Ba
免费的gydF4y2Ba
  1. R W井gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
  2. mg BlennerhassettgydF4y2Ba
  1. 胃肠疾病研究中心,皇后大学,加拿大安大略省的金斯顿gydF4y2Ba
  1. 通信:gydF4y2Ba
    mg Blennerhassett教授gydF4y2Ba
    胃肠疾病研究中心,皇后大学,酒店上帝医院,166布鲁克圣,金斯顿安大略省K7L 5 g2,加拿大;gydF4y2Bamblenmeds.queensu.cagydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

背景:gydF4y2Ba发炎的能动性改变肠部分来自改变肠道平滑肌细胞的收缩性。而修改毒蕈碱的受体系统标识,更改5 -羟色胺(5 -;5 -羟色胺受体,也调节收缩并没有得到很好的研究。gydF4y2Ba

方法:gydF4y2Ba在三硝基苯磺酸大鼠结肠炎模型,我们使用受体拮抗剂识别受体的变化利用的选择性的逆转受损的收缩反应乙酰胆碱(ACh)和5 -在结肠炎(第四天(D4))和解决炎症后(天36 (D36))。gydF4y2Ba

结果:gydF4y2Ba在孤立的环形平滑肌细胞,挑战,毒蕈碱的3受体(MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR)拮抗剂4-DAMP pF-HSD每个显示下降50%在对抗D4, MgydF4y2Ba2gydF4y2BaR拮抗剂methoctramine力量增加了一倍多,显示降低M的角色gydF4y2Ba3gydF4y2BaM R和增加的作用gydF4y2Ba2gydF4y2BaR,分别。这些变化被D36完全逆转。相比之下,5gydF4y2Ba2gydF4y2Ba受体(5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR)拮抗剂ketanserin大幅减少在D4的有效性,进一步减少D36,当5的贡献gydF4y2Ba2gydF4y2BaR是只有22%的控制。应对5没有变化gydF4y2Ba4gydF4y2BaR拮抗剂sdz - 205 - 557。西方墨点法确定5的表达下降gydF4y2Ba2gydF4y2BaR D36与控制,进一步支持结论,受损的持久性应对5是由于减少兴奋性5的表达gydF4y2Ba2gydF4y2BaR。gydF4y2Ba

结论:gydF4y2Ba因此,持续降低受体表达和产生的收缩反应的障碍将5 -妥协一个适当的反应能力,这可能引起肠道功能障碍post-enteritis综合症。gydF4y2Ba

  • 5、5 -羟色胺(血清素)gydF4y2Ba
  • 5 -gydF4y2Ba#gydF4y2BaR, 5 -羟色胺受体#gydF4y2Ba
  • 乙酰胆碱,乙酰胆碱gydF4y2Ba
  • BSA,牛血清白蛋白gydF4y2Ba
  • CCh、氯化氨甲酰胆碱gydF4y2Ba
  • CSMC、环形平滑肌细胞gydF4y2Ba
  • D0, D4 D36,几天后开始结肠炎gydF4y2Ba
  • DMSO(二甲亚砜gydF4y2Ba
  • hps,消息灵通的生理盐溶液gydF4y2Ba
  • 肠易激综合症、肠易激综合症gydF4y2Ba
  • 知识产权gydF4y2Ba3gydF4y2Ba、肌醇1、4、5联结gydF4y2Ba
  • MPO、髓过氧物酶gydF4y2Ba
  • 米gydF4y2Ba#gydF4y2BaR,毒蕈碱的受体#gydF4y2Ba
  • TBS-T,三羟甲基氨基甲烷缓冲液盐Triton x - 100的0.25%gydF4y2Ba
  • TNBS,三硝基苯磺酸gydF4y2Ba
  • 乙酰胆碱gydF4y2Ba
  • 环形平滑肌细胞gydF4y2Ba
  • 收缩性gydF4y2Ba
  • 肠gydF4y2Ba
  • 5 -羟色胺gydF4y2Ba

http://dx.doi.org/10.1136/gut.2005.066563gydF4y2Ba

来自Altmetric.com的统计gydF4y2Ba

    请求的权限gydF4y2Ba

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    肠道炎症损害受体激动剂诱导的平滑肌收缩(看到Moreels和他的同事们,gydF4y2Ba1gydF4y2Ba曹和他的同事们,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba施,SarnagydF4y2Ba3gydF4y2Ba综述了SarnagydF4y2Ba4gydF4y2Ba和柯林斯gydF4y2Ba5gydF4y2Ba),但这个细胞基础还有待充分阐明。此外,神经传递素的多样性和发炎的肠道内的其他收缩受体激动剂存在进一步增加了复杂性的理解改变了收缩性。然而,现有的文献主要集中在收缩反应的主要神经递质乙酰胆碱(ACh)肠道,和很少有研究评估收缩性,以应对其他兴奋性受体激动剂如血清素(5 -羟色胺;5)。最近,我们表明,降低收缩性的三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠结肠炎包括变化的一个重要组件的水平环形平滑肌细胞(CSMC)。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba在高峰结肠炎4天(D4),结肠发炎mid-descending CSMC孤立显示一个减毒收缩反应碳酰胆碱(CCh)和5。解决白天明显炎症后36 (D36)的受损引起的收缩反应返回值来控制。然而,应对5仍然受损,表明结肠炎不同影响这些受体系统。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba

    乙酰胆碱诱发的CSMC收缩与毒蕈碱的受体2和3 (M交互gydF4y2Ba2gydF4y2BaR和米gydF4y2Ba3gydF4y2BaR)。gydF4y2Ba7gydF4y2Ba通过这两种信号受体有能力增加细胞内钙离子浓度,MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR信号增加肌醇1,4,5-trisphosphate (IPgydF4y2Ba3gydF4y2Ba)和MgydF4y2Ba2gydF4y2BaR腺苷酸环化酶灭活。gydF4y2Ba8日,gydF4y2Ba9gydF4y2Ba在并行系统中,5 -和它的特定受体相互作用,肠平滑肌细胞表达5gydF4y2Ba2gydF4y2Ba受体(5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR)和5 -gydF4y2Ba4gydF4y2BaR亚型,gydF4y2Ba10 -gydF4y2Ba12gydF4y2Ba而胃底平滑肌表示5gydF4y2Ba2 bgydF4y2BaR亚型(例如,看到考克斯和科恩gydF4y2Ba13gydF4y2Ba)。相反的毒蕈碱的受体都是积极的信号系统与收缩,5 -受体分化的信号通路:兴奋性5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR,像米gydF4y2Ba3gydF4y2BaR,提高CagydF4y2Ba2 +gydF4y2Ba我gydF4y2Ba通过增加知识产权gydF4y2Ba3gydF4y2Ba生产gydF4y2Ba10日,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba而5 -gydF4y2Ba4gydF4y2BaR是积极与腺苷酸环化酶,从而抑制收缩,与钙动员。gydF4y2Ba10日,gydF4y2Ba14日,gydF4y2Ba15gydF4y2Ba

    毒蕈碱的受体在胆碱能收缩的重要作用CSMC已经建立但5 -羟色胺受体的生理作用这些细胞仍然了解甚少,尽管他们的调解能力迅速和广泛的乙酰胆碱引起的收缩反应相当于(例如,看到井和BlennerhassettgydF4y2Ba6gydF4y2Ba)。在完整的组织以及孤立的细胞制剂,外源性5 -直接从人类肠道平滑肌收缩,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba和其他物种(例如,猪gydF4y2Ba16gydF4y2Ba),进一步支持一个潜在的重要作用的能动性。gydF4y2Ba

    5的起源可能作用于这些受体体内尚不明朗。虽然存在5 -肌间神经丛内含有神经元细胞体的几个物种一直认可,gydF4y2Ba17gydF4y2Ba采用免疫研究最近才显示包含静脉曲张5轴突内的环形平滑肌的老鼠gydF4y2Ba18日,gydF4y2Ba19gydF4y2Ba和兔肠。gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba证据支持神经介导肠平滑肌收缩通过5 -释放因此有限,和non-neuronal 5的来源也很重要。免疫细胞,如肥大细胞和血小板含有5 -和他们的激活炎症可能直接影响CSMC收缩。gydF4y2Ba21gydF4y2Ba此外,增加可用性5 -由于减少失活发生在粘膜发炎,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba提高间接行动通过溢出的可能性在底层肌肉层。gydF4y2Ba

    通过改变炎症也会影响平滑肌收缩的胆碱能受体系统。在控制条件下,仅能通过M ACh诱导收缩是介导gydF4y2Ba3gydF4y2BaM R但在炎症gydF4y2Ba2gydF4y2BaR途径成为功能活跃。gydF4y2Ba23 -gydF4y2Ba25gydF4y2Ba如果类似的表型改变发生在5 -受体系统,迄今为止所显示的结果,gydF4y2Ba6gydF4y2Ba深刻变化平滑肌功能中可能导致炎症,如果不是逆转,也可能影响活性的恢复状态。没有研究对平滑肌细胞受体使用后解决炎症。gydF4y2Ba

    我们研究在大鼠结肠,假设变化和5 -乙酰胆碱受体系统可能有助于改变与TNBS CSMC收缩,发生在炎症诱导。我们的目标是:(1)检查结肠炎影响ACh和5 -诱导收缩使用新鲜孤立单CSMC全职的炎症(出现明显复苏);(2)检查毒蕈碱的变化和血清素激活的受体表达在结肠炎的决议;和(3)比较修改5 -乙酰胆碱受体系统。gydF4y2Ba

    材料和方法gydF4y2Ba

    TNBS诱导炎症gydF4y2Ba

    所有实验进行成年男性Sprague-Dawley老鼠(查尔斯河,魁北克,加拿大)。动物被安置在微型滤波器对孤立的笼子和免费的食物和水实验过程开始前至少5天。实验结肠炎,老鼠轻轻犀牛与氟烷,200毫米和500μl TNBS(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)溶解在50%的乙醇被引入结肠8厘米近端使用PE-50肛门导管如前所述。gydF4y2Ba6,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba所有实验程序是当地大学动物保健委员会批准。gydF4y2Ba

    组织学gydF4y2Ba

    动物被牺牲在不同时期开始后的结肠炎,和降结肠中期被区域发炎,紧随其后的是常规石蜡切片处理。组织学部分是沾haematoxylin-eosin审查由盲法的实验条件,根据描述的过程。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba此外,髓过氧化酶(MPO)活动评估如前所述。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba短暂,急冻肠段被放置到一个解决方案(1毫升/ 50毫克组织)溴化hexadecyltrimethyl-ammonium wt /卷)(0.5%磷酸钾缓冲(50毫米,pH值6.0)。样本单一化冰上30秒钟,离心机30分钟在000 rpm在4°C,然后孵化60°C两个小时。孵化后,100μl上层清液添加到2.9毫升的0.00005% HgydF4y2Ba2gydF4y2BaOgydF4y2Ba2gydF4y2Bao-dianisidine盐酸盐(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)电池解决方案,和吸光度测量在460海里。结果表示为单位每100毫克的组织MPO活性(湿重),在一个单位的MPO活性所需的酶将1μmol HgydF4y2Ba2gydF4y2BaOgydF4y2Ba2gydF4y2Ba/分钟25°C。gydF4y2Ba

    隔离的环形平滑肌细胞gydF4y2Ba

    隔离的结肠CSMC如前所述。gydF4y2Ba6,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba简而言之,mid-descending结肠切除和放置在新鲜的柠檬酸溶液,和黏膜和黏膜下层被锋利的解剖。条环形平滑肌被拆除,放入玫瑰生理盐溶液(hps)消化解决方案在5°C的环境了两个小时,室温20分钟,最后在31°C 10分钟。解决方案包含环形平滑肌就倒了200μm尼龙筛网过滤器和彻底冲洗hps隔离解决方案以去除多余的酶解,resuspended hps隔离解决方案中,轻轻磨碎个人CSMC生产暂停。gydF4y2Ba

    形态学评价CSMC孤立gydF4y2Ba

    相衬显微镜(奥林巴斯IMT-2)是用于识别细胞阶段亮膜自由的身体扭曲和起泡。这些细胞测定100%可行的排斥台盼蓝染色(数据没有显示)。总的来说,⩾CSMC人口的90%证明了这些特征。gydF4y2Ba

    评估个体细胞的收缩性gydF4y2Ba

    炎症的影响受体激动剂诱导伸缩力的个人CSMC直接检查,如前所述。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba短暂,整除的新鲜孤立CSMC被放置在一个35毫米盘与插图玻璃盖玻片,可以接受10分钟,并查看使用一个倒置相差显微镜(奥林巴斯IMT-2)连接到一个闭路摄像机。个人CSMC直接暴露于空调采暖或5 -(1μM在柠檬酸溶液)由压力应用程序通过河豚吸管(500 ms应用10 psi通过1 M&OHgr;电阻提示),micromanipulated 200μm细胞内。CSMC不断灌注了柠檬酸溶液2毫升/分钟的速度。图像捕捉每隔250毫秒,允许识别细胞的静止长度和最大收缩性孤立在天0,4,36 (D0, D4和D36)。长度测量得到使用图像分析程序(ImagePro 5.0;媒体控制论,美国马里兰州银泉)。消极的控制包括克雷布斯的压力应用解决方案通过河豚吸量管,未能引起收缩(数据未显示)。gydF4y2Ba

    受体拮抗gydF4y2Ba

    特定受体拮抗剂的作用是决定新孤立的结肠CSMC。短暂,CSMC镀和控制反应ACh或5 -测定每道菜的细胞,如上所述。这百分之收缩当时拍摄的最大响应每个实验条件(D0, D4, D36),因此正常化的炎症诱导变化最大收缩。受体拮抗剂添加和孵化10分钟,重复上述过程在另一个的细胞在相同的菜。任何变化最大收缩被表示为百分之一的适当的控制响应。这是对每个对手重复检查。浓度的对手使用显示的最大浓度是选择性地有效。gydF4y2Ba10日,gydF4y2Ba23日,gydF4y2Ba25日,gydF4y2Ba28 -gydF4y2Ba32gydF4y2Ba在所有情况下,应用拮抗剂或二甲亚砜(DMSO)没有影响静息细胞长度和DMSO没有改变受体激动剂诱导收缩性(数据没有显示)。gydF4y2Ba

    免疫细胞化学gydF4y2Ba

    为了解决M的炎症引起的衰减机制gydF4y2Ba3gydF4y2BaR信号的MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR测定采用免疫细胞化学在福尔马林固定石蜡包埋部分。抗原后检索使用目标检索解决方案(加拿大安大略省米西索加Dako,),部分被封锁在1%山羊血清和anti-M孵化gydF4y2Ba3gydF4y2BaR抗体(1:10 0;美国加州圣克鲁斯,Santa Cruz)一夜之间在4°C,紧随其后的是555一小时孵化与山羊antirabbit Alexa (1:1000;分子探针,尤金,俄勒冈州,美国)。标签是形象化的奥林巴斯BX-51显微镜和图像数字捕获(ImagePro 5.0;媒体控制论)。gydF4y2Ba

    免疫细胞化学为5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR是如前所述。gydF4y2Ba33gydF4y2Ba短暂,mid-descending结肠cryosectioning福尔马林固定和嵌入式。浮动部分(40μm) permeabilised和堵塞一小时(三羟甲基氨基甲烷缓冲液盐含有0.25% Triton x - 100 (TBS-T)与2%牛血清白蛋白(BSA))。部分与anti-5-HT孵化gydF4y2Ba2gydF4y2BaR抗体(2μg /毫升TBS-T 2% BSA 48小时在4°C;BD Pharmingen,圣地亚哥,加利福尼亚州,美国),其次是555一小时孵化与山羊antimouse Alexa (1:1000;分子探针)。核本地化与赫斯特33342年通过染色(1:5000)。上面的标签是视觉效果。gydF4y2Ba

    免疫细胞化学为5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR也刚孤立CSMC上执行。短暂,细胞悬浊液福尔马林固定的,洗,阻塞TBS-T含有2% BSA一小时。细胞和2μg /毫升anti-5-HT孵化gydF4y2Ba2gydF4y2BaR抗体在室温下了两个小时,之后一个小时孵化与山羊antimouse Alexa 488 (1:1000;分子探针),核染色使用碘化propidium (10gydF4y2Ba−9gydF4y2Ba米)。每一步后,暂停CSMC离心机在1000年gydF4y2BaggydF4y2Ba四分钟,resuspended在适当的解决方案。抗体呈现标签是使用共焦显微镜和光学切片和三维重建使用Fluo-View软件。gydF4y2Ba

    西方墨点法gydF4y2Ba

    研究用选择性5 -gydF4y2Ba2gydF4y2Ba对手5 -持续减少gydF4y2Ba2gydF4y2Ba信号。因此,5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR表达使用免疫印迹分析,评估新孤立平滑肌组织,如前所述。gydF4y2Ba34gydF4y2Ba后蛋白质组织溶解产物,测定样品含有等量的蛋白质解决10%钠十二烷基sulphate-polyacrylamide凝胶电泳和转移到polyvinylidine二氟化物膜。转让后,膜与要么anti-5-HT孵化gydF4y2Ba2gydF4y2BaR抗体(1μg /毫升48小时)或anti-β-actin抗体(24小时1:1000)在4°C TBS-T 5%牛奶,洗TBS-T,孵化一小时在辣根过氧化物酶共轭山羊antimouse (1:1;皮尔斯,罗克福德,伊利诺斯州,美国),和视觉效果,增强化学发光后,制造商的指示。gydF4y2BaXgydF4y2Ba雷电影进行扫描并使用图像Pro软件带强度决定。的5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR值被正常化β-actin表达式,表示相对于控制。gydF4y2Ba

    化工产品和解决方案gydF4y2Ba

    解决方案的构成如下:克雷布斯的解决方案(mM: NaHCOgydF4y2Ba3gydF4y2Ba25;氯化钠118;氯化钾4.7;不gydF4y2Ba2gydF4y2Ba阿宝gydF4y2Ba4gydF4y2Ba1;MgSOgydF4y2Ba4gydF4y2Ba1.2;葡萄糖11;CaClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba2.5;洋溢着95%啊gydF4y2Ba2gydF4y2Ba/ 5%股份有限公司gydF4y2Ba2gydF4y2Ba);hps消化解决方案(mM:氯化钠125;葡萄糖10;Na-HEPES 10;MgClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba1;氯化钾4;CaClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba1;EDTA 0.25;牛磺酸10;pH值7.2)与木瓜蛋白酶(0.5毫克/毫升),BSA(1毫克/毫升)DL-dithiothreitol(1μM)和胶原酶type-F(0.5毫克/毫升);hps隔离解决方案(mM:氯化钠112.5;氯化钾5.5;KHgydF4y2Ba2gydF4y2Ba阿宝gydF4y2Ba4gydF4y2Ba2;Na-HEPES 24;CaClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba1.9;MgClgydF4y2Ba2gydF4y2Ba0.6;葡萄糖8;BME氨基酸40μl /毫升;大豆胰蛋白酶抑制剂0.1毫克/毫升,pH值7.4)。受体拮抗剂:使用MgydF4y2Ba2gydF4y2BaR, 1μM methoctramine;米gydF4y2Ba3gydF4y2BaR, 1μM 4-DAMP;米gydF4y2Ba3gydF4y2BaR, 1μM pF-HSD;5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR, 1μM ketanserin;和5 -gydF4y2Ba4gydF4y2BaR, 1μM sdz - 205 - 557。除了前面提到的,所有化学品都从σ购买。gydF4y2Ba

    数据分析gydF4y2Ba

    所有数据都表示为(SEM)。统计分析了使用单向方差分析(方差分析)与学生Newman-Keuls多重比较检验。收缩性实验,数据拟合使用标准曲线拟合方程与SEM负担过重。0.05⩽的p值被认为是具有统计学意义。gydF4y2Ba

    结果gydF4y2Ba

    TNBS诱导的炎症mid-descending鼠结肠gydF4y2Ba

    政府TNBS结肠炎引起的D4公然结肠炎症的存在,如前所述。gydF4y2Ba6,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba涉及领域被严重破坏粘膜,水肿、粘连。由D36明显炎症的迹象之前已经解决,但是涉及的领域可能会被肠壁增厚(炎症诱导肥大和增生的结果)。gydF4y2Ba35岁,gydF4y2Ba36gydF4y2Ba在所有情况下,炎症是验证使用独立的标准体重,透壁的炎症组织学评价,MPO分析。gydF4y2Ba

    我们先前描述的使用微观评价和MPO TNBS诱发炎症。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba在这项研究中,一个类似的观察时间进程与最大炎症存在由D36 D4和全分辨率(数据没有显示)。此外,我们的MPO结果类似于先前的研究结果(数据没有显示)。gydF4y2Ba6,gydF4y2Ba37岁的gydF4y2Ba38gydF4y2Ba

    乙酰胆碱诱导炎症期间收缩gydF4y2Ba

    建立炎症是否修改胆碱能诱导伸缩力,CSMC受到ACh下微观可视化。空调采暖应用程序控制(D0) CSMC导致最大收缩26.3 (0.4)% (n = 3),大约3秒后发生收缩,D4(图1)。应对ACh显示显著衰减最大每分收缩(p⩽0.05)。此外,有一个显著增加最大收缩,一半所需的时间从758.3(57.3)在D0 CSMC女士1046.7(61.2)女士D4 (p⩽0.05)。然而,这些变化是完全逆转解决炎症(D36),收缩性的CSMC D36动物区别D0反应(图1 d)。gydF4y2Ba

    图1gydF4y2Ba

    炎症可逆损害乙酰胆碱(ACh)诱导环形平滑肌细胞收缩(CSMC)大鼠结肠。CSMC保持酶的分离在第0天(做、控制),第四天(D4),和天36 (D36)结肠炎,和收缩评估下直接微观可视化在37°C。(a - c)显微图显示萎缩的个人D0 CSMC 1μM ACh微量吸液管的应用后,看到右侧的每个图像(箭头)。(一)控制;(B) + 750 ms;和(C) + 3500毫秒后ACh应用程序。规模100μm酒吧。(D)的时间进程意味着每分收缩细胞D0, D4, D36动物为了应对ACh (n = 3动物每类别10细胞/动物)。箭头表示每分钱收缩的细胞(a - c)所示。每分钱收缩为D4明显低于D0, D36时间点⩾500 ms (p⩽0.05)。gydF4y2Ba

    在炎症改变毒蕈碱的受体gydF4y2Ba

    先前的研究表明,炎症引起的改变使用毒蕈碱的受体水平的平滑肌细胞。gydF4y2Ba3,gydF4y2Ba23日,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba然而,尚不清楚是否有逆转这些修改后的康复炎症。我们探索这个药物使用选择性毒蕈碱的受体拮抗剂在前面展示的浓度是最大限度地有效的肠平滑肌,最小的其他非特异性拮抗毒蕈碱的受体亚型(例如,看到史和SarnagydF4y2Ba23gydF4y2Ba和孙和他的同事们gydF4y2Ba25gydF4y2Ba)。数据被表示为百分数抑制乙酰胆碱的反应。预处理的孤立CSMC选择性MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR拮抗剂pF-HSD或者4-DAMP引起了51(7)%,63(9)%减少个人控制CSMC的收缩,分别(图2 a、B)。此外,选择性的应用gydF4y2Ba2gydF4y2BaR拮抗剂methoctramine(图2 c)有一个小但是一致的影响最大收缩,导致12(4)%减少(p < 0.05gydF4y2BavgydF4y2Ba控制),大大低于M的效果gydF4y2Ba3gydF4y2BaR拮抗剂。这个建立的特征比例毒蕈碱的受体参与应对D0 CSMC的胆碱能刺激。gydF4y2Ba

    图2gydF4y2Ba

    炎症改变利用乙酰胆碱的毒蕈碱的受体(ACh)诱导结肠环形平滑肌细胞收缩分离大鼠在0天(D0,控制),第四天(D4)和日36 (D36)结肠炎。空调采暖应用存在的选择性毒蕈碱的MgydF4y2Ba2gydF4y2Ba(methoctramine)和MgydF4y2Ba3gydF4y2Ba(4-DAMP或F-HSD)受体拮抗剂。数据给出了每分钱抑制每个条件下的最大收缩(每分,细胞收缩的接收没有拮抗剂)。每个人的细胞作为自己的最大收缩控制治疗之前,因此正常化的差异在收缩时产生的炎症。在炎症(D4), MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR拮抗剂pF-HSD (A)和4-DAMP (B)变得更有效地阻止收缩但这减少被推翻后解决炎症(D36)。相比之下,MgydF4y2Ba2gydF4y2BaR拮抗剂methoctramine (C)显示,阻断炎症期间收缩,增加有效性也是结肠炎后逆转。与10细胞/ n = 4 - 6动物,动物。* p⩽0.05与D0。gydF4y2Ba

    在CSMC孤立D4结肠炎,M的有效性gydF4y2Ba3gydF4y2BaR拮抗剂阻断ACh诱导收缩明显减少(p⩽0.05)。4-DAMP和pF-HSD只有26个(9)24(5)%和%的ACh诱发宫缩,分别约50%的D0的效果。相比之下,methoctramine的有效性显著增加,而且得罪ACh引起收缩,29(6)%,以D0两倍多(p⩽0.05)。这表明结肠炎引起转变的模式利用毒蕈碱的受体,减少依赖MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR和增加M的利用率gydF4y2Ba2gydF4y2BaR。gydF4y2Ba

    在炎症的决议,完成逆转的改变毒蕈碱的受体利用率。methoctramine的有效性降低D0的水平,因为它阻止了17(6)%乙酰胆碱引起的收缩。此外,4-DAMP和pF-HSD回到D0的影响值,阻塞56(9)57(10)%和%的收缩,分别。非特异性毒蕈碱的拮抗剂的应用阿托品废除ACh诱导收缩在所有时间点(数据未显示),这表明收缩反应都是由于胆碱能的信号。gydF4y2Ba

    由于大幅度下降的趋势gydF4y2Ba3gydF4y2Ba在结肠炎R利用率,我们检查了M的表情gydF4y2Ba3gydF4y2BaCSMC R。免疫细胞化学用于视觉评估的存在和分布受体在细胞水平上。在D0组织,MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR标签是分布在整个圆周和纵向平滑肌层,与均匀点状的染色模式(图3)。D4, M的外观gydF4y2Ba3gydF4y2BaR标签是典型的改变,减少膜本地化和强劲的外观细胞核周围的标签(图3 b)。然而,通过D36, M的外观gydF4y2Ba3gydF4y2BaR标签又类似于控制、均匀分布的受体染色(图3 c)。消极的控制(主要抗体遗漏和不匹配的二级抗体)未能产生显著的标签(数据未显示)。gydF4y2Ba

    图3gydF4y2Ba

    改变表达式的毒蕈碱的MgydF4y2Ba3gydF4y2Ba(M受体gydF4y2Ba3gydF4y2Ba在结肠炎R)。免疫荧光检测的显微照片gydF4y2Ba3gydF4y2BaR在正常和发炎结肠环形平滑肌的部分(A)控制(0)天,第四天(B)和(C)天36组织。0天36组织表现出类似的扩散膜相关的染色模式。相比之下,米gydF4y2Ba3gydF4y2BaR本地化4天平滑肌主要是细胞核周围的(箭头),表明掩饰的MgydF4y2Ba3gydF4y2Bar . 20μm比例尺。gydF4y2Ba

    5在炎症引起的收缩gydF4y2Ba

    D0 CSMC 5 -通过压力应用程序的直接接触造成的最大收缩24.8 (0.9)% (n = 3),大约3秒后发生反应,D4(图4)。有一个重大修改5 -诱导收缩(p⩽0.05),降低灵敏度和衰减每分钱最大收缩(18.8 (0.3)%)。此外,有一个显著增加最大收缩,一半所需的时间从670.0到963.3 (20.8)(62.3)(p⩽0.05)女士。D36, 5 -从控制引起的收缩反应仍然改变,事实上,进一步抑制从D4动物,除此之外在CSMC最大收缩下降到14.9 (0.8)%。gydF4y2Ba

    图4gydF4y2Ba

    结肠炎导致持久的损伤5 -羟色胺(5 -羟色胺;5)诱导孤立的环形平滑肌细胞收缩(CSMC)。时间的收缩CSMC隔绝第四天(D4)或天36 (D36)动物明显下降5 -诱导反应D4和进一步显著减少D36相对控制(D0)。数据点代表的意思是百分之收缩(n = 10细胞3动物/条件/动物)。每分钱收缩D4和D36明显小于D0时间点⩾500 ms。每分收缩D36明显小于在所有时间点为D4⩾2000 mc (p⩽0.05)。gydF4y2Ba

    修改5 -受体在炎症gydF4y2Ba

    免疫细胞化学被用来想象5的存在gydF4y2Ba2gydF4y2BaR的圆形大鼠结肠平滑肌层。在cryosections, 5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR标签出席了膜连接相邻CSMC(图5)。为了进一步研究这个细胞本地化,免疫细胞化学在孤立CSMC重复。使用共焦显微镜、5阳性染色gydF4y2Ba2gydF4y2BaR在线性数组在细胞的表面(图5 b)。在这两种情况下,缺乏主要抗体或使用不匹配的二次未能产生显著的标签。gydF4y2Ba

    图5gydF4y2Ba

    兴奋性5 -羟色胺2 a受体(5 -羟色胺;5 -gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在大鼠结肠平滑肌R)表达。(A)免疫细胞化学部分的老鼠mid-descending结肠显示本地化的5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR标签(红色)平滑肌细胞连接,使用赫斯特33342年核染色(蓝色)。(B)共焦显微镜显示5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR(绿色)表面上的一个孤立的环形平滑肌细胞,核染色使用propidium碘(红色)。染色的5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR是局部线性数组在细胞表面。规模酒吧25μm (A)和10μm (B)。gydF4y2Ba

    炎症导致改变反应激活的毒蕈碱的受体,我们测试是否相似的改变使用用途在收缩反应5 -羟色胺受体也存在。这是通过与选择性5 -预孵化gydF4y2Ba2gydF4y2Ba和5 -gydF4y2Ba4gydF4y2Ba受体拮抗剂(分别ketanserin和sdz - 205 - 557)浓度是专门和最大限度地有效。gydF4y2Ba10日,gydF4y2Ba39 -gydF4y2Ba42gydF4y2Ba所有数据都表示为百分之一的抑制5 -响应。在D0 CSMC 5的应用gydF4y2Ba2gydF4y2BaR拮抗剂ketanserin(1μM)导致69(4)%减少反应5(图6)。这被D4更有效抑制ketanserin抑制5 -响应只有33 (6)%。gydF4y2Ba

    图6gydF4y2Ba

    炎症改变了利用率的5 -羟色胺(5 -羟色胺;5)受体在环形平滑肌细胞收缩。应用5 - 2的5 -受体(5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR)拮抗剂ketanserin (A)或5gydF4y2Ba4gydF4y2BaR拮抗剂sdz - 205 - 557 (B),与数据表示为百分数抑制收缩相对萎缩的细胞接收没有对手。每个细胞由自己控制人口最大收缩,因此正常化的差异在收缩炎症。Ketanserin更有效地阻止收缩在炎症和没有解决结肠炎后复苏的障碍。没有观察到变化的有效性sdz - 205 - 557,显示没有改变5的贡献gydF4y2Ba4gydF4y2BaR收缩。n = 3动物每个时间点,10细胞/动物/条件;* p⩽0.05与天0 (D0)。D4、D36分列第四和36天。gydF4y2Ba

    ketanserin没有扭转的减少行动解决结肠炎。由D36 ketanserin显示很少的效果,阻止只有15(5)% 5引起的收缩。随着受损5 -诱导的收缩可能代表的增加表达抑制5 -gydF4y2Ba4gydF4y2BaR,我们检查了萎缩的选择性5 -gydF4y2Ba4gydF4y2BaR拮抗剂sdz - 205 - 557。这没有影响收缩在任何时间点(图6 b),表明没有明显的参与这种受体亚型在改变应对5。gydF4y2Ba

    减少5的有效性gydF4y2Ba2gydF4y2BaR拮抗剂结肠炎发病后表明,炎症可能导致这种受体的表达下降。这是研究通过免疫印迹分析组织控制(D0), D4,使用特定的anti-5-HT D36动物gydF4y2Ba2gydF4y2BaR抗体。图7显示了典型的结果与西方墨点法观测,确定了主要乐队在大约55 kDa,类似报道。gydF4y2Ba43gydF4y2Ba信号的强度降低了D4,和对D36仍压制。图像分析的多个独立的实验证明了D4蛋白表达减少80%,这就进一步减少到只有32%的控制D36 post-TNBS(图7)。总的来说,这些结果表明,炎症导致持续降低兴奋性5的表达gydF4y2Ba2gydF4y2BaR。gydF4y2Ba

    图7gydF4y2Ba

    免疫印迹分析显示减少的表达5 -羟色胺2 a受体(5 -羟色胺;5 -gydF4y2Ba2gydF4y2Ba在结肠炎R)。插图,代表墨迹图5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR控制(0天,D0),第四天(D4)和日36 (D36)动物识别在结肠平滑肌受体的存在。图显示了5 -免疫印迹图像分析的结果gydF4y2Ba2gydF4y2BaR,集成光密度(IOD)对β-actin正常化,并表示相对于控制。D4,显著减少5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR存在于平滑肌,这对D36仍然下降。使用n = 3 - 4 n = 5 - 6实验老鼠;* p⩽0.05与D0。gydF4y2Ba

    讨论gydF4y2Ba

    改变运动的起源在发炎的肠道包括直接修改个人平滑肌细胞的功能特性。我们表明,炎症造成实质性的,但发散,改变两个受体系统参与启动平滑肌收缩。具体来说,我们显示炎症引起的功能障碍的胆碱能和血清素激活的途径,在受体水平与功能修改。激活受损收缩的特征时两个系统在CSMC组织发炎,有选择性的逆转这些变化后解决结肠炎。这是小说存在的证据独立监管途径的控制这些受体的表达和功能,这期间及之后变得明显炎症。gydF4y2Ba

    已经确立,肠道CSMC表达毒蕈碱的受体MgydF4y2Ba2gydF4y2BaR和米gydF4y2Ba3gydF4y2Ba分别R的比例约为4:1。gydF4y2Ba8日,gydF4y2Ba9日,gydF4y2Ba44gydF4y2Ba我们证明ACh诱导大鼠结肠收缩CSMC介导主要由MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR选择性MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR拮抗剂封锁了大部分的反应。然而,有一个小MgydF4y2Ba2gydF4y2BaR介导组件,应用methoctramine减少12% ACh诱导细胞缩短引起的。而类似methoctramine诱导减少收缩被孙和他的同事观察到,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba这些研究进行平滑肌细胞分离出猫下食管括约肌。然而,减少收缩的methoctramine是温和而M的影响gydF4y2Ba3gydF4y2BaR拮抗剂4-DAMP pF-HSD。因此,我们的数据显示,ACh诱导收缩主要是由MgydF4y2Ba3gydF4y2BaR在控制条件下,与在其他系统的发现一致。gydF4y2Ba

    急性炎症已被证明导致的角色功能开关毒蕈碱的受体。gydF4y2Ba3,gydF4y2Ba23日,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba在这些研究中,炎症诱导减少CSMC收缩平行调制的毒蕈碱的受体利用率。我们发现一个平行的功能利用率下降gydF4y2Ba3gydF4y2BaR的结肠发炎,选择性拮抗剂4-DAMP和pF-HSD变得不那么有效的阻止收缩。作为米gydF4y2Ba3gydF4y2BaR利用率降低,大幅增加的依赖gydF4y2Ba2gydF4y2BaR空调采暖介导收缩,随着methoctramine显示增加D4结肠炎的有效性。gydF4y2Ba

    提议,这也反映了改变表情,我们用免疫细胞化学在M想象的修改gydF4y2Ba3gydF4y2BaR本地化。这建议转移分布远离表面膜对细胞内细胞核周围的本地化,兼容的改变在细胞的收缩性。相比之下,主要CSMC毒蕈碱的受体表达的是MgydF4y2Ba2gydF4y2Ba在控制条件下R,甚至。因此,细微变化gydF4y2Ba2gydF4y2BaR使用不太可能由于受体表达增加,并可能来自细胞内的变化,导致这种受体的暴露。gydF4y2Ba

    是炎症引起的功能性毒蕈碱的受体表达的变化,我们提出五可能发生类似的变化,作为另一个双受体介导系统CSMC中5 -羟色胺受体表达gydF4y2Ba2gydF4y2BaR和5 -gydF4y2Ba4gydF4y2BaR。gydF4y2Ba10日,gydF4y2Ba45gydF4y2Ba因此,我们检验了结肠炎是否这些受体的相对角色变化在细胞的收缩性。使用选择性5 -受体拮抗剂,ketanserin sdz - 205 - 557,我们表明,5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR介导的影响仍然决议后抑制炎症,但没有变化发生在5gydF4y2Ba4gydF4y2BaR通路。用免疫印迹的进一步分析表明,减少5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR蛋白表达基础,至少部分负责的5 -羟色胺引起的收缩反应受损后结肠炎。gydF4y2Ba

    除了5 -gydF4y2Ba2gydF4y2BaR在肠道平滑肌,gydF4y2Ba10日,gydF4y2Ba12日,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba一些研究表明存在其他兴奋性5 -受体,如5gydF4y2Ba2 bgydF4y2Ba也被ketanserin R。gydF4y2Ba46gydF4y2Ba这个,等兴奋性5 -受体的存在5gydF4y2Ba1gydF4y2BaR对血管平滑肌细胞,gydF4y2Ba47gydF4y2Ba可能有助于解释残余ketanserin麻木不仁的收缩。虽然超出了本文的范围来描述所有的5 -受体存在于我们的组织,我们的数据显示出持久的身体主要的兴奋性降低血清素激活的受体,5gydF4y2Ba2gydF4y2Bar .这与药理和采用证据显示完全恢复从降低MgydF4y2Ba3gydF4y2Ba在结肠炎R利用率。总体而言,从这个动物模型结肠炎的证据表明,调制的受体负责平滑肌兴奋性信号可能构成的一个重要方面的变化出现在发炎的肠道。gydF4y2Ba

    此外,结肠炎后仍然存在的这些变化表明,一个适当的应对能力5 -在生理或病理生理情况下成为改变,这可能是重要的理解肠易激综合征(IBS)的性质,开发后肠道炎症的一集。例如,最近的研究表明,5gydF4y2Ba4gydF4y2BaR受体激动剂tegaserod也用于治疗IBS抵销5gydF4y2Ba2gydF4y2BaR和5 -gydF4y2Ba2 bgydF4y2BaR,激活5 -浓度相似gydF4y2Ba4gydF4y2BaR。gydF4y2Ba48gydF4y2Ba虽然仍不清楚这些额外的角色参与改善受损的能动性,有趣的是推测,5 ht的衰减gydF4y2Ba2gydF4y2BaR,看到发生在结肠炎和持续恢复的动物,可能导致受体的外观配置文件,支持5 ht的有益的行动gydF4y2Ba4gydF4y2BaR受体激动剂,如tegaserod。这还需要进一步的研究来确定更改5 htgydF4y2Ba2gydF4y2BaR表达人类疾病,特别是在的炎症后肠易激综合症。gydF4y2Ba

    确认gydF4y2Ba

    作者感谢年代Lourenssen博士帮助这个手稿和科特斯米勒的准备技术援助。我们感谢加拿大消化健康基金会和CIHR奖学金支持(读写网)。gydF4y2Ba

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      林登博士gydF4y2Ba革顺、陈JX医学博士gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba5 -羟色胺可用性增加粘膜TNBS-induced结肠炎的豚鼠。gydF4y2Ba是杂志Gastrointest肝杂志吗gydF4y2Ba2003年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba285年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG207gydF4y2Ba-16年。gydF4y2Ba
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      施XZgydF4y2Ba,Sarna SK。炎症调制毒蕈碱的受体激活犬回肠圆形肌肉细胞。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba112年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba864年gydF4y2Ba-74年。gydF4y2Ba
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      施XZgydF4y2Ba狗回肠,Sarna SK。微分炎症调制的纵向和圆形肌肉细胞。gydF4y2Ba是杂志gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba277年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG341gydF4y2Ba-50年。gydF4y2Ba
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      孙UDgydF4y2Ba哈尼特公里,曹W,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba急性实验食管炎激活第二个信号转导通路在猫从下食管括约肌平滑肌。gydF4y2BaJ杂志ExpgydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba283年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1293年gydF4y2Ba-304年。gydF4y2Ba
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      莫里斯的全科医生gydF4y2Ba贝克PL, Herridge女士,gydF4y2Baet al。gydF4y2BaHapten-induced慢性炎症和溃疡模型大鼠结肠。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba1989年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba96年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba795年gydF4y2Ba-803年。gydF4y2Ba
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      井RWgydF4y2Ba莫里斯GP, Blennerhassett毫克,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba食管上段食管炎平滑肌的影响。gydF4y2Ba可以杂志杂志gydF4y2Ba2003年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba81年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba451年gydF4y2Ba8。gydF4y2Ba
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      孙UDgydF4y2Ba哈尼特公里,德佩特里克,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba不同的毒蕈碱的受体,G蛋白和磷脂酶在食管和降低食道括约肌圆形肌肉。gydF4y2BaJ杂志ExpgydF4y2Ba1993年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba267年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1205年gydF4y2Ba-14年。gydF4y2Ba
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    29. 希尔PBgydF4y2Ba多拉KA,休斯广告,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba细胞内钙的参与(2 +)5 (1 b / 1 d)受体介导兔子孤立肾动脉的收缩。gydF4y2BaBr J杂志gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba130年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba835年gydF4y2Ba-42年。gydF4y2Ba
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    30. 弗里登米gydF4y2Ba,贝尼杰。5 -羟色胺对内皮细胞和平滑肌细胞的膜电位猪冠状动脉。gydF4y2BaBr J杂志gydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba115年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba95年gydF4y2Ba-100年。gydF4y2Ba
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    31. Kadowaki米gydF4y2Ba革顺,韦德公关,MD。参与5-HT3, 5-HT4,烟碱受体在豚鼠远端结肠的蠕动反射。gydF4y2Ba是杂志gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba271年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG849gydF4y2Ba-57年。gydF4y2Ba
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      鹤HgydF4y2BaNakai年代,中山教授T,gydF4y2Baet al。gydF4y2BaEndothelium-independent松弛剂5 -羟色胺(5 -)对分离兔的影响面部静脉。gydF4y2BaJ平滑肌ResgydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba34gydF4y2Ba:gydF4y2Ba101年gydF4y2Ba-10年。gydF4y2Ba
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      Luttgen米gydF4y2Ba林里OS, Meister b .化学的身份5 - (2 a)受体免疫反应性的神经元鼠隔复杂和背侧海马。gydF4y2Ba大脑ResgydF4y2Ba2004年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba1010年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba156年gydF4y2Ba-65年。gydF4y2Ba
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      Lourenssen年代gydF4y2BaJ吉,罗德gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba肠道炎症调节突触囊泡蛋白的表达神经元钙sensor-1。gydF4y2Ba是杂志Gastrointest肝杂志吗gydF4y2Ba2002年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba282年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG1097gydF4y2Ba-104年。gydF4y2Ba
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      Blennerhassett毫克gydF4y2BaBovell调频,Lourenssen年代,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba特点inflammation-induced肥大大鼠肠道平滑肌细胞。gydF4y2Ba挖说科学gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba44gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1265年gydF4y2Ba-72年。gydF4y2Ba
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      Blennerhassett毫克gydF4y2BaVignjevic P银朱DL,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba炎症导致平滑肌增生和肥大的大鼠小肠。gydF4y2Ba是杂志gydF4y2Ba1992年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba262年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG1041gydF4y2Ba6。gydF4y2Ba
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      Hogaboam厘米gydF4y2Ba科林斯,雅各布森K, SM,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba一氧化氮抑制选择性有利影响的实验性结肠炎。gydF4y2Ba是杂志gydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba268年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG673gydF4y2Ba-84年。gydF4y2Ba
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      Krawisz我gydF4y2Ba莎朗·P斯滕森WF。定量分析基于髓过氧物酶的急性肠道炎症活动。老鼠和仓鼠的炎症模型的评估。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba1984年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba87年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1344年gydF4y2Ba-50年。gydF4y2Ba
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    40. 弗里登米gydF4y2Ba,贝尼杰。5 -羟色胺对内皮细胞和平滑肌细胞的膜电位猪冠状动脉。gydF4y2BaBr J杂志gydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba115年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba95年gydF4y2Ba-100年。gydF4y2Ba
    41. Kadowaki米gydF4y2Ba革顺,韦德公关,MD。参与5-HT3, 5-HT4,烟碱受体在豚鼠远端结肠的蠕动反射。gydF4y2Ba是杂志gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba271年gydF4y2Ba:gydF4y2BaG849gydF4y2Ba-57年。gydF4y2Ba
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      鹤HgydF4y2BaNakai年代,中山教授T,gydF4y2Baet al。gydF4y2BaEndothelium-independent松弛剂5 -羟色胺(5 -)对分离兔的影响面部静脉。gydF4y2BaJ平滑肌ResgydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba34gydF4y2Ba:gydF4y2Ba101年gydF4y2Ba-10年。gydF4y2Ba
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      博一gydF4y2BaSheffler DJ Kroeze周,gydF4y2Baet al。gydF4y2BaCaveolin-1与5-HT2A 5 -羟色胺受体和深刻的交互调节选择Galphaq-coupled蛋白受体的信号。gydF4y2BaJ临床生物化学gydF4y2Ba2004年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba279年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba34614年gydF4y2Ba-23年。gydF4y2Ba
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      沃利斯RMgydF4y2Ba,纳皮尔CM。毒蕈碱的拮抗剂平滑肌功能的发展障碍。gydF4y2Ba生命科学gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba64年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba395年gydF4y2Ba-401年。gydF4y2Ba
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      普林斯NHgydF4y2BaShankley NP,威尔士新泽西,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba研究一种改进的体外生物测定5 -(4)受体在人类孤立大型肠循环肌肉。gydF4y2BaBr J杂志gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba129年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1601年gydF4y2Ba8。gydF4y2Ba
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      比蒂DTgydF4y2Ba史密斯,是的,侯爵D,gydF4y2Baet al。gydF4y2Bategaserod 5-HT4受体激动剂,是一种强力5-HT2B受体拮抗剂在体外和体内。gydF4y2BaBr J杂志gydF4y2Ba2004年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba14gydF4y2Ba:gydF4y2Ba549年gydF4y2Ba-60年。gydF4y2Ba
      OpenUrlgydF4y2Ba

    脚注gydF4y2Ba

    • 网上发布的第一个2005年7月13日gydF4y2Ba

    • 利益冲突:没有宣布。gydF4y2Ba