增长、表型和功能的人类肠道肥大细胞被严格监管转化生长因子β1 |肠道gydF4y2Ba

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增长、表型和功能的人类肠道肥大细胞被转化生长因子β1严格监管gydF4y2Ba

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T格布哈特gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
洛伦兹gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
F DetmergydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
C TrautweingydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
H BektasgydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
M P曼gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba
S C比肖夫gydF4y2Ba3gydF4y2Ba

^1gydF4y2Ba美国胃肠病学、肝脏病学和内分泌学、汉诺威医学院,d - 30623汉诺威,德国gydF4y2Ba
^2gydF4y2Ba腹部和移植手术,汉诺威医学院,d - 30623汉诺威,德国gydF4y2Ba
^3gydF4y2Ba临床营养和预防(140 b),豪恩海姆大学d - 70593斯图加特,德国gydF4y2Ba

通信:gydF4y2Ba
教授S C比肖夫gydF4y2Ba
临床营养和预防(140 b),豪恩海姆大学d - 70593斯图加特,德国;gydF4y2Babischoff.stephanuni-hohenheim.degydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

背景和目的:gydF4y2Ba转化生长因子β1 (TGF-β1)表达在人类肠道健康和控制粘膜免疫反应和炎症通过调节淋巴细胞的功能,巨噬细胞、树突细胞和嗜酸性粒细胞。这里,我们问及人类肠道肥大细胞(MC)也可能是受到TGF-β1免疫调节。gydF4y2Ba

方法:gydF4y2Ba从肠道粘膜MC分离,纯化,体外培养的干细胞因子(SCF)有或没有TGF-β1。生长特性、表型和免疫中介发布的MC被逆转录-聚合酶链反应分析,流式细胞术、免疫细胞化学、免疫印迹,分别和不同的分析。gydF4y2Ba

结果:gydF4y2BaTGF-β1剂量依赖性(ED50≈0.1 ng / ml)抑制自洽场依赖增长人类肠道的MC增强细胞凋亡和减少扩散。同时,TGF-β1连接组织类型的百分比增加MC表达类胰蛋白酶和chymase而下调表达受体的IgE和自洽场。此外,TGF-β1大大改变了介质的概要文件发布的MC IgE受体后交联。释放组胺、cysteinyl-leukotrienes和肿瘤坏死因子α是强烈而减少前列腺素D2代和环氧酶1和2表达被TGF-β1调节。gydF4y2Ba

结论:gydF4y2Ba我们的数据表明,TGF-β1小说作为一个强有力的抑制剂和调制器的人类肠道MC效应函数。MC中介发布概要文件和蛋白酶表达的变化引起TGF-β1对MC的控制可能的相关性疾病等肠道过敏反应有关,克罗恩病、肠易激综合症,寄生虫感染。gydF4y2Ba

cys-LT, cysteinyl-leukotrienesgydF4y2Ba
考克斯环氧酶gydF4y2Ba
cPLA2,胞质磷脂酶A2gydF4y2Ba
艾格,IgE高亲和力受体gydF4y2Ba
,白介素gydF4y2Ba
马伯,单克隆抗体gydF4y2Ba
MC,肥大细胞gydF4y2Ba
PGD2,前列腺素D2gydF4y2Ba
pgd,造血的前列腺素合成酶gydF4y2Ba
rt - pcr、逆转录-聚合酶链反应gydF4y2Ba
自洽场,干细胞因子gydF4y2Ba
SDS、钠十二烷基硫酸盐gydF4y2Ba
TGF-β转化生长因子βgydF4y2Ba
TGF-R, TGF-β受体gydF4y2Ba
TNF-α,肿瘤坏死因子αgydF4y2Ba
TUNEL,末端转移酶介导的dUTP尼克结束标签gydF4y2Ba

柱状细胞gydF4y2Ba
细胞因子gydF4y2Ba
二十烷类gydF4y2Ba
肠粘膜gydF4y2Ba
人类gydF4y2Ba

http://dx.doi.org/10.1136/gut.2004.054650gydF4y2Ba

来自Altmetric.com的统计gydF4y2Ba

请求的权限gydF4y2Ba

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转化生长因子β1 (TGF-β1)是一种免疫调节细胞因子持续表达人类肠道中各种组织细胞,如上皮细胞和不同的固有层细胞。gydF4y2Ba^1gydF4y2Ba它作为一种抗炎细胞因子通过调节T细胞和树突状细胞的功能(例如,通过诱导调节性T细胞和浆细胞IgA生产,而且还通过控制炎症效应细胞如巨噬细胞和嗜酸性粒细胞)。gydF4y2Ba^{2 -gydF4y2Ba}^4gydF4y2Ba另一方面,TGF-β1参与调节组织修复过程,影响上皮细胞,成纤维细胞,导致细胞外基质生产。gydF4y2Ba^5gydF4y2Ba这双重职能TGF-β1证实了使用转基因动物模型体内实验。TGF-β1 TGF-β受体2基因敲除小鼠(TGF-RII)开发一个致命的多焦点的炎症涉及多个器官,包括肠,gydF4y2Ba^6,gydF4y2Ba ^7gydF4y2Ba而在表达TGF-β1小鼠不同器官组织纤维化的发展。gydF4y2Ba^{8日,gydF4y2Ba}^9gydF4y2Ba

肥大细胞(MC)已知参与两个过程。他们作为炎症效应细胞释放介质如组胺、二十烷类,和肿瘤坏死因子α(TNF-α)过程中炎症条件(例如,过敏反应、寄生虫感染和炎症性肠病),如图所示,最近在肠易激综合症。gydF4y2Ba^{10 -gydF4y2Ba}^12gydF4y2Ba其次,MC积累伤口愈合和组织纤维化的网站。gydF4y2Ba^{10日,gydF4y2Ba}^{11日,gydF4y2Ba}^13gydF4y2Ba在正常人类肠道他们主要是位于粘膜代表约2 - 3%的所有固有层细胞。炎症或纤维化的网站,他们的数量可能会大幅增加,他们的分布可能扩展到其他层等肠道壁的上皮细胞层和肌层固有层。gydF4y2Ba^{11日,gydF4y2Ba}^13gydF4y2Ba

监管人类MC的增长和中介发布依赖于细胞因子如干细胞因子(SCF)、白介素(IL) 3、4,和其他人来说,单独或结合促进MC的生长和成熟,并提高中介发布针对IgE依赖和IgE独立触发代理。gydF4y2Ba^{10日,gydF4y2Ba}^{14 -gydF4y2Ba}^18gydF4y2Ba然而,我们所知的人类MC的内源性抑制剂功能很差。在小鼠系统中,TGF-β1已被建议作为一个MC增长的抑制剂。gydF4y2Ba^{19 -gydF4y2Ba}^22gydF4y2Ba是否TGF-β1也调节MC中介释放尚不清楚实验小鼠产生了相互矛盾的结果。gydF4y2Ba^{21 -gydF4y2Ba}^24gydF4y2Ba在人类,没有数据可用,但TGF-β1也可能影响人类MC功能,据奥尔森gydF4y2Ba等gydF4y2Ba谁发现TGF-β1趋化因子和生长抑制作用在人类的进展不成熟的肥大细胞行HMC-1和人类脐带血中派生的MC。gydF4y2Ba^25gydF4y2Ba数据不一致的原因关于TGF-β1影响MC可能是不同类型的MC源自不同的物种,从身体不同的部位,不同的成熟度等级被用于先前的实验。我们首次研究了TGF-β1体内成熟人类MC的影响从肠道组织分离和纯化同质性。这项研究的目的是定义的功能TGF-β1调节MC增长、蛋白酶、和表面受体表达,中介发布。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba

分离、纯化和人类肠道MC的文化gydF4y2Ba

MC是孤立的从手术组织标本(小和大肠,肠切除,因为癌症,宏观上正常肠组织)使用一个四步骤酶分散方法,随后纯化的积极的选择gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba使用磁分离细胞表达细胞(mac系统,Miltenyi生物技术、Bergisch-Gladbach、德国),如前所述。gydF4y2Ba^{15日,gydF4y2Ba}^16gydF4y2BaMC(纯度60±35%)培养1 - 2×10的密度gydF4y2Ba^5gydF4y2Ba细胞/毫升中补充了重组人类自洽场(50 ng / ml;安进,千橡市,加利福尼亚,美国),il - 4 (2 ng / ml;诺华,维也纳,奥地利),激活TGF-β1 (5 ng / ml;PeproTech,落基山,新泽西,美国),或与这些细胞因子的组合。阻止TGF-β1生物活性,中和anti-TGF-β1单克隆抗体(mAb)(克隆9016.2;研发系统,明尼阿波利斯,明尼苏达州,美国每四天被加入到培养基。文化时期,MC纯度增加独立的细胞因子增加60±35%至98±2%,剩下成纤维细胞唯一污染细胞。MC纯度和恢复(每分的MC表示为数字的文化)测定细胞计数用台盼蓝染色(σ化学品,圣路易斯,密苏里州,美国)和细胞分化cytospin涂片染色May-Grunwald /染色(默克公司,达姆施塔特,德国)。确认MC恢复数据,每口井的组胺含量是衡量RIA (Coulter-Immunotech、Krefeld、德国)洗后细胞和随后的细胞溶菌作用。gydF4y2Ba

中介发布化验gydF4y2Ba

文化后,MC在清洗和播种密度为0.5比1×10gydF4y2Ba^5gydF4y2Ba细胞/毫升在没有抗生素的培养基或细胞因子。MC被IgE刺激受体(IgER)交联使用mAb29C6 (100 ng / ml, 90或360分钟;罗氏公司,新泽西州,新泽西,美国)。组胺释放到上清液测定RIA和表示为特定的组胺释放按照下列公式:gydF4y2Ba

(组胺释放艾格交联后−组胺释放自发响应缓冲控制)/总细胞组胺细胞溶菌作用后所确定的内容。gydF4y2Ba

Cysteinyl-leukotrienes (cys-LT)是衡量RIA如前所述。gydF4y2Ba^{15日,gydF4y2Ba}^16gydF4y2Ba前列腺素D2 (PGD2)是衡量PGD2 methoxime环评(开曼化学公司,安阿伯市密歇根,美国),TNF-α是衡量超灵敏的ELISA(显示BioSource欧洲,比利时)。释放cys-LT PGD2, TNF-α到上层的表示为特定中介释放了减法的中介发布针对缓冲控制。gydF4y2Ba

RNA隔离和反向transcriptase-polymerase连锁反应(rt - pcr)gydF4y2Ba

总RNA制备使用RNeasy迷你包(试剂盒、希尔登,德国)和rt - pcr进行了如前所述。gydF4y2Ba^{16日,gydF4y2Ba}^18gydF4y2Ba以下引物序列使用:TGF-RI: 5′aat太极拳TCG AGA标签GCC GT-3′, 5′tgc GGT TGT GGC AGA答AG-3′;TGF-RII: 5′gg广汽CTC亚美大陆煤层气有限公司AGC太极拳AAT在3′,5′cac TGC ATT ACA GCG AGA TGA CA-3′;GTCβ-glycan: 5′有条件现金援助ATT CCC AGC ATA CAA CT-3′, 5′ATC ACC TGA CAC CAG ATC TTC ATA-3′;endoglin: 5′tgt CTC行动柠檬酸TGC CTC CAG CT-3′, 5′gg CTG苑ATG TTG gg CAG条t - 3′gydF4y2Ba^26gydF4y2Ba;胞质磷脂酶A2 (cPLA2): 5′att CTG手枪TGT GCT ACC TAC-3′, 5′aac CAG AAA公司治理文化CCA AAA CTC-3′)gydF4y2Ba^27gydF4y2Ba;环氧合酶(COX) 1: 5′tgc CCA GCT有条件现金援助GGC 20 20 CTT-3′, 5′-GTG猫CAA CAC gg公司治理文化CTC TTC-3′;cox - 2: 5′ttc AAA TGA手枪TGT GGG AAA ATT GCT-3′, 5′aga柠檬酸TCT CTG有条件现金援助GAG答CTT-3′gydF4y2Ba^28gydF4y2Ba;造血的前列腺素合成酶(pgd): 5′ctt CAC CAG AGC CTA GCA 3′, 5′gga TTA TCT GGC gg CTG 3′)gydF4y2Ba^{29日gydF4y2Ba};和GAPDH: 5′acc ACA GTC猫GCC ATC AC-3′;5′太极拳ACC ACC CTG TTG CTG TA-3′(所有合成生命技术、Eggenstein德国)。gydF4y2Ba

免疫细胞化学gydF4y2Ba

免疫细胞化学对人类使用马伯执行类胰蛋白酶(克隆G3(0.24µg /毫升),人类chymase(0.24µg /毫升),从Chemikon,泰梅库拉,加利福尼亚,美国),人类的核细胞增殖相关抗原ki - 67(克隆MIB-1,稀释1:50;Dianova,汉堡,德国),和适当的同形像控制马伯(鼠标IgG1;南方生物技术,伯明翰,阿拉巴马州,美国)作为主要抗体(隔夜孵化在4°C)和streptavidin-biotin检测系统(Histostain-Plus设备;病菌,旧金山,加利福尼亚,美国)。凋亡的比例MC评估使用末端转移酶介导的dUTP尼克结束标签(TUNEL)原位细胞死亡为免疫细胞化学检测分析(勃林格曼海姆,曼海姆,德国)根据制造商的指示。gydF4y2Ba

流式细胞术gydF4y2Ba

对于每一个条件,2.5 - 5×10gydF4y2Ba^4gydF4y2BaMC(纯度98±2%)洗(400gydF4y2BaggydF4y2Ba,五分钟)和悬浮在100µl磷酸缓冲盐补充0.1%牛血清白蛋白,酸钠0.1%,250µg /毫升兔免疫球蛋白,mab针对TGF-RII(2.5µg /毫升;研发系统),gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba(克隆YB5。B8、2.5µg /毫升;Pharmingen),艾格α-chain(克隆29 c6, 2.5µg /毫升),或适当的同形像控制马伯(山羊免疫球蛋白(Dianova)和鼠标IgG1(研发系统))。在4°C孵化30分钟后,细胞被洗两次,30分钟在4°C FITC染色共轭二次抗体(南方生物技术)。呈现凋亡细胞用FITC共轭膜联蛋白V /碘化propidium双染色(研发系统)根据制造商的指示。gydF4y2Ba

免疫印迹gydF4y2Ba

为了获得完整的细胞提取物,0.5×10gydF4y2Ba^6gydF4y2BaMCs细胞溶解于萃取缓冲区包含25毫米三羟甲基氨基甲烷盐酸,液pH值7.5,0.5毫米EDTA, 0.5毫米EGTA,特里同x - 100 0.05%, 10毫米β-mercaptoethanol,补充了蛋白酶抑制剂鸡尾酒完成迷你(罗氏诊断,德国)。每细胞提取物(10 - 20µg蛋白质)分离12%钠十二烷基硫酸盐(SDS)聚丙烯酰胺凝胶涂抹在硝化纤维膜(Schleicher和Schuell Einbeck,德国)在0.1% SDS, 20%甲醇,400 l更易与甘氨酸,50更易与l三羟甲基氨基甲烷盐酸,液pH值8.3,在4°C四个小时40 V electroblotting使用Trans-Blot细胞系统(Bio-Rad实验室、德国慕尼黑)。膜被封锁在磷酸缓冲盐5%脱脂牛奶含有0.1%一夜之间渐变。膜与anti-COX1探测、anti-COX2 anti-PGDS化学(开曼)、anti-cPLA2(美国纽约北部的生物技术,普莱西德湖),和anti-actin Ab(美国加州Santa Cruz)。抗原抗体复合物是观想使用电化学发光检测系统,所述的制造商(NEN生命科学,波士顿,马萨诸塞州,美国)。确认等量的蛋白质被用于西方滴COX-1和2点,被膜(恢复免疫印迹剥离缓冲区;Perbio,罗克福德,伊利诺斯州,美国)30分钟37°C和探测的anti-actin Ab。gydF4y2Ba

统计数据gydF4y2Ba

所有数据都表示为意味着(SD)如果不显示。的意义差异评估通过魏克森讯号等级测试。p < 0.05被认为是具有统计学意义的价值。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

TGF-β受体的表达在人类肠道MCgydF4y2Ba

使用rt - pcr,我们检测到表达TGF-RI的成绩单,TGF-RII,配件TGF-R endoglin在新鲜纯化(纯度> 95%,未显示)以及培养MC(图1)。TGF-RII蛋白表达证实了流式细胞术(图1 b)。il - 4的补充培养基endoglin mRNA的数量减少而引起的伊格尔交联与mAb29C6孵化90分钟并不影响任何TGF-R mRNA的表达。gydF4y2Ba

Expression of transforming growth factor β receptor molecules (TGF-RI, TGF-RII) in human intestinal mast cells (MC). (A) mRNAs encoding for GAPDH (452 bp), TGF-RI (224 bp), TGF-RII (261 bp), endoglin (364 bp), and β-glycan (378 bp) detected by reverse transcription-polymerase chain reaction in MC following culture for 14 days in the presence of stem cell factor (SCF 25 ng/ml) or SCF and interleukin 4 (IL-4 2 ng/ml), and subsequent challenge for 90 minutes with mAb29C6 (+) or buffer control (−). One of four representative experiments is shown (98 (2)% MC purity). (B) Surface expression of TGF-RII protein following culture of MC with SCF, or SCF and IL-4; matched isotype control staining in grey (one of three experiments).

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图1gydF4y2Ba

转化生长因子β受体分子的表达(TGF-RI TGF-RII)在人类肠道肥大细胞(MC)。(一)mrna编码GAPDH(452个基点),TGF-RI(224个基点),TGF-RII(261个基点),endoglin(364个基点),和β-glycan(378个基点)逆转录-聚合酶链反应检测的MC文化后14天的干细胞因子(SCF 25 ng / ml)或自洽场和白介素4 (il - 4 2 ng / ml),以及随之而来的挑战与mAb29C6 90分钟(+)或缓冲控制(−)。四种具有代表性的实验显示(98 (2)% MC纯度)。(B)的表面表达TGF-RII蛋白质与自洽场MC的文化之后,或自洽场和il - 4;同形像匹配控制染色灰色(三个实验之一)。gydF4y2Ba

人工培养的肠道MC TGF-β1抑制增长gydF4y2Ba

增加TGF-β1培养基造成明显减少MC复苏从228.9(159.4)% 88.8(88.4)%在自洽场的存在,并从449.3(260.5)% 264.9(241.8)%的自洽场和il - 4(图2)。组胺复苏减少以类似的方式(图2 b)。gydF4y2Ba

Transforming growth factor β1 (TGF-β1) inhibited mast cell (MC) growth in vitro. Purified MC were cultured for 14–21 days in medium supplemented with stem cell factor (SCF 25 ng/ml), with SCF and TGF-β1 (5 ng/ml), with SCF and interleukin 4 (IL-4 2 ng/ml), or with all three cytokines. (A) MC recovery (expressed in per cent; MC number at the start of the culture was set 100%) after culture (symbols indicate individual data performed in duplicate; horizontal bars indicate means (n = 8)). (B) Histamine recovery after culture (cellular histamine content was measured after cell lysis; histamine content at culture start was set at 100%; n = 6). Data derived from the same MC preparations (with or without TGF-β1) are connected.

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图2gydF4y2Ba

转化生长因子β1 (TGF-β1)抑制肥大细胞(MC)体外生长。纯化MC程度天培养基培养补充了干细胞因子(SCF 25 ng / ml),自洽场和TGF-β1 (5 ng / ml),自洽场和白介素4 (il - 4 2 ng / ml),或与所有三个细胞因子。(一)MC复苏(每分中表达;MC数开始后100%)文化的文化(符号表明个人数据进行复制;单杠表明意味着(n = 8))。(B)组胺后恢复文化(细胞溶菌作用后细胞组胺含量测定;组胺含量文化开始被设定为100%;n = 6)。数据来源于相同的MC准备工作(有或没有TGF-β1)相连。gydF4y2Ba

TGF-β1添加到培养基在MC增殖,引起显著减少评估反- ki - 67染色。按照我们先前的研究,gydF4y2Ba^{16日,gydF4y2Ba}^18gydF4y2Ba我们发现12.4 (9)% ki - 67gydF4y2Ba^+gydF4y2BaMC的自洽场和21.3(18.0)%的自洽场和il - 4。TGF-β1几乎取消了MC增殖时添加到文化包含自洽场(1.0 (0.9)% ki - 67gydF4y2Ba^+gydF4y2Ba细胞)或自洽场和il - 4(6.0(1.4) %)(图3)。光学显微镜分析May-Grunwald /染色染色cytospin准备了MC的增加显示形态改变与细胞凋亡相关(例如,减少细胞大小、细胞密度增加,核凝结)细胞培养时的TGF-β1(没有显示)。TUNEL检测实验与cytospin准备,以及膜联蛋白V和碘化propidium双染色流式细胞术检测凋亡MC,证实了这一观察(图3 b, C)。gydF4y2Ba

Transforming growth factor β1 (TGF-β1) increased mast cell (MC) apoptosis and reduced MC proliferation. Experimental conditions are as described in fig 2. (A) MC proliferation assessed by immunocytochemistry as percentage of MC expressing the human nuclear cell proliferation associated antigen Ki-67 after culture (means (SD), n = 5). (B) MC apoptosis determined by terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labelling (TUNEL) assay in MC cytospins after culture (means (SD), n = 3). (C) Surface binding of annexin V during the early course of apoptotic cell death was measured by flow cytometry following culture of MC with stem cell factor (SCF), or SCF and TGF-β1 (one of three representative experiments). IL-4, interleukin 4.

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图3gydF4y2Ba

转化生长因子β1 (TGF-β1)增加肥大细胞(MC)细胞凋亡,减少MC增殖。实验条件如图2所示。(A) MC增殖评估免疫细胞化学和MC的百分比表达人类的核细胞增殖相关抗原ki - 67后文化(意味着(SD), n = 5)。(B) MC细胞凋亡由末端转移酶介导的dUTP尼克结束标签(TUNEL)测定在MC cytospins文化(意味着(SD), n = 3)。(C)表面结合膜联蛋白V的早期凋亡细胞死亡后被流式细胞仪测量文化的MC干细胞因子(SCF),或自洽场TGF-β1(三个代表实验之一)。il - 4,白介素4。gydF4y2Ba

的生长抑制作用TGF-β1浓度依赖的方式出现,与最大抑制大约3 ng / ml,艾德gydF4y2Ba_50gydF4y2Ba大约0.3 ng / ml (n = 2)(图4)。可能的毒性作用的外源性TGF-β1在很大程度上排除使用anti-TGF-β1马伯的抑制作用在不同浓度,废除TGF-β1 MC增长(图4 b)。最大有效浓度的观测anti-TGF-β1马伯无法进一步增强MC复苏与自洽场控制条件表明,内生TGF-β1,MC或血清中,占了我们观察到的影响。gydF4y2Ba

Characteristics of transforming growth factor β1 (TGF-β1) effects on mast cell (MC) growth and phenotype. MC were cultured for 14–21 days as in fig 2, except in (B). (A) Dose dependency of TGF-β1 mediated growth inhibition in MC (means (SD), one of two experiments shown). (B) Effect of a neutralising anti-TGF-β1 monoclonal antibody (Ab) added every four days at different concentrations to the culture medium supplemented with 25 ng/ml stem cell factor (SCF) and 1 ng/ml TGF-β1. MC recovery following culture with SCF alone was set at 100%. The inhibitory effect of TGF-β1 (most left circle, 24% MC recovery) was abolished by anti-TGF-β1 antibody at ⩾10 µg/ml (means (SD), n = 3). (C) Detection of MC proteases by immunocytochemistry revealed an enhanced proportion of MC expressing both tryptase and chymase (MCTC subtype) after culture with additional TGF-β1 (means (SD); n = 5). IL-4, interleukin 4.

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图4gydF4y2Ba

转化生长因子的特点β1 (TGF-β1)对肥大细胞(MC)增长和表型的影响。MC是培养程度天在图2中,除了(B)。(A)剂量依赖性TGF-β1介导生长抑制MC(意味着(SD),两个实验如图所示)。(B)的影响中和anti-TGF-β1单克隆抗体(Ab)每四天在不同浓度添加到培养基补充25 ng / ml干细胞因子(SCF)和1 ng / ml TGF-β1。MC复苏后文化与自洽场仅被设定为100%。TGF-β1的抑制效果(MC复苏最左圆,24%)被废除anti-TGF-β1抗体⩾10µg /毫升(意味着(SD), n = 3)。(C) MC蛋白酶通过免疫细胞化学检测显示一个增强MC的比例表达类胰蛋白酶和chymase (MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba与附加TGF-β1(亚型)文化意味着(SD);n = 5)。il - 4,白介素4。gydF4y2Ba

TGF-β1 chymase表达MC的频率增加gydF4y2Ba

两个人类MC亚型根据蛋白酶已定义内容:类胰蛋白酶积极,chymase - MC (MCgydF4y2Ba_TgydF4y2Ba)和类胰蛋白酶和chymase双重积极MC (MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba)。gydF4y2Ba^{10日,gydF4y2Ba}^30.gydF4y2Ba我们分析这些亚型的免疫细胞化学使用后两蛋白酶抗体针对MC文化与不同的细胞因子(n = 5)。独立于细胞因子添加到培养基中,几乎所有的MC表示类胰蛋白酶。确认之前的数据,chymase表达il - 4的表达下调35.8(20.9)%的MC表达MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba表型的自洽场16.3 (7.7)% MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba在自洽场的存在和il - 4。gydF4y2Ba^16gydF4y2Ba然而,TGF-β1显著增加的比例chymase积极MC 52.5(21.6) %自洽场的存在,并为33.3(10.9)%的自洽场和il - 4,分别(图4 c)。gydF4y2Ba

TGF-β1更改中介发布概要文件在人类肠道MCgydF4y2Ba

TGF-β1不仅影响了MC增长,而且中介发布mAb29C6引起,导致艾格交联。当添加到培养基,TGF-β1减少特定的组胺释放从37.2 (15.1)% 10.6 (11.9)% MC培养时自洽场和从70.5 (16.0)% 33.3 (20.7)% MC培养时自洽场和il - 4(图5)。也获得了类似的调查结果对cys-LT TNF-α生产在MC与TGF-β1培养显著下降(图5 b, D)。相比之下,TGF-β1显著增加PGD2生产从23.3 (15.0)(25.5)40.9 ng / 10gydF4y2Ba^6gydF4y2BaMC (SCF)和23.1 (21.4)(31.1)42.0 ng / 10gydF4y2Ba^6gydF4y2BaMC(自洽场和il - 4,图5 c)。gydF4y2Ba

Transforming growth factor β1 (TGF-β1) dependent modulation of the mediator release profile in purified human intestinal mast cells (MC). After culture for 14 days with or without TGF-β1 (for other culture conditions, see fig 2), MC were washed and challenged with mAb29C6 at 100 ng/ml for 90 minutes (A–C) or 360 minutes (D) to induce high affinity IgE receptor (IgER) crosslinking. Specific release of histamine (A, n = 8), cysteinyl-leukotrienes (cys-LT) (B, n = 5), prostaglandin D2 (PGD2) (C, n = 8), and tumour necrosis factor α (TNF-α) (D, n = 3) is shown. Each symbol in A–C represents one separate experiment performed in duplicate. SCF, stem cell factor; IL-4, interleukin 4.

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图5gydF4y2Ba

转化生长因子β1 (TGF-β1)调制的依赖中介发布概要文件在净化人类肠道肥大细胞(MC)。文化后14天有或没有TGF-β1(其他培养条件,见图2),MC洗和挑战与mAb29C6 100 ng / ml 90分钟(a - c)或360分钟(D)诱导IgE高亲和力受体(IgER)交联。具体释放组胺(n = 8), cysteinyl-leukotrienes (cys-LT) (B, n = 5),前列腺素D2 (PGD2) (C、n = 8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)(D, n = 3)。每个符号在a - c代表一个单独的实验中进行复制。自洽场、干细胞因子;il - 4,白介素4。gydF4y2Ba

TGF-β1减少了IgE受体的表达和自洽场在人类肠道MCgydF4y2Ba

我们还研究了受体的表达参与MC的规定,如gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba伊格尔,与没有TGF-β1 MC培养。如图6所示,TGF-β1强烈自洽场受体的表达下调表达gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba(n = 3)。此外,TGF-β1稍微减少表达α链的高亲和力伊格尔(图6)。gydF4y2Ba

Transforming growth factor β1 (TGF-β1) reduced surface c-kit and high affinity IgE receptor (IgER) α chain expression in cultured human intestinal mast cells (MC). MC were cultured for 14 days in medium supplemented with cytokines, as indicated (same concentrations as in fig 2), and analysed for expression of stem cell factor (SCF) receptor c-kit and IgER α chain. Grey areas represent matched isotype control stainings. One of three representative experiments is shown. IL-4, interleukin 4.

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图6gydF4y2Ba

转化生长因子β1 (TGF-β1)减少表面gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba和高亲和力IgE受体(IgER)α链表达在培养人类肠道肥大细胞(MC)。MC是培养14天与细胞因子中补充,显示(图2中相同的浓度),并分析干细胞因子(SCF)受体的表达gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba和艾格α链。灰色区域表示匹配同形像控制染色。三个代表实验之一。il - 4,白介素4。gydF4y2Ba

TGF-β1促进COX-1和cox - 2的表达在人类肠道MCgydF4y2Ba

研究TGF-β1机制诱导增强MC PGD2生产由伊格尔引发交联,我们分析了表达式的关键酶调节PGD2合成半定量rt - pcr和免疫印迹分析。我们发现信使rna编码cPLA2 COX-1, cox - 2, pgd在MC培养14天的自洽场(数据没有显示)。伊格尔引起的交联mAb29C6 90分钟upregulation cox - 2 mRNA而引起的信使rna编码为其他酶保持不变(数据没有显示)。符合PGD2发布数据,ofTGF-β1在MC文化增强四种酶的表达在激活规范PGD2合成MC(图7)。COX-1和cox - 2 mRNA数据被证实在蛋白质水平通过免疫印迹(图7 b),但大量cPLA2和pgd蛋白质并没有因为TGF-β1而改变。gydF4y2Ba

Expression of enzymes involved in prostaglandin D2 (PGD2) synthesis in mast cells (MC). Purified human intestinal MCs (purity >98%) were preincubated with stem cell factor (SCF), transforming growth factor β1 (TGF-β1), or interleukin 4 (IL-4) for 14–21 days (cytokine concentrations as in fig 2), washed, and challenged with mAb29C6 for 90 minutes to induce high affinity IgE receptor (IgER) crosslinking. (A) Semiquantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction for analysis of mRNAs encoding for GAPDH (452 bp; 23, 25, and 27 polymerase chain reaction cycles), cytosolic phospholipase A2 (cPLA2) (580 bp; 33, 35, and 37 cycles), cyclooxygenase 1 (COX-1) (303 bp; 31, 33, and 35 cycles), COX-2 (305 bp; 31, 33, and 35 cycles), and haematopoietic prostaglandin synthase (PGDS) (342 bp; 31, 33, and 35 cycles). (B) Protein expression of COX-1 (72 kDa), COX-2 (70 kDa), cPLA2 (105 kDa), PGDS (25 kDa), and actin (43 kDa) in MC analysed by western blot. The actin bands in the left column appear much weaker than in the right because these membranes were stripped following detection of the COX proteins and probed again for actin. In (A) and (B), one of three representative experiments is shown.

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图7gydF4y2Ba

表达的酶参与前列腺素D2 (PGD2)合成在肥大细胞(MC)。净化人类肠道MCs(纯度> 98%)preincubated干细胞因子(SCF),转化生长因子β1 (TGF-β1)和白介素4 (il - 4)的程度天(细胞因子浓度在图2),洗,挑战mAb29C6 90分钟诱导IgE高亲和力受体(IgER)交联。(一)半定量的反向transcriptase-polymerase GAPDH信使rna编码的连锁反应进行分析(452个基点;23、25和27聚合酶链反应周期),胞质磷脂酶A2 (cPLA2)(580个基点;33岁,35岁和37个周期),环氧酶1 (COX-1)(303个基点;31日,33岁和35周期),cox - 2(305个基点;31日,33岁和35周期)和造血的前列腺素合成酶(pgd)(342个基点;31、33和35周期)。(B)的蛋白表达COX-1 (72 kDa) cox - 2 (70 kDa), cPLA2 (105 kDa), pgd (25 kDa)和肌动蛋白(43 kDa) MC通过免疫印迹分析。肌动蛋白乐队在左侧列中出现弱于正确的因为这些膜剥离后再次检测COX蛋白质和探索肌动蛋白。 In (A) and (B), one of three representative experiments is shown.

讨论gydF4y2Ba

在目前的研究中,我们首次提供了证据表明TGF-β1控制人类肠道MC功能。我们的数据显示,在TGF-β1,MC增长是弱智,引发的介质释放的MC艾格交联是调制。有趣的是,我们发现许多古典MC介质,如组胺、cys-LTs, TNF-α,认为是负责MC的促炎效应,被释放在TGF-β1的存在一定程度上,虽然只有一个中介,PGD2,调节后刺激艾格MC的交联。观察TGF-β1抑制人类肠道MC函数体外同意先前的报道表明TGF-β1结构上是一个独特的抗炎细胞因子表达在小肠,gydF4y2Ba^1gydF4y2Ba最有可能保持持续的炎症反应引起的细菌和其他腔的抗原在低水平。这个概念被发现,支持删除TGF-β1 TGF-RII基因造成了严重的结肠炎,MC,以及许多其他的细胞,可能涉及。gydF4y2Ba^6,gydF4y2Ba ^7gydF4y2Ba显然,TGF-β1不仅控制着粘膜免疫系统诱导IgA生产和生成TgydF4y2Ba_HgydF4y2Ba3监管细胞还通过控制炎症效应细胞如巨噬细胞、gydF4y2Ba^2,gydF4y2Ba ^3gydF4y2Ba嗜酸性粒细胞,gydF4y2Ba^4gydF4y2Ba和MC,如下所示,所有正常的人类肠道固有层中发现。gydF4y2Ba

先前报告的影响在MC TGF-β1大多局限于小鼠系统。gydF4y2Ba^{19 -gydF4y2Ba}^24gydF4y2Ba这些数据不能很容易地转移到人类系统由于MC来自不同物种的异质性和身体的网站。gydF4y2Ba^10gydF4y2Ba此外,大多数研究仅检查TGF-β1影响MC增殖,不是中介,MC的主要效应函数。在这里,我们将这些数据证明回收率的组织派生人类MC强烈减少TGF-β1的存在。的生长抑制作用TGF-β1伴随着减少MC增殖和增强MC细胞凋亡,并且出现在类似TGF-β1水平的浓度范围在人血浆中找到。gydF4y2Ba^{31日gydF4y2Ba}这样TGF-β1影响上皮已报告之前,内皮,和造血的细胞,包括嗜酸性粒细胞和小鼠MC,在所有这些TGF-β1引起细胞周期阻滞。gydF4y2Ba^3,gydF4y2Ba ^22gydF4y2Ba诱导的细胞凋亡TGF-β1还发现在人类淋巴瘤细胞系,白血病细胞,正常血液嗜酸性粒细胞。gydF4y2Ba^{3 -gydF4y2Ba}^5gydF4y2BaMC TGF-β1生长抑制的机制还不清楚。gydF4y2Ba^{19日,gydF4y2Ba}^20.gydF4y2Ba根据我们的数据,很可能对人类肠道TGF-β1施加其影响MC在很大程度上表达下调gydF4y2Bac - kitgydF4y2Ba自洽场的受体,独特的柱状细胞生长因子在啮齿类动物和人类。gydF4y2Ba^{10日,gydF4y2Ba}^11gydF4y2Ba最后,我们的数据同意一些肥大细胞增多症患者的临床观察TGF-RI - MC,与预后差相关条件,相比之下,那些TGF-RI积极的MC。gydF4y2Ba^32gydF4y2Ba

先前的研究在TGF-β1对中介发布的影响产生了相互矛盾的结果。据报道,TGF-β1并不影响组胺,beta-hexosaminidase,或cys-LT释放IgE依赖激活后,gydF4y2Ba^{21日,gydF4y2Ba}^22gydF4y2Ba它抑制抗原诱导释放组胺和TNF-α依赖的细胞毒性,gydF4y2Ba^23gydF4y2Ba甚至它增强IgE依赖cys-LT生产而不影响小鼠MC beta-hexosaminidase释放。gydF4y2Ba^24gydF4y2Ba首次在这里,我们调查的影响TGF-β1中介发布在成熟的人类MC。我们发现TGF-β1开关正常MC艾格交联反应从unselective释放多种炎症介质PGD2选择性释放。MC释放优先PGD2没有报道之前,并可能导致TGF-β1免疫调节的影响称为PGD2是最近发现的受体的配体CRTH2选择性地诱导趋化作用的TgydF4y2Ba_HgydF4y2Ba2细胞,嗜碱性粒细胞,嗜酸性粒细胞。gydF4y2Ba^33gydF4y2Ba

应对可能的机制导致激活选择性upregulation PGD2生产MC用TGF-β1预处理,我们研究的表达艾格α链和关键酶参与PGD2合成。伊格尔α链表达的差别我们发现轻微的对这些文化与TGF-β1后可能导致释放介质如组胺,cys-LT, TNF-α减少TGF-β1。PGD2 TGF-β1诱导增加生产MC激活艾格交联似乎直接关系到增强COX-1和2 mRNA的表达和蛋白质TGF-β1预处理后MC. cPLA2和pgd也可能导致TGF-β1依赖增强PGD2生产作为信使rna编码这些酶增强MC挑战与TGF-β1虽然蛋白质含量在90分钟的观察期间保持不变。这样的时间可能太短,因此,不排除的可能性增加cPLA2和pgd蛋白质含量在之后的时间点发生(例如,MC重复刺激后几个小时到几天)。gydF4y2Ba

TGF-β1不仅影响经济增长,有趣的是,生存和中介发布还MC的表型。除了TGF-β1人类MC文化增强MC的百分比表达类胰蛋白酶和chymase (MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba)。这MC亚型,也叫“连接组织类型MC”,发现主要在皮肤和肠道黏膜下层。相比之下,MC表达类胰蛋白酶但没有chymase (MCgydF4y2Ba_TgydF4y2Ba),命名为“mucosa-type MC”,主要集中在肺部和肠道粘膜,gydF4y2Ba^{10日,gydF4y2Ba}^30.gydF4y2Ba被TGF-β1减少。据推测,TGF-β1诱导chymase表达式而不是选择性凋亡在MCgydF4y2Ba_TgydF4y2Ba因为它是表明TGF-β1诱导新创的鼠标MC蛋白酶1的表达,chymase-like蛋白酶,在发展中小鼠骨髓衍生MC。gydF4y2Ba^34gydF4y2Ba这些调查结果表明,成熟的人体组织MC维护能力改变他们的表型取决于外生因素如TGF-β1或il - 4,在这方面具有相反的效果。与我们的体外研究结果一致,MC在TGF-β1积累丰富的环境中,如肠狭窄,主要属于MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba亚型。gydF4y2Ba^{11日,gydF4y2Ba}^13gydF4y2Ba最后,介质的形象后,我们观察到的MC文化的存在TGF-β1可能反映了MC的变更gydF4y2Ba_TgydF4y2Ba/ MCgydF4y2Ba_TCgydF4y2Ba在我们MC的人口比例。gydF4y2Ba

我们的数据可能有几个临床意义TGF-β1似乎是一个独特的监管机构的响应性炎症细胞如MC对不同的引发剂。炎性刺激,如脂多糖、TNF-αIL-1β,释放在细菌感染,Smad7发现上调表达,细胞内蛋白质抑制TGF-β1信号。gydF4y2Ba^35gydF4y2Ba这反过来可以促进MC的激活和其他炎症细胞需要发起一个先天免疫反应。在以前的体内实验中,已经清楚地表明,MC激活宿主防御细菌感染是必要的,因为他们的介质,包括TNF-α,使细菌所需的招募中性粒细胞间隙感染的网站。gydF4y2Ba^36gydF4y2Ba没有炎症的信号,TGF-β1,除了它对特定的免疫反应的影响,可能会限制先天免疫反应,除非他们是必需的。这个假设意味着TGF-β1通路故障导致无法控制炎症。事实上,MonteleonegydF4y2Ba等gydF4y2Ba最近报道这样的条件表明Smad7调节炎症性肠病。gydF4y2Ba^{37岁的gydF4y2Ba}^38gydF4y2Ba而TGF-β1水平降低或受损TGF-β1信号可能导致控制炎症,条件与正常TGF-β1水平很可能以控制组织MC数量和活动,支持“TgydF4y2Ba_HgydF4y2Ba2环境”造成的优惠后释放PGD2 MC激活。相比之下,增强TGF-β1水平可能发生在慢性炎症,可能在某种形式的负反馈机制,平行进行组织修复过程。这可能导致纤维组织转变通常发生在慢性炎症的过程中(例如,在克罗恩病、肠纤维化和狭窄导致严重的临床问题)。显然,进一步的研究是必要的确认TGF-β1活动受损粘膜的病理生理作用。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

作者感谢吉塞拉威尔和妮可Steegmann优秀的技术援助。gydF4y2Ba

这项工作是支持的德意志Forschungsgemeinschaft (SFB621-A8渣打银行)。gydF4y2Ba

引用gydF4y2Ba

↵gydF4y2Ba

Babyatsky兆瓦gydF4y2BaRossiter G Podolsky DK。转化生长因子α和β的表达在结肠粘膜炎症性肠病。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba110年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba975年gydF4y2Ba-84年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Letterio JJgydF4y2Ba,罗伯茨AB。及调节免疫反应。gydF4y2Ba为ImmunolgydF4y2Ba1998年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba16gydF4y2Ba:gydF4y2Ba137年gydF4y2Ba-61年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Fortunel没有gydF4y2Ba,Hatzfeld Hatzfeld农协。转化生长因子:在造血作用的规定多效性的作用。gydF4y2Ba血gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba96年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba2022年gydF4y2Ba-36年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

阿拉姆RgydF4y2Ba活力四射,P,斯塔福德,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba转化生长因子β废除的影响hematopoietins嗜酸性粒细胞和诱发细胞凋亡。gydF4y2BaJ Exp地中海gydF4y2Ba1994年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba179年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1041年gydF4y2Ba5。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Blobe GCgydF4y2Ba、Schiemann WP Lodish高频。转化生长因子β在人类疾病的作用。gydF4y2BaN拉米夫地中海gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba342年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1350年gydF4y2Ba8。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Shull毫米gydF4y2BaOrmsby我煮布锅AB,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba鼠标转化生长因子1基因的靶向破坏导致多病灶的炎性疾病。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba1992年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba359年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba693年gydF4y2Ba9。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Leveen PgydF4y2Ba,拉尔森J, Ehinger M,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba诱导破坏转化生长因子β2型受体基因在小鼠体内移植引起致命的炎症性疾病。gydF4y2Ba血gydF4y2Ba2002年gydF4y2Ba;gydF4y2BaOne hundred.gydF4y2Ba:gydF4y2Ba560年gydF4y2Ba8。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

桑德森NgydF4y2Ba,伊P因子VgydF4y2Baet al。gydF4y2Ba成熟的肝脏表达转化生长因子β1在转基因老鼠在多个组织病变结果。gydF4y2Ba《美国国家科学院刊年代gydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba92年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba2572年gydF4y2Ba6。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

森那美PJgydF4y2Ba格雷厄姆•FL,邢Z,gydF4y2Baet al。gydF4y2BaAdenovector-mediated基因转移的积极转变增长factor-beta1引发长期严重的大鼠肺纤维化。gydF4y2Ba中国投资gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2BaOne hundred.gydF4y2Ba:gydF4y2Ba768年gydF4y2Ba-76年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

梅特卡夫DDgydF4y2Ba潘D Mekori丫。肥大细胞。gydF4y2Ba杂志牧师gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba77年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1033年gydF4y2Ba-79年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

比肖夫SC的gydF4y2Ba。人类肠道肥大细胞的调节和功能。:Marone G, Lichtenstein LM,加利SJ, eds。gydF4y2Ba肥大细胞和嗜碱粒细胞gydF4y2Ba。纽约:学术出版社,gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba541年gydF4y2Ba-66年。gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

芭芭拉克gydF4y2BaStanghellini V·德·乔治·R,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba在邻近结肠神经激活肥大细胞与腹痛,肠易激综合症。gydF4y2Ba胃肠病学gydF4y2Ba2004年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba126年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba693年gydF4y2Ba-702年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Gelbmann厘米gydF4y2BaMestermann年代,V,总值gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba束缚在克罗恩病的特点是肥大细胞的积累与层粘连蛋白而不是与纤连蛋白或vitronectin colocalised。gydF4y2Ba肠道gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba45gydF4y2Ba:gydF4y2Ba210年gydF4y2Ba-17年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Rottem米gydF4y2Ba、船体G,梅特卡夫弟弟。演示微分细胞因子对肥大细胞的影响来源于小鼠骨髓和外周血单核细胞。gydF4y2BaExp内科杂志gydF4y2Ba1994年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba22gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1147年gydF4y2Ba-55年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

比肖夫SC的gydF4y2Ba,Schwengberg S, R,拉布gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba功能性质的人类肠道肥大细胞培养在一个新的文化系统:增强的IgE receptor-dependent中介发布和响应干细胞因子。gydF4y2BaJ ImmunolgydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba159年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba5560年gydF4y2Ba7所示。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

比肖夫SC的gydF4y2BaSellge G,洛伦兹,gydF4y2Baet al。gydF4y2Bail - 4增强扩散和中介释放人类肥大细胞在成熟。gydF4y2Ba《美国国家科学院刊年代gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba96年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba8080年gydF4y2Ba5。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
Ochi HgydF4y2Ba问,Hirani WM,元,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba辅助T细胞2型cytokine-mediated comitogenic反应和CCR3表达在人类肥大细胞在体外的分化。gydF4y2BaJ Exp地中海gydF4y2Ba1999年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba190年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba267年gydF4y2Ba-80年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

格布哈特TgydF4y2BaSellge G,洛伦兹,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba培养人类肠道肥大细胞表达功能IL-3受体和应对IL-3通过提高经济增长和IgE receptor-dependent中介发布。gydF4y2Ba欧元J ImmunolgydF4y2Ba2002年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba32gydF4y2Ba:gydF4y2Ba2308年gydF4y2Ba-16年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba 网络的科学gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Mekori丫gydF4y2Ba、梅特卡夫弟弟。转化生长因子使干细胞factor-mediated IL-3剥夺后救援的肥大细胞凋亡。gydF4y2BaJ ImmunolgydF4y2Ba1994年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba153年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba2194年gydF4y2Ba-203年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

杜布瓦厘米gydF4y2BaRuscetti FW Stankova J,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba转化生长因子调节c - kit消息造血祖细胞的稳定和细胞表面蛋白的表达。gydF4y2Ba血gydF4y2Ba1994年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba83年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba3138年gydF4y2Ba-45年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Broide DHgydF4y2Ba沃瑟曼SI Alvaro-Gracia J,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba转化生长因子1选择性地抑制IL-3-dependent肥大细胞增殖而不影响柱状细胞功能或分化。gydF4y2BaJ ImmunolgydF4y2Ba1989年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba143年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba1591年gydF4y2Ba7所示。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

丰田NgydF4y2Ba,桥本Y,松尾,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba转化生长因子β1抑制IL-3 - IL-4-dependent鼠标连接组织类型柱状细胞增殖。gydF4y2Ba拱北京医学ResgydF4y2Ba1995年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba287年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba198年gydF4y2Ba-201年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

Bissonnette等等gydF4y2Ba、Enciso JA Befus广告。TGF-beta1抑制组胺的释放和肿瘤坏死因子-α肥大细胞通过自分泌途径。gydF4y2Ba我和细胞杂志gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba16gydF4y2Ba:gydF4y2Ba275年gydF4y2Ba-82年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

桑切斯Mejia ROgydF4y2Ba林BK,手臂JP。矩阵转换增长来源于肥大细胞的小鼠骨factor-beta1质数的高亲和性Fc受体增加免疫球蛋白E-dependent类二十烷酸生物合成。gydF4y2Ba我和细胞杂志gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba22gydF4y2Ba:gydF4y2Ba557年gydF4y2Ba-65年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba CrossRefgydF4y2Ba PubMedgydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

奥尔森NgydF4y2BaUlfgren AK,尼尔森g的肥大细胞趋化现象的活动从类风湿患者滑液。gydF4y2Ba安大黄说gydF4y2Ba2001年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba60gydF4y2Ba:gydF4y2Ba187年gydF4y2Ba-93年。gydF4y2Ba

OpenUrlgydF4y2Ba 文摘gydF4y2Ba/gydF4y2Ba免费的gydF4y2Ba全文gydF4y2Ba
↵gydF4y2Ba

张HgydF4y2Ba肖AR,麦,gydF4y2Baet al。gydF4y2BaEndoglin是一个组件的转化生长因子β受体(TGF)复杂的人类前b的白血病细胞。gydF4y2BaJ ImmunolgydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba156年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba564年gydF4y2Ba-73年。gydF4y2Ba

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↵gydF4y2Ba

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Yamashima TgydF4y2BaSakuda K, Tohma Y,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba前列腺素D合酶(beta-trace)在人类蛛网膜和脑膜瘤细胞:角色在脑脊液细胞标记或吸收,肿瘤发生,和钙化过程。gydF4y2BaJ >gydF4y2Ba1997年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba17gydF4y2Ba:gydF4y2Ba2376年gydF4y2Ba-82年。gydF4y2Ba

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李CYgydF4y2Ba,门敏七月肥大细胞增多症和纤维化:细胞因子的作用。gydF4y2BaInt拱过敏ImmunolgydF4y2Ba2002年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba127年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba123年gydF4y2Ba6。gydF4y2Ba

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平井一夫HgydF4y2Ba田中,K, Yoshie啊,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba前列腺素D2选择性地诱导趋化作用的辅助T 2型细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞通过seven-transmembrane受体CRTH2。gydF4y2BaJ Exp地中海gydF4y2Ba2001年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba193年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba255年gydF4y2Ba-61年。gydF4y2Ba

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比泽尔米gydF4y2Ba梁,冯阻止G, D,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba抑制的机制及/ nf -κB / RelA SMAD信号。gydF4y2Ba基因开发gydF4y2Ba2000年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba14gydF4y2Ba:gydF4y2Ba187年gydF4y2Ba-97年。gydF4y2Ba

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Malaviya RgydF4y2Ba罗斯,Ikeda T, E,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba肥大细胞中性粒细胞涌入调制和细菌通过tnf间隙感染的网站。gydF4y2Ba自然gydF4y2Ba1996年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba381年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba77年gydF4y2Ba-80年。gydF4y2Ba

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Monteleone GgydF4y2Ba克罗夫特,Kumberova海里,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba阻塞Smad7恢复TGF-beta1信号在慢性炎症性肠病。gydF4y2Ba中国投资gydF4y2Ba2001年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba108年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba601年gydF4y2Ba9。gydF4y2Ba

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Monteleone GgydF4y2Ba曼J, Monteleone我,gydF4y2Baet al。gydF4y2Ba改变增长factor-beta1负监管的失败保持持续NF-kappaB激活肠道炎症。gydF4y2BaJ临床生物化学gydF4y2Ba2004年gydF4y2Ba;gydF4y2Ba279年gydF4y2Ba:gydF4y2Ba3925年gydF4y2Ba-32年。gydF4y2Ba

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脚注gydF4y2Ba

利益冲突:没有宣布。gydF4y2Ba

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