简介端粒覆盖和保护染色体DNA，随着每次细胞分裂达到临界点而缩短，最终细胞被抑制在G1期，进入细胞衰老状态。这一过程已在不同组织的正常衰老和慢性疾病中得到证实。小鼠研究表明，肝脏端粒缩短易导致肝硬化。很少有研究检查了年龄增加对健康人类肝脏端粒长度的影响。用Southern blotting法测量肝脏中的端粒长度，假设结果对肝细胞具有代表性。然而，肝脏由多种细胞组成，包括肝细胞、库普弗细胞、星状细胞、淋巴细胞和胆管细胞。开发了一种大容量四色荧光原位杂交(Q-FISH)技术来测量每种细胞类型中的端粒长度。

目的确定年龄增加对健康肝脏肝细胞、库普弗细胞、星状细胞、CD4或CD8淋巴细胞和胆管细胞中端粒长度的影响。

方法对73份“时间为零”的肝活检组织进行Q-FISH，这些肝活检来自于肝移植时仔细挑选的无再灌注损伤的肝供体，年龄范围广泛(5-79岁)。分别用Hepar-1、CD68、SMA、CD4、CD8和CK-19单克隆抗体鉴定肝细胞、Kupffer细胞、肝星状细胞、CD4或CD8淋巴细胞和胆管细胞;细胞核用DAPI反染色，端粒用特定的cy5标记PNA探针鉴定。用Olympus ScanR显微镜和软件进行图像采集和数据分析。在GraphPad PRISM 5.0上使用线性回归测量和分析平均端粒荧光强度。

结果Q-FISH方法能够在石蜡包埋的肝脏切片中对各种细胞系中的端粒进行大容量分析。平均每个肝脏分析了4万个肝细胞、3万个库普弗细胞、1.5万个胆管细胞和4000个肝星状细胞、肝内CD4和CD8淋巴细胞。肝星状细胞在所有年龄段的端粒长度最长，而其他细胞类型的端粒长度相似。健康肝脏的库普弗细胞和星状细胞内的端粒随着年龄的增加而缩短，这是可以预料的(p=0.024和p<0.0001)。相反，健康肝脏的肝细胞、胆管细胞和淋巴细胞的端粒不随年龄的增加而缩短。

结论健康肝脏内的细胞衰老程度不同。库普弗细胞和星状细胞中年龄相关端粒缩短与胆管细胞、肝细胞和肝内淋巴细胞中端粒长度随年龄变化的差异是出乎意料的，但可能反映了肝细胞和胆管细胞的低周转率。年龄对这些细胞谱系的影响的缺失表明，再生的潜力随着年龄的增长而保持，并对在肝脏衰老研究中选择对照组织具有重要意义。